Введение к работе
Актуальность темы. В последние годы в ветеринарных клиниках увеличивается количество пациентов с вертебральной патологией и поражениями спинного мозга.
Самой частой причиной нарушения функции спинного мозга является вертебро-спинальная травма. В большинстве случаев такие животные подвергаются хирургическому лечению и длительной реабилитации, что требует значительных усилий, как со стороны ветеринарного специалиста, так и со стороны хозяев животного, при этом не всегда удаётся добиться полного восстановления утраченных функций. Особую значимость эта проблема приобретает в условиях служебного собаководства, т.к. собака, получившая травму спинного мозга, как правило, подлежит выбраковке.
В настоящее время хирургическое лечение спинальной травмы, как правило, заключается в декомпрессии спинного мозга, стабилизации повреждённых сегментов позвоночника и восстановлении ликвородинамики, позитивно отражается на восстановлении функций спинного мозга, однако у значительного количества больных животных не наблюдается уменьшения неврологического дефицита.
В этой связи назрела острая необходимость в разработке новых методических подходов к лечению травм спинного мозга, позволяющих не только восстанавливать опорно-двигательную функцию позвоночника, но и оказывать положительное влияние на процессы регенерации спинного мозга, что, вне всякого сомнения, повысит эффективность проводимых реконструктивно-восстановительных мероприятий.
В настоящее время в мире на животных моделях выполняется большое количество экспериментальных работ, посвящённых поиску оптимальной стратегии восстановления структуры и функции спинного мозга [Reier, P.J., 2004, Enzmann G.U. et al., 2006], однако до сих пор не было получено убедительных результатов, позволяющих успешно решать эту проблему в клинической медицине. При всём многообразии имеющейся информации, её систематизация и осмысление на настоящий момент представляет собой довольно сложную задачу.
Наибольшую проблему представляет собой интерпретация полученных данных. Оценка клинических случаев травмы спинного мозга в ветеринарной практике осложняется разнообразием механизмов её нанесения (уровень повреждения спинного мозга, тип первичного повреждения нервной ткани), возраста и вида пациентов, времени, прошедшего с момента травмы, а также применяемой терапии [Fehlings and Tator, 1999], однако экспериментальные данные характеризуются ещё большим многообразием, начиная с применяемой модели повреждения спинного мозга и заканчивая методами оценки посттравматических изменений и эффективности той или иной стратегии лечения травм спинного мозга.
В этих условиях необходимо продолжать экспериментальную работу по поиску оптимального метода восстановления структуры и функции спинного мозга, ассимилируя накопленную к этому времени информацию по данной проблеме.
Вместе с тем, для проведения полноценных доклинических испытаний подходов к лечению травмы спинного мозга и получения от них максимального объёма информации необходимо усовершенствование методик проведения эксперимента, создание единых протоколов исследования [Reier, 2004], которые позволили бы получать объективные данные об эффективности того или иного метода лечения на различных уровнях структурной организации.
Цель и задачи исследования. Цель исследования – разработать методы количественной оценки функционального состояния спинного мозга при его травме у крыс и научно обосновать их использование в процессе экспериментальной терапии травмы спинного мозга клеточными препаратами.
Для реализации цели было необходимо решить следующие задачи:
-
Воспроизвести классическую модель контузионной травмы спинного мозга и изучить особенности восстановления двигательных функций при контузии спинного мозга различной тяжести в динамике постоперационного периода.
-
Теоретически обосновать необходимость объективной оценки двигательных функций тазовых конечностей, разработать нагрузочные тесты, позволяющие оценивать нарушения моторных функций (плавание, удержание на вращающемся стержне, прохождение сужающейся дорожки) в условиях контузионной травмы спинного мозга.
-
Определить среднестатистические показатели при прохождении тестов «ротород», «плавание» и «дорожка» у интактных крыс, и крыс после контузионной травмы спинного мозга различной степени тяжести.
-
Апробировать предложенные способы объективной оценки травмы спинного мозга у крыс в условиях экспериментальной трансплантации клеточных препаратов.
Научная новизна. Экспериментально обоснованы и впервые разработаны нагрузочные тесты, позволяющие объективно оценивать нарушения моторных функций животных с контузионной травмой спинного мозга (плавание, удержание на вращающемся стержне, прохождение сужающейся дорожки).
Впервые определены среднестатистические показатели при прохождении тестов «ротород», «плавание» и «дорожка» у интактных крыс, и крыс после контузионной травмы спинного мозга различной степени тяжести. Показана эффективность субарахноидальной трансплантации различных клеточных препаратов у крыс с контузией спинного мозга средней степени тяжести.
Научно-практическое значение работы. Получены новые оригинальные сведения о механизме развития и клинической манифестации травматической болезни спинного мозга у крыс в условиях экспериментальной контузии спинного мозга.
Предложенную методику оценки двигательных функций тазовых конечностей у крыс целесообразно использовать при исследовании эффективности медикаментозно-хирургического лечения травматической болезни спинного мозга для объективизации полученных экспериментальных данных. Основные положения работы можно использовать в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедрах ветеринарной хирургии высших учебных заведений, а также в научно-практической деятельности ветеринарных учреждений травматолого-ортопедического профиля и исследовательских лабораторий.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Разработанные методы тестирования позволяют дать объективную оценку состояния двигательных функций тазовых конечностей у крыс с травмой спинного мозга.
-
Субарахноидальное введение клеточных культур эмбриональной нервной ткани и глиально-обонятельных клеток позволяет добиться положительного эффекта у 30% животных с контузионной травмой спинного мозга средней степени тяжести равного 2-3 баллам по шкале ВВВ, однако не вызывает общего улучшения двигательных функций тазовых конечностей.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на расширенном заседании кафедры ветеринарной хирургии, учебно-методическом совете факультета ветеринарной медицины и Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу молодых учёных в 2008 году.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 статей, в том числе 1 в журнале «Ветеринарная медицина», рекомендованном ВАК РФ.
Структура и объём работы. Диссертация изложена на 112 страницах машинописного текста и состоит введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и практических рекомендаций. Содержит 24 рисунка, 6 таблиц. Библиографический указатель включает 171 научную публикацию, из них 33 отечественных и 138 иностранных источников.