Введение к работе
Актуальность темы. Устойчивое развитие яивотноводства имеет для республики наивагмейиее значение. Отрасль дает почти 60 процентов валового продукта АПК. От состояния продуктивности Животноводческих ферм во многой зависит эффективность экономики хозяйств а благополучие населения страны. Вагяое значение для успешного развития животноводства имеет ветеринарно-санитаркый надзор, обеспечивавший его благополучие по заразным я незаразным заболеваниям гивотных.
йэ инфекционных болезней туберкулез крупного рогатого скота наносит значительный экономический ущерб животноводству и, как зооантропоноз, представляет опасность для популяции человека.
Несмотря на относительную стабилизации эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота за последние го-дыоа-эта проблема по-прегнему занимает одно из первых мест в животноводстве. При аллергическом исследовании скота на туберкулез еяегодио выявляется 48-50 тысяч реагирувцих на туберкулин кивотных, причем основное их количество (95-97%) приходится на благополучные по туберкулезу хозяйства. При этом следует отметить, Vio диагноз на туберкулез при проведении последуязяіх комплексных исследований в большинстве случаев не подтверждается. Поэтому необходимо совершенствование суаіаствуггздах п разра-Зотха новых средств и методоз дифференциальной диагностики, в первуа очередь прижизненной, с цояьв сохранения продуктивных животных, а такге методов быстрого а эффективного оздоровления (юголов^я при возникновении туберкулезной инфекции а хозяйстве (на Ферме, в стаде).
Известно, что сенсибилизация организма и развитие реакции на туберкулин у крупного рогатого скота а других видов еязотиых я птиц могут вызывать атипичные мянрбакторгт (А.Я.Заров, 1969, 1989; О.В.Мартма, К.К.ТЯхнас, 1975, 1978; А.Х.Найнанов, 1981, 1993; Р'.В. Тузова, 1975, 1933; А.А.Солонехо, 1976, 1984; Э.Я.Кассгч 1990; Ан.А.Нвгяевсквй, Ал.А.ЕвгяезсхиЙ, 1987; \.Й.Завгородннй, 1987, 1997; А.И.Ходун, 1988, 1397; А.П.Лысен-0, 1984, 1994; S.H.Rtmyon, 1959; L.A.Comer, 1S81; Н.Вшвагс-suk, 1981; M.L.Monaohan et el., 1994).
«J 2
Кроме того( s ряде случаев атипичные кикобактерии и возбудитель туберкулеза когут вызывать смешанную иикобактериальную инфекцию с развитием сенсибилизации по клеточному типу - гияер-чувствительности замедленного типа, (А.О.Бокун, 1976; Н.А.Александров, 1979;, Г.В.Чепих, 1980; В.В.Андрущенко, 1984; Н.М.Нандро, 19$8; В.в.Мартынов, А.В.Мартинов, 1991; B.J.Duffi-eld, J.U.Norton, D.Hoffman, 1989). Такни образок, внутрикожная алдергодиагностика с туберкулином приводит к необоснованноку убот отдельных реагировавших на туберкулин кивотных и соответственно увеличению продолжительности карантина. В таких ситуациях существенно возрастает роль лабораторных методов" диагностики туберкулеза и, в первую очередь, бактериологического исследования материала от «квотных. От него зависит выделение возбудителя туберкулеза или атипичных мнкобактерий и определение их свойств (М.Н.Ияробокова, 1974; Н.П.Зыков, Т.Е.Ильина, 1978; А.П.Аликаева, 1979; С.Г.Субботїіна, 1979; 1994; Н.МЛажгалиев,
. 1986; Л.А.Ильиных, 1S9Q, 1991; Л.А.Шохина, 1995; C.Zorawski, P.S.Skwarek, 1977; W.Kappler, K.Eosemarie, 1989).
