Введение к работе
Актуальность темы
В настоящее время во всем мире, в том числе и в России, онкологические заболевания являются одной из самых частых причин инвалидизации и смертности трудоспособного населения. В связи с этим, в настоящее время многие исследования сосредоточены на поиске новых подходов к противоопухолевой терапии.
В последние годы в качестве лекарственной мишени (таргетная терапия) изучается рецептор эпидермального фактора роста (epidermal growth factor receptor – EGFR), как молекулярный фактор, ответственный за митогенную активность опухолевого роста. EGFR – трансмембранный гликопротеин молекулярной массой 170 kD, обладающий тирозинкиназной активностью. EGFR (или HER1) относится к семейству рецепторов эпидермального фактора роста, которое также представлено другими его видами: erbB2/HER2–neu; erbB3/HER3 и erbB4/HER4. EGFR экспрессируется на поверхности как нормальных, так и трансформированных эпителиальных клеток, а также участвует в регуляции клеточного роста и дифференцировки. Гиперэкспрессия EGFR опухолевыми клетками ассоциируется с поздними стадиями и метастатическим фенотипом заболевания, коррелирует с плохим прогнозом, резистентностью к проводимой лекарственной и лучевой терапии. Наиболее хорошо гиперэкспрессия EGFR изучены в бронхиолоальвеолярных аденокарциномах легких, инвазивном раке молочной железы, раке толстой кишки, раке предстательной железы.
Ингибиторы EGFR – группа препаратов, которые конкурентно связываясь с активными точками тирозинкиназы С (интрацеллюлярная часть) блокируют процесс фосфорилирования, и тем самым препятствуют фосфорилированию белков–переносчиков сигналов. Одним из ингибиторов EGFR является Гефитиниб (Иресса). Он одобрен в 2003 г. Управлением по контролю качества продуктов и лекарств США для лечения химиорезистентного диссеминированного немелкоклеточного рака лёгкого. Ответ на терапию гефитинибом в общей популяции больных наблюдается лишь у 10–20 % пациентов (Fukuoka M., 2003). В то же время исследования, в которые были включены больные с мутацией гена EGFR, выявили невиданную ранее для этого заболевания частоту объективных ответов (от 55 до 100 %), при этом медиана времени до прогрессирования опухоли почти вдвое превышала исторический контроль (Lynch T. J., 2004). Несравненно высокая эффективность терапии ингибиторами тирозинкиназных рецепторов у больных с активирующей мутацией гена EGFR требует обязательного определения данной мутации у больных с аденокарциномой лёгкого.
Многие исследователи указывают на зависимость между выраженным клиническим ответом к ингибиторам EGFR и наличием соматических мутаций внутри тирозинкиназного домена EGFR при многих опухолях эпителиальной природы (Blons H., 2006; Zakowski M.F., 2009). Наиболее подробно изучены мутации EGFR при бронхиолоальвеолярном раке легкого в группе немелкоклеточных раков легкого. Выявлены наиболее часто встречающиеся мутации EGFR (экзоны 19 и 21), изменяющие пространственную структуру центров связывания тирозинкиназной части EGFR (Cohen S., 1974; Cohen D., 2007). Большинство исследователей указывают на молекулярную гетерогенность мутаций (Cohen S., 1974; Blons H., 2006; Zakowski M.F., 2009).
Часть исследователей указывают на отсутствие стандартов в области иммуногистохимического определения сверхэкспрессии EGFR, так как результаты определения мембранного и цитоплазматического EGFR достоверно отличаются друг от друга, но не коррелируют с общей выживаемостью и рецидивированием заболевания (Cohen S., 1974; Cohen D., 2007).
В некоторых статьях указывается на различия в количестве и интенсивности окрашивания при иммуногистохимическом методе исследования опухолевых клеток с сверхэкспрессией EGFR в первичной опухоли и метастазах, в частности, при светлоклеточном раке почки (Badalian G., 2007).
