Введение к работе
Актуальность проблшяі.
Исследования структурной организации и принципов фуїжциони-
ровашія биологических ыембрал - актуальная задачэ современно!! молекулярной биологии. Для кзучеіпіл структуры п динамики мэмОран d последнее время широко используются цвтода дифракции нейтронов и ^Н-ЯМР-спектроскопия, дапдіе непосредственную информацию о по-ЛВ1ШЮСТЯ галакуляршвс фрагаептоз. их взоимораспологонии. ориентации. Пря пспользовошш дагашх методов необходимо наличие в мембрана двйтеромеченшс компонентов, то есть, возникает задача
сзнтеза аналогов природних ляпвдов, содержащих двлтериевую метку.
Нетоди 31Р- л гН-ШР~спек'гроскогат применяются в ряде лабораторий гщ>а для рсзрешопял вопроса о механизме биологического . действия так пазываемих лнпвдов с простой еффной связью (ethor Іірібз). Соединения этой группи отличается от обычннх ацильных ли-. - іглдов способом присоединения гвдрофсОпах цепей к гядрофкльнск час- т колекулы: простая офлрпая гашь (ажнльние лшшдц) или . чис-вивільшсСирігая связь <шіаама);о:т.іш) вместо слояюэфйрнои СВЯЗИ.
Проблотдп вгяскенля Сголсіїпоскпх функций лгатидов о простой гфярпой спязъп считается восьма актуальной в лтшдологяи нз про-тягяпші носколькпх дэсягалеткЯ. Способность соединений этого тала-в первую очередь олкилылпс лшидов-^вызывать множество физиологических Аффектов и пденгсДикеция таких вдсокоиегивных липк-дов как фсстор активации тромбоцитоз (1-0-аЕжиі--2-.цота.я-ап-гліщо-ро-3-фосфохолпп), являвдияся медиатором воспалительных и аллергических реакций» мощные мутагены лилидноЯ лрирода-фекапентаены, обладающие противоопухолевой и иммуномодулкрущей активяостьв
* -2" аналога алкиллизофосфолипидов, в значительной степени определяют необходимость разрешения этой проблема.
Механизм биологического действия липидов. с простой эфирной > -. связью может реализоваться на двух различша уровнях: в структур- '--ной организации мембраны т. в специфичвскои взаимодействии с раз- -личными ферментами и рецепторами, например, фосфолипазой Ао или ~-. рецепторами лилидного фактора активациа тромбоцитов. . ..
Мокно оиїдать, что применение методов ЬН-ЯМР- В -"'р-ЯМР-спектроскопии для изучения структуры модельных мембран в -их взаимодействия с лиголитачвскямй ферментами, в частности фосфолипазой. Ag, . приведет г решению ряда теоретических п ^ практических проблем молекулярной биологии. .-
Данная работа выполнена в соответствия с планом научшг не- -следований кафедры ХГТОС МИТХТ им.М.В.Ломоносова по теш #11-865 "Выделение и синтез отдельных молекулярных типов лшвдов, вставь- .' зоваш:э их для изучения клеточных взаимодействий и создание на их основе диагноетачестао. и лечебных препаратов* (номер государственной регистрации 0186.0132597.'. - ..
Цель работы.Настоящая робота.досвятова синтезу фосфатидплхо- . линов алкилыюго и вцшшюго типов, содергазше селективные дайто-риевда метки в тадрсфилькой и гидрофобной частях молекула, с ша~ сцщекными и венаешцонннми тодрофобншш замэстптелямш и изучена» мембран, сформированных кз этих лкгадоз, штодагя 2Н~ЯмР-спектроскопил и 31Р-ЯМ?-спектроскошш. . .
Научная новизна а практическая ценность работа. Синтезирован ряд селективно моченых дейтерием фосфа«даш$пщов: 1-(2-2Н2)-хшльшгоші-2-пальмятоїш-гас-глвд9ро-3-фосфо-(3'^3)-хаЕВН
( Hg-ДПВХ). 1-(2-2Н2)-пальюттоил-2-0-гвксад8ШЛ-гас-глицеро-3-фос-фо-(Г-2Нз)-х<шш (2Н5-ПГФХ). 1-0-(2-2 )-гексадецил-2-пальмитоил-гас-глпц9ро-3-фосфо-(г-2Нд)-іоліш (2Н5-ПЮХ) и 1-0-(2-2 )-гекса-дацзл-г-О-гвксадвцпл-гас-глгаеро-З-фосфо- (r-2%) -xojhh (^-ДГОх ). Дагашэ соединения представляют все возможные комбинации присоединения алифатических заместителей к глицериновому фрагменту молекули за счет простой или слогэтой эфирной связи.
Депторомоченыв липида Сили использованы для сравнительного
изучения образуемшс ими мембранных структур методом
Н-ЯУР-споитроскопки. Получэла информация о коиформационно-
" дшашчосклх своАсївах аліаїльпцх лшидов и структуре образуемых
па мэибрая.
Стттаспровглз ряд иопасшцопних фосфатидилхолшюв оцильпого а олкильпого toil, лзляицихся потонциалышми жшибиторами фосфоли-nscu Ag. Для лзучэнля ззмгаодэпствпя фосфолипази Aj> с фосфолипид-" гп:.с! іхмикуляоі з ссставэ липидиогс олслоя был использован новый подход, отеэвавлыЯ пэ ксполізсвопии спектроскопии Р-Ш\ гозво-ляхяай» регистрировать струі№урга»'е езмонэнжя d мембране в ііроцоссз гидролиза яагоідсз.
Ifn згггигу заносятся слэдуздяэ основные положения: исследования по срасіительпсму пзучоївш кснфорг/зикошо-динемичвскю: свойств ' фосЗатядалхолгноз с простоя и слоиюаішшрй связью в составе мо-. дальніх иэмбрай'методом 2Н-ЯМР спектроскопии. Метода введения дей-' торязгоЯ котка в гидрофальнуа и гядрефобнуо части молекули фосфо-' яявад'а, сїятоз дэАтвромэчеиих, фосфатидилхолшгов. Исследования взезгадопстаня фосфолипази Л2 с модельними липяднши мембранами катодом 31Р-ИР спектроскопии. Сіштоя пенасышшых фофатидилхоли-
нов влкильного и ацильного типа - ингибиторов фэсфолипазы Lp.
Апробация: Результата, наложенные в диссертации, доложены на международном семинаре "Investigation of tho biological and lipid' membranes, amphlphlls by neana of neutron scattering" (Дубна, 19-21.05.921 и конференции "'&ологическк ективішв соединения, синтез и использование" (Пенза. 28-29.09.92).
Публикации: По материалам диссертации опубликовано 3 статьи к тезисы конференции.
Содержанке работа: Диссертационная работе изложена на страницах моаинописного теиста и состоит из слодуидих разделов: шэодэ-iute, литературная обзор, поев:' ;вшшй методам введения селективных изотопных меток, обсуадзнио результатов, експериментальная часть, вывода и список использованной литературы.
