Введение к работе
Актуальность проблемі); Яаїшую рать в решении нродололы'тмчшоп проблег.ш страны призвана, счграть ветеринарная тука. т. которую возложена такая ответственная задача как разработки з.^.октнвпкх, ілетодов, средств и научно обоснованных сіїстєгл мероприятие по диагностике, терапии, профилактике инфекционных заболевали."., среди которых лейкозу крупного рогатого скота отводится особое место (В.П.Шишков, ISbb).
Экономически;; ущерб, причиняемый гемоблпетозпми .тпвотно.-юдс п.-у, достигает значительных размеров володстнго шще.ма, снилсакн продуктивности, вынужденной выбраковки больніх янаотних, утилизации "?уш и органов с опухолевыми разрастаниями и затрат на проьсленке противолейкозішх мероприятий.
Усилиями многих отечественных и зарубежных исследовагелоП к настоящему времени у;ке достигнут значительна;': прогресс в изучении этой патологии. Выделен экзогенный, РЛК-содеряшции, вирус лейкоза крупного рогатого скота (DJIKPC), изучены его с[пзш;о-хпмлческио и биохимические свойства, доказана его этиологическая рель в эабо-левшши (J.M.Mlilor ot al. ,1969; А.б.Валлхоз с соавт. ,1374} ,'.'...її. Паршанознч с соавт.1976; Л.Г.Ьурба с соавт.,1977; Р.А.лукалн с соавт.,1977; Х.С.Салиыов, 1966 и др.). Расширены представлш.иш и о патогенезе болезни (Г.Л,Спмошш,.І974; Г.ч.Коромыслов, 11-77; П.Н.Смирнов, 1266; В.П.Тамадюнас, 1%7 и др.). Разработаны -г у є к- . гивкые метода км.7.унодн:ігкостшш ( A.A.Ressar.-f; ,1376; Б.и.ьлчатеа з соавт.,1376; А.і.Ьалихов,І976; U.Onuaa et al. ,1Э7Ь; Л.ПЛіпгае-ва с соавт., IbfcS и др..) и меры профилактики по оздоровленім хозяйств, неблагополучных по лейкозу (В.А.Крикун с содвт., ІЕ-64; И.Л.Бусол, 196^.; л.Г.Бурса с соавт., 1913; Б.і.і.ііахмалсон, Г„г6 г. 5р.).
Важное значение з комплексе мероприятии по борьбе с леЛг.озсм крупного рогатого сі.ста ij.;i.-:oT ::;.и..унслог:'ЛСо::.'5 ;,:отсг:; Г.: инесг:!-;н, которые иозъ-л.и.? контролировать пзрспстен:;кю (1ЯКГС у іч-у:;::ого :огатого слота на белее р^лней стадкл развития iY.'iV-Ki'nsHnoro процесса, идп-піо, ілілокос использование пл.іуноднллостпКп лг.;:;:с:<а фупного роглтоло счета сталкивается с трудпостя.л, сх.лзанннмл с іолучеішем необходимого количества ьпрусі и нируся-іх антигенов, істочнпком этих антигенов явллигся клеточные' .чультурч, продуцируя-
_ 4 _.
ііілли,';;)^ cii'Mv.ubtUiUii 'л iipeuuccjuniu.ii: системами считаются неро.'.кииемие лкшін клеток почкк ьиЗриош* овц:л - f;:: ( Fetal -
I..;, ! г.іЛіічц } (л.,;,ОаЛЄВЄКи,'1, I'J?JJ il.J.VMi del' Uualun el al.,
Ю7ччі it тішу с а зморпоиа корови - ТоК-і,іііА-76 (Б.Л.ирпкуи о еоавт,, 197v), :<рОі'.;ічоски шфпифовшішіе ЬЛй'С. При выращивании клеток в {іиТіП(;;лку?і среду в качестве ростового компонента добавляют остро-дц.'і;і.'Ц!іі:..'-. -^иоротку крови эмбрионов корон (J,!.:.KilIfcr et al., ІУ77; Iі.А,куі,:;;:h п др., IlibV-), процесс .получения которой трудоемки;'! і! дорого,'!. Lo:.7.:ej)4ocKi і сиворотки крони взрослого крупного рогатого скота і) телят дин этих целей не пригодны из-за ДОЗМОЛШО-го с.чі;,р:і.и!і!л u Ш'.". специфических, антител к вирусу лейкози, что св.- а: :о и икрокп.'. распространением инфекции ЬЛКРС, и такно из-за 13 5г ,;--.;ііо низкого содерл.ишш іі ша ростових факторов (Л.Г.Коломнец с г--:еіт., 107с-; ii.!.:.ur'iuuuii et ui, , I'JVL).
,;и»олї-оваипе сивороток крови взрослых овец в культивировании іиніев;'.ьаишх клеточная ліпші; Тл\-і,'іік~'/і> и г їх продуцирующих bill-- '), указало на явные преімущества рсстоосесиечкваюцнх свойств ахах видов CL'uoporoK перед другими (Ь.іЗ.Иткіш с соавт.,1965).
\\-ци ітііо, что в крови молодих животных содержится большое количество питательных вецеств (макро- и микроэлементов, витай нов, овлков, гормонов н т.п.), ііеи0лодіц.ш>: дая нормального роста и развития организма (Ьокар, 1S54;-Uocv-jiOB, .I9G3 и др.).
Учитывая итіі оситолїольсїиа it принимая во внимание то, что в Узбекской ССР имеътсн крупные овцеводческие комплексы но шращива-«1Ш и откорму карелуліоких овцематок, с, целью коммерческого получения каракульских смуиек - "карикульча", не нарушая производственного цикла, можно организовать промышленную заготовку сивороток кролн овцематок ІЬО-135'-діівзіюй суяпюсти, а также сиворотку крови и* амбрионоц.