При патояогоанатокяческон или бактериологической подтверждении диагноза на туберкулез и налозении карантина на ферму {хозяйство) возникает необходимость срочного оздоровления стад крупного рог.-ітсгчі скота (фери,- хозяйств), которое вклвчает не только выполнение специальных ветеринарных мероприятий, но и комплекс зоотехнических, организационно-хозяйственных к общих
, санитарных работ, направленных иа ограничение и ликвидации очага инфекции (И.К.Юсковец, 1Э48, 1952, 1953, 1963; В.Й.Ротов, П.И.Кокуричев, П.Е.Савченко, 1973; В.П-Урбан, 1980, 1995; В.Б.Шуревский,'-. 1980; Н.П.Овдиенхо, В.А.Еаров, Э.С.Плотников, 1982; Р.В.Тузова, 1978, 1983; .Е.Кассич, 1984, 1994; С.И.Джу-пкна, 1986; А.С.Дончеико, 1986, 1989, 1995; А.И.Ерошов, Б.П.Заблоцкий, 1990; J.P.Collins, 1981, 1987; K.B.Chloupe, 1981; t.Denes, 1983; R.E.Ortis, 1986; T.B.Hartin, 1992).
Поскольку длительность неблагополучий стада зависит, в основном, от продолжительности и полноты проведения аллергических исследований поголовья, то в нылеоних сложных социально-эконо-шческих условиях преобразования животноводства и перехода его к рыночным отношениям назрела необходимость совершенствования существующих и разработки новых схем я методов аллергических
йссяедоваккй скота с цель» быстрейаей ликвидации туберкулезной инфекции и с наименьшими потерями (Г.В.Коромысло», 1983; Н.П.Овдненко, 1S84; Г.А.Объедков, 1984; В.А.Шхнль, 1987; D.И.Сиояянинов, 1994; Д.Д.Новак, 1995).
Связь работы с крушшни научными программами, темакя. ї Научно-исследовательская работа проводилась а соответствии с отраслевыми комплексными научно-техническими программами 0.51.03.01 (1976-1980 гг.) и 051.09.01 (1980-1990 ГГ.), по ие-котраслевым программам О.сх.61.02 (1976-1980 гг.) и О.сх.97.01 (1981-1985 гг.), номера Госрегистрацки 76045446 н 81085787, а raxse по республиканской подпрограмме "Ветеринария", Госрегист-эацня Н 1993141 (1991-1995 гг.).
Цель работы. Совершенствование дифференциальной диаг-іостики туберкулеза животных я методов оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота.
Задачи исследований. ^ 1. Провести ретроспективный анализ эпизоотической ситуации ю туберкулезу крупного рогатого скота и свиней а Республике 5еларусь.
-
Изучить специфичность проявления когшо-аялэргнческих реакций у реагировавших через 72 ч животных на повторное введете тубії^иулина, усовернействовать порядок проведения плановых аллергических исследований крупкого рогатого скота.
-
Разработать , способ пригазненной дифференциации виутрн-:ожкых туберкулиновых реакций при проведении планових аллзргк-іеских исследований'крупного рогатого систа.
-
Сравнить диагностнчееку» эффективность комплексного ал-ієргєна из атипичных нинобактерий {ХАМГя'ПЦД тубериуянна для ітиц в симультанной аллергической проба.
-
Оптимизировать методику бактериологического исследова-
ния :ия материала на туберкулез в условиях практических ветеринарах лабораторій.
6. Разработать метод оздоровления неблагополучных по ту-
еркулеэу стад крупного рогатого скота, позволявши оздоровить
оголовье в боаае короткие сроки.
7. Обосновать целесообразность исследования свиней на ту-вркуяез только туберкулином для ияекопитакаия.
4.
Научная новизна работы.
-
Впервые установлена высокая специфичность проявления реакции на повторное введение туберкулина в другой участок кожи вей рядом с реакцией на его' введение первый раз у крупного рогатого скота, зараженного возбудителей туберкулеза, что позволяет повысить точность и ускорить проведение дифференциальной диагностики.
-
Разработана схема ускоренных аллергических исследований и обоснована целесообразность ее применения при обнаружении первых случаев туберкулеза иди на завершающей стадии оздоровления стад вначале с интервалок между исследованиями в 1S-20 дней, затем - через 60-75 дней, завершая цикл исследований симультанной аллергической пробой. Доказано, что частое введение туберкулина не влияет в последующем на развитие и проявление аллергических реакций у инфицированных, но еще не реагирующих животных.
.3) На основании анализа эпизоотической ситуации по-туберкулезу в Белоруссии получены данйые, позволяющие объективно определить тенденции ее изменения. Установлено преимущественное влияние, субъективных факторов на уровень благополучия по туберкулезу В республике.
