Введение к работе
Актуальность проблемы. В настоящее время имеются многочисленные сведения о широком диапазоне физиологического действия яда яаб, в т.ч. антибиотическом, радиозашитном, противоопухолевом и др. Наиболее ярко Еыражеяным действием яда является его кардиотропность, что представляет большой интерес для практического здравоохранения. Однако отсутствуют работы по исследованию молекулярных механизмов действия яда и природы физиологических ответов организма, что необходимо для глубокого понимания протекающих в организме процессов с целью осознанного управления метаболизмом в живых системах.
Креме того, одним из важных направлений фармакологии является поиск и изучение биологически активных веществ природного происхождения и создание на их. основе новых фармакологических препаратов с Еыражеянам биологическим действием при условии безвредности для организма. Яд зеленой жабы'Виго viridis, являющийся предметом исследования, обладающий широким спектром Физиологических эффектов с давно обнаруженными лекарственными свойствами и используемый в цельном виде, может рассматриваться как прототип биологически активного средства, которой нуждается в выяснении механизма реализации этих эффектов на клеточном уровне с целый выявления активного действующего начала и дальнейшего совершенствования препарата. В связи с этим изучение яда среднеазиатской зеленой жаби, механизма действия- его Физиологически активных компонентов на клеточные системы организма представляется важным и актуальным.
Представляют интерес и белково-пептидкые компоненты жабъего яда. Практически отсутствуют работы по исследованию этой группы веществ. Выделение фосфолипазы из яда зеленой дабы Bufo viridis, одного из его белковых компонентов-, определение ее сне-
- 4 -цифичности, каталитических характеристик позаодят поповнить этот класс ферментов, что может иметь определенное.теоретическое значение.
' Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение действия яда среднеазиатской аеленой жабы Bufo viri-dis, его физиологически активных компонентов на клеточные системы организма. В ходе исследования решались следующие задачи:
выделение и очистка физиологически активных компонентов яда зеленой жабы Bufo viridis,
Еыделение фссфолипазы, определение ее специфичности : каталитических свойств ( рН-,. температурной-, Са2+-зависимости, ' константы Михаэлиса) ,
изучение действия яда аеленой жабы и двух его буфади-енолидов на транспортные АТРааы (Cas+-, Mg2+-, Na'VK"*'-),
изучение'1 «действия яда и его буфадиенолидов на важнейшую клеточную систему- аденилатциклазную, включающую ферменті АЦ, сАМР-зависимые ПК и ФДЭ CAMP.
Научная новизна и практическая значимость исследования Впервые из яда зеленой жабы Bufo viridis методом биоспецифической хроматографии выделена в индивидуальном виде фосфоли паза, определена ее специфичность как фосфолилазы Аг, изучей ее каталитические свойства.
Впервые изучено действие яда аеленой жабы Bufo viridis его основных токсических компонентов на ферменты аденилатцик лазной системы. Показано участке фермектоЕ АД-системы в реали аадии эффектов жабьего яда. Установлено дозозависимое действи яда жабы 8.viridis на ферменты АЦ-систеьш, корреляция меяд .активностями АД и с AMP-зависимыми ПК под, действием яда лаб В.viridis-в опытах in vtvo и in vitro.
Установлено иягибкрувщее действие буфадиенолкдов яда зеленой хабы гшабуфоталина и аренобуфагина на активности фермен-тов АЦ и сАМ?-зависимых протеинкиназ в дсзэ 1/10 LD50 в опыта/. in vivo, а таккэ в опытах in vitro.
Полненные данные помогут интерпретировать рагличкые сиэн-слогнческие эффекты яда, в т.ч. иммуномсдуляцмо, кардиотреп-ность и некоторые другие.
Апробация работн и публикации. Основные материалы диссертации докладывались и обсуждались на 1-й конференции оксхісіи-кое Таджикистана (сентябрь 1993 г.), на 2-м симпозиуме по биохимии клеточных ме«бран (Бари. Италия, сентябрь 1993г.), на 2-й конференции биохимиков Узбекистана (ноябрь 1993г.), на 1-м международном симпозиуме. по химии природных соединений (Ташкент, 1394 г), на научной конференции '.'Структура и функции биологических мембран" (Таикент, март 1995 г)..По теме диссертации опубликованы 4 статьи и тезисы 9 докладов.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 123 страницах машинописного текста и состоит из введения, литературного обзора, эг-сперимеяталъной части, результатов и их обсуждения, заключения, еыеодсз и списка датируемой литературы. Работа содержит 12 рисунков, 7 таблиц и 1 схему. Список литературы Еключает 225 ссылок.