В связи о отш, работа> направленная на использование в качестве сывороточного кошіигліта питательных сред разных видов сывороток крови каракульских "в.-.-ц', свободных естественных условиях от инфекции МКРС, ивлкетч-д ыктуалвной.
J [ель л. аал.-.ічи иссл.;.;и;ц.ініія. Настоящая работа посвячена пзучешш влияния различиях видов сивороток крови овец на ростовую и анти-гыыродуцируЬ'Ч'.ул способность хронически шкдаировашшх ВЛИРС клеточных культур Ї5К ЫВй- 7ё її ь'іл , о- целью изыскания возможности -замени дороі'ості-.іиіі сыворотки крови эмбрионов коров, используемо!'
pu производстве лейкозного диагностикума. В связи с этш, перед ;амн Сили поставлены следующие задачи:
І.изучить влияние сивороток крови суягных овцематок каракуль-;коіі породи, ііх зі/хірпонов и новорозденних ягнят на ростовую и штигелпродуцнрукшую споссбность хронически ііяфіщироааш-шх ВлКРС ;леточш:> культур TCK-UEA-?3 и PLK .
~. іірсвести сравнительный цитошрАодогическин анализ препарата клеточных культур ТЗК-...ВА-76 и Уїл: , выращенных на средах : использованием сивороток крови суяпшх овцематок, их з.мбриснов і новорожденных ягнят.
'-. изучить динамику репликации ЪДлРС и продукции вирусных анти-
Г-сНСа U Не}.еЬШ;ие!/.ПХ КУЛЬТУРІ КЛсТОК ТаЛЧлЪп-76 и ?^л .
4. дать качественную оценку антигенов BJilu'O, приготовленных із вылусссодор:..ыщеп культуральноіі жидкости клеточных линпіі : Сії-;, і; А-76 к -'-..- , ьырашешшх на средах, содержащих сыворотки :;роеп суягних свцеїдаток, их эмбрионов и новорожденных ягнят.
научная новизна. Ьпервые псове депо сравнительное изучение использования различных видов сывороток крови каракульских овец в качестве сывороточного компонента питательной среды и клеточных культурах, прсд.уцируш:пх ВЛКРС, взамен эмбриональной сыворотки крова крупного роситого окота.
изучена возможность получения ШІКРС и его антигенов при культивировании Перевиваемых клеточных линий ТЗКЧ.ІВА-76 и іЛДІ на .;редах, содержащих сиворотки крови каракульских суягных овцематок, их зиорвонов п новорожденных ягнят.
jiiep.;'iR установлено-, что сиворотки крови каракульских суягних овцематок, tix juOohohgb п новорожденных ягнят могут быть исполь-зо^аны как заменители сыворотки крови эмбрионов коров при культи-виропавип перевиваемых клеточных Лґашн Тс>К—lt'JJА—7G и j?i.iC . Остановлено также, что перевиваемые1 клеточные линии ТЭК-ША-7о ь і?*»*- , нврицонвые на средах с сы'вОрогками кровіг суягных оыкнлаток, их эмбрионов и новорожденных ятнят, ко показателя»-! сроков .ї.ормпровшшя і.юнослоя, индексам клеточной пролиферации, со репродукции BjiKPG и продукции вирусных антигенов существенно превосходят ііера.іИ.:аеі.а;е і:',льту^:. оСонх ліниві і:лзтск, вврацеїінцх па срезах с епворсті.-;ш крони крупного рогатого скота и з.мбрпеноа норов.
Іі.дііа мсржсдоглчсская характеристика перевиваемых линий клеток
ТЭК-М8Л-76 и flit , продуцирующих ВЛКРС в средах, содержащих сшю-ротки крови суяпшх овцематок, их эмбрионов и новорожденных ягнят , Выяснено, что перевиваемая культура клеток fij: лучше адап-'тируется к средам, содержащш, сыворотки крови суягных овцематок, их эмбрионов и яовороадешшх ягнят, чем клеточная культура ТЭК-Ш -76.
Практическая ценность. Материалы диссертации использованы при разработке "Методических рекомендаций по использованию сывороток крови суягных овцематок для получения антигена вируса лейкоза крупного рогатого скота", которые утверждены на заседании секции "ЛеІІкозн, сравнительная и экспериментальная онкология животных" ВАСХЫШ (1989 г.).
Результаты проведенных исследлзаїшй позволяют так;;:е использовать сыворотку крови эмбрионов овец и новорожденных ягнят для кулі тивирования клеточных линий ТЗК-ЫВА-76 и F1K , продуцирующих ШІКРС и его антигены, с целью замены сыворотки крови эмбрионов крупного рогатого скота в производстве лейкозкых диагностикумов.
Апробация работы. Материалы диссертации долокеш на конферен-щш молодых учені а Узбекского НИШ, посвященной 70-летию ВЛКСМ (І96&); на заседании Ученого Совета УзШСШ (ІЗЬ8,Ї9У9); на заседании секции животноводства и ветеринарии ОАО ВЛСХШіЛ (1Э&9); на засадашш секции "Лейкозы, сравнительная и экспериментальная онкология животных" ВАСХШЛ (1989).
Публикации. По теме диссертации опубликованы '4 научные работг
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 167 ст
раницах машинописного текста и-состоит из. введения, обзора лите-,
ратуры (3 главы),собственных исследований (2 главы), англ;;-з ре
зультатов исследований, .выводов, практических предложений и прило
кения. _