-
Доказан-, что гранулематозные поражения только в мезен-териалышх. лимфатических узлах у реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота не связаны с заражением животных возбудителем туберкулеза, и по этому признаку нельзя ставить окончательный диагноз без бактериологического пли гистологического исследования материала. '
-
Оптимизирована методика проведения бактериологического исследования материала на туберкулез в условиях практических ветеринарных лабораторий, что позволило повысить высеваемость кикобактерий на 50-65% и уже на первом этапе их культивирования на" плотных средах провести дифференциацию культур по способности образовывать корд-фахтор. »
-
На основании прикладных исследований и научного анализа доказана целесообразность проведения диагностики туберкулеза у свиней с применением только одного туберкулина для млекопитающих.
7} По результатам работы издана монография, материалы ко-
торой йспользувтся при чтении лекций для студентов и слувателей $ПХ Витебской государственной академия ветеринаркой медицины, а тахяе при проведении курсов и семинаров по повышению квалификации ветеринарных специалистов республики. Получены 3 удостоверения на рацпредложения.
д Практическая значимость полученных результатов. Способ ускоренной дифференциации туберкулиновых реакций у скота позволяет на 85-100 уменьшить необоснованный убой реагировавших на туберкулин коров, инфицированных нетуберкулезнымн микобактерия-ки, сократить в 1,9-2,0 раза расход диагностических препаратов и на 1-4 месяца ускорить цикл исследований по дифференциальной диагностике.
Применение метода ускоренного оздоровления хозяйств от туберкулеза позволяет в 2,5-3,5 раза сократить сроки я соответствующие затраты при проведении оздоровительных мероприятий.
. Оптимизация способов и приемов бактериологической диагностики заболевания на 50-65% повышает ее эффективность, сокращает время и затрата на идентификацию выделенных культур.
В целой применение разработанная нетодвк прижизненной и посмертной дифференциальной диагностики туберкулеза позволяет предотвратить ущерб от необоснованного убоя реагировавших на туберку^н животных по причине сенсибилизация их организма атипичными кикобактернями в 2-3 раза.
В книге "Никобактериоэ сванов"' (1333 г.). приведены данные, необходимые ветспециалнстаи свиноводческих хозяйств, по этнологии, патогенезу и дифференциальной диагкосгнцв туберкулеза д кикобактерноза саинеЗ.
Внедрены а прожзводстЕо:
способ ускоренной дифференциации туберкулиновых реакций у скота при плановых исследованиях на туберкулез {утз. НТС а ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь**!^. 17.1996 г., протокол Я 6).
Исследование свиней на туберкулез одним туберкулином для <лекопитаЕ!цих (утв. НТС я Г7В :'.иксзльхозпрода Республики Беларусь 29.ХП.1994 г., протокол В 8).
Метод ускоренного оздоровления неблагополучных по тубар-гулезу стад крупного рогатого скота (утв. ЯТС я ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.1У.1996 г., протокол К 6).
. «
Оптимизированная методика бактериологического исследования материала на туберкулез (справка Республиканской государственной ветеринарной лаборатории К 507 от 12.05.1997 г.).
Способ и порядок проведені.а плановых аллергических исследований скота на туберкулез. Одобрен НТС Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.ХП.1994 г., протокол S 8.
Разработаны проекты "Инструкции о мероприятиях по профилактике и ликвидации туберкулеза животных" и "Наставления по диагностике тубэркулеэа животных", которые представлены в ГУВ и Республиканскую государственную лабораторию для утверждения.
Экономическая эффективность разработок. Внедрение разработок в ветеринарную практику сокращает затраты на дифференциальную диагностику в 2-3 раза и на 85-100% предотвращает необоснованный убой реагирующих на туберкулин животных при инфицировании их атипичными микобактериями. При подтверждении диагноза на туберкулез применение метода ускоренного оздоровления стада позв.оляет ликвидировать болезнь за 6-8 нес, при 85-90%-ной сохранности поголовья. Предотвращенный экономический ущерб составил 8,37, млн.руб. при аллергической исследовании крупного рогатого скота и 6,97 млн.руб. - у свиней на J.00 исследованных животных. Эффективность оздоровления ускоренным методом - 62,12 млн.руб. па СО ^оров оздоравливаемого стада (в ценах 1993 г.).
Осноь.1Ыо положения диссертация, выносимые на защиту.