Работ содержащих описание иммунофенотипа с мутацией гена EGFR светлоклеточным раком почки нам не встретилось, хотя имеются публикации, описывающие иммунофенотипический статус (Ki–67, P–53, Bcl–2) как при светлоклеточном раке почки (Suzuki K., 2002), так и при немелкоклеточном раке легкого (Radovi S., 2007).
Таким образом, анализ морфологических и иммуногистохимических особенностей опухолей с мутацией EGFR, в частности светлоклеточного рака почки, бронхиолоальвеолярного рака легкого, способен выявить те морфологические и иммуногистохимические критерии, которые могут способствовать как определению прогноза заболевания, так и выбора адекватного метода лечения.
Цель исследования. Сравнительный анализ морфологических и иммуногистохимических особенностей опухолей у больных с мутацией гена EGFR и без неё.
Задачи исследования:
-
Изучить частоту наиболее часто встречаемых мутаций в гене EGFR у больных с аденокарциномой лёгких Северо–Западного региона РФ.
-
Оценить возможную роль экспрессии Ki–67, P–53, Bcl–2, рецепторов эстрогена альфа (ER–), EGFR, в выявлении мутации гена EGFR у пациентов с аденокарциномой лёгких.
-
Выявить различия иммуногистохимической экспрессии Ki–67, P–53, Bcl–2, ER–, EGFR у больных с аденокарциномой лёгких с различными активирующими мутациями гена EGFR.
-
Изучить частоту наиболее часто встречаемых мутаций в гене EGFR у пациентов со светлоклеточным раком Северо–Западного региона РФ.
-
Оценить роль экспрессии Ki–67, P–53, Bcl–2, ER–, EGFR в выявлении мутации гена EGFR у больных со светлоклеточным раком почки, и определить особенности экспрессии иммуногистохимических маркеров.
Научная новизна
Впервые проведено исследование по выявлению активирующих мутаций гена EGFR у больных со светлоклеточным раком почки Северо–Западного региона РФ. Были изучены иммуногистохимические особенности аденокарцином лёгких и светлоклеточного рака почки с мутацией в гене EGFR у пациентов Северо–Западного региона РФ. Выявлены принципиальные различия в частоте и выраженности экспрессии маркеров пролиферации и апоптоза. Показано, что иммуногистохимические маркеры пролиферации и апоптоза не связаны с частотой мутации EGFR при аденокарциноме лёгких.
Практическая значимость
Нецелесообразно использовать иммуногистохимические маркеры Ki–67, P–53, Bcl–2, ER–, EGFR для выявления групп с высокой вероятностью наличия мутации гена EGFR.
Положения выносимые на защиту
1. У больных с аденокарциномой лёгких и светлоклеточным раком почки Северо–Западного региона РФ встречаются мутации гена EGFR (20,3 % и 1,2 % соответственно).
2. У больных аденокарциномой лёгких с мутацией гена EGFR в 61 % встречается делеция 19 экзона, в 39 % – мутация L858R в 21 экзоне, а у больных светлоклеточным раком почки выявляется только делеция в 19 экзоне гена EGFR.
3. Гиперэкспрессия EGFR на мембране опухолевой клетки не зависит от статуса гена EGFR у больных с аденокарциномой лёгких.
4. Экспрессия Ki–67, P–53, Bcl–2, ER– не способствуют выявлению мутации гена EGFR в светлоклеточном раке почки.
Апробация диссертации
Результаты исследования были представлены в докладах на: 4–ой Российской конференции по фундаментальной онкологии (Санкт–Петербург, Россия, 2008); 20–ой конференции Европейской ассоциации исследования рака (Лион, Франция, 2008); 20–ом международном конгрессе противоракового лечения (Париж, Франция, 2009); 6–ом съезде онкологов и радиологов СНГ (Душанбе, Таджикистан, 2010).
Структура и объём диссертации
Диссертация изложена на 106 страницах машинописного текста и состоит из введения, литературного обзора, описания материала и методов, результатов собственного исследования, обсуждения полученных данных и выводов. Текст иллюстрирован 7 таблицами, 28 рисунками. Список литературы содержит 157 наименований, из которых 13 отечественных и 144 иностранных.
