Введение к работе
Актуальность темы. Среди биологически и физиологически актив-аых соединений, вероятно, нлкакие другие вещества не имеют большего значения для жизнедеятельности человека или животного, чем витамины. Поступающие в организм с пищей витамины играют роль биокатализаторов в процессе обмена веществ. Нарушение баланса потребления витаминов вызывает глубокие изменения различных функций организма и тявелне его заболевания. Имеется обширная информация по методам определения витаминов в лекарственных препаратах, клинических образцах, пищевых продуктах. Наряду с этим крайне ограничены сведения об определении витаминов в кормовых препаратах и смесях для животноводства, содержание которых обусловливает их биологическую ценность. Отсутствие в арсенале аналитических слукб биохимических предприятий и агрохимических лабораторий точных и экспрессных методов определения витаминов в'слоаных ксшгазяциях не позволяет осуществлять надежный контроль качества продукции для агропрсшашгенного комплекса, Поэтсвяу разработка способов анализа биологически активных соединений- витаминов - в слоаных рецептурах (особенно в кормах) является актуальной для современной аналитической химии!
Эффективным средством, позволяющим обеспечить решение этой проблемы, может стать высокоэффективная гидкостная хроматография (ВЗВД - универсальный аналитический метод разделения и анализа сложных смесей. Метод ВЗвХ незаменим при анализе термически и химически нестойких веществ, к которым относятся биологически активные соединения. Использование ВЗЖХ в аналитической практике требует подбора оптимальных условий разделения ішагакдапонентннх смесей. В связи с этим для накопления экспериментальных данных по закономерностям удерживания различного класса соединений в конкретных системах ВЗЖХ, актуальный представляется: проведение систематического исследования хроматографического поведения витаминов.
Работа выполнена в соответствии с пятилетний (1985-1Э90гг.) координационным планом научного Совета по хроматографии АН СССР по проблеме "Хроматография, электрофорез", раздел 2.15.9.3.
Цель настоящей работы - систематическое изучение закондаер-ностей разделения витаминов в условиях нормально-фазовой, обра-щенно-фазовой, ион-парной ВШХ и разработка на этой основе методик определения содержания витаминов в кормовых препаратах и смесях для животноводства. Для достижения этого необходимо: изучить
зависимость параметров удерживания сорбатов от свойств подвижкой s еєподевееоЕ фаз в различных, хроматограїїйчаских системах; выбрать оптигальные условия в технику хршатографировавия, обеспе-чиващпя аффективное разделение исследуемых витаминов; рассмотреть возможность акстракцконного извлечения .ЕИрорастворишгх витаминов ври подготовке пробы к анализу; разработать аналитические кетсдакЕ определения витаминов б микрокапсулированвых препаратах 2 кормовых смесях (премиксах); применить результаты лабораторных исследовавкй в производственных условиях.
- Научная новизна. Впервые проведено систематическое исследование хрсїіатографическсто доведения смеси-жиро-(А,ЕД^,.Д> ) и водорастворимых CBp.B2,BgrBc ,РР, С) витаминов в'условиях ВоИ. Установлены закономерности изменения удерживания витаминов на полярных ^Силасорб-бОО, Силасорб-ЙН^ Сидасорб-СН ) и неполярщи (Си-латарб-СйуіСд^ соРбевяах-от состава бинарных подвикных фаз. Полу-. чен ряд линейных однопара?лєтричєских корреляционных уравнении, позволяющих прогнозировать параметры удерживания жирорастворимых витаминов но .данным о составе элюента в регше ВЗйй.. Проведена проверка адекватности оплсздия уравнениями Снайдера и Мураками экспергкентаЕькых даднкх но удернэшавиа водорастворимых витаминов на Силасорб-Cjrg- в системе ИЩ. Показано соответствие эксперимента модели іїуракаки при содержании органического компонента вод-водной подвееной фазы в пределах 3-50 % об. По данным исследовании предложены озтималыше условия и разработана техника хрома-тографпрования для разделения многокомпонентных смесей витаминов. Предложено экстракционное извлечение жирорастворимых витаминов из кикрокапсулированных препаратов смесью гексана с дециловым спиртов. .
Практическая значимость работы. Разработаны и внедрены метс-
дики определеїЕИЯ аафо-(А,Е,Кз^2»^3^ Е водорастворимых CBj-.,E^,, Bg»B ,РР,С) витаминов в микрокансулированных препаратах, и премиксах метода! ВЭЖХ. Методики характеризуются уменьшенной трудоемкостью разделения г определения лабильных смесей слоеного состава,.улучшенными метрологическими параметрами, сокращением времени анализа в сравнении со стандартными методиками. Составлены схемы выбора условий ВЗЮІ. в зависимости от качественного состава хршатографжруеиок смеси витаминов. Предложена схема хро-матографирования с переключением колонок,.-позволяющая достичь эффективного разделения смеси витаминов ари изократическсм злюи-рованЕи. Составлена программа выбора нелинеґшой математической
І зависимости, описывающей изменения параметров удерживания еитыми-
| нов от состава элюента.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 4 глав эксперк»5енталъной части, выводов, списка литературы, включающего 167 наименования, приложения с актами, внедрения и программой выбора нєлееєйноіі математической функции. Работа изложена на 179 страницах машинописного текста, из них 40 рисунков и 25 таблиц.
Апробация диссертации.и публикации. Основные результаты работы изложены в 4 публикациях и доложены на 3 Всесоюзных и I Международной конференциях.