-
Характеристика и особенности эпизоотической ситуации по туберкулезу животных в Республике Беларусь, отличающиеся тенденцией снижения основных ее показателей с затухающей амплитудой периодических подъемов, которые в большей степени зависели от субъективных причин, кадровой политики и экономической стабильности хозяйств.
-
Особенность аллергического иммунного ответа у реагировавших через 72 ч животных на повторное введение туберкулинов (аллергенов), отличающаяся 85-100% специфичностью внутрикожных реакций на гомологичный туберкулин (аллерген)»
-
Оптимизированная методика бактериологического исследования патматериала, включающая его высев отдельно по группам лимфатических узлов от каждого животного, приготовление мазков только из высеваемой суспензии, использование разных типов пробок для герметизации пробирок, постановку наиболее простых и
доступных тестов с выделенными культурами ннхобактерий с определенней корд-фактора а первичном росте или субкультуре на плотной питательной среде, что позволяет на 50-65% увеличить высеваекость микобахтерий, сократить время и затраты на их идентификации.
-
Схема аллергических исследований крупного рогатого скота при оздоровлении неблагополучных по туберкулезу стад для бо-. лее быстрого выявления больных и инфицированных возбудителем туберкулеза животных.
-
Аллергическое исследование свиней на туберкулез только туберкулином для млекопитающих.
Личннй вклад. Основной обьен работ (90%) выполнен лично автором и частично (10%) совместно с сотрудниками лаборатории туберкулеза и лейкоза.
Апробация результатов днссертацкя. Основные результаты исследований доложены на Ученом совете БелНИИЭВ (1980-1997 гг.), на республиканских научно-производственных конференциях (МЖ.чск, 1979; Гродно, 1982, 1987, 1996; Витебск, 1994), на Всесоюзных конференциях (Симферополь, 1981; Киев, 1982; Новосибирск, 1991, 1995), в Главном управлении ветеринарии н облво-тотделах (1993-1996), на НТС Минсельхозпрода Республики Беларусь (1990, 1994, 1996).
«г
, Опубянковаккость результатов. По тема диссертации опубликовано 56 работ, в том числе одна монография {в соавторства), 40 статей, 15 тезисов.
Структура н обьем диссертация. Диссертация изложена на 339 страницах мапинописного текста, вклвчает 48 таблиц а 16 рисунков. Список литературы состоит из 710 источников, в том числе 188 иностранных.
оезая нБтодаА н осноеннз мето;.*! ассгщдовйиня
Работа выполнена в лабораторот туберкулеза Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вшяелессхого, в хозяйствах с различной эпизоотической ситуацией по туберкулезу крупного рогатого скота и свиней, на мясокомбинатах Белоруссии.
Анализ эпизоотической ситуация по туберкулезу за период с 1957 по 1996 год проводили по.ветеринарной отчетности ГУВ Мин-
: 8 '
сельхозпрода Республики Беларусь.
Экспериментальные исследования для усовершенствования аллергической диагностики туберкулеза проведены на 52 морских свинках, 6 кроликах и б головах молодняка крупного рогатого скота, зараженных или иммунизированных M.bovis-Valle, M.bo-vis-8, M.bovis-BCG, H.bovis-SP, H.scrofulaceum-509, M.avi-ura-1603, H.terrae-5922, M.fortuitum-342, M.phlei-1889. (ВГНКИ, ЦНИИТ).
Для аллергического исследований крупного рогатого скота, свиной и экспериментально зараженных животных использовали ППД туберкулин для млекопитающих или его стандартный раствор, ППД туберкулин для птиц и КАН производства Курской биофабрики, согласно наставлениям по их применению.
Результаты симультанной пробы с применением ППД туберкулина для птиц оценивали по общему количественному и качественному проявлению реакций на аллергены, при использовании в симультанной пробе КАИ - согласно "Наставлению по применению симультанной аллергической проба с применением туберкулина и комплексного аллергена из атипичных кикобактернй (КАН) при диагностике туберкулеза у животных", утвержденному ГУВ МСХ СССР 27 ноября 1978 г.* и 4 июля 1980 г., а затем - согласно "Наставлению по диагностике т . ? г і: у:, е за зеивотных", утвержденному ГУВ Госагроп-рома СССР 21 февраля 1986 г.
Исследования по совершенствованию аллергической диагностики в условиях производства выполнены на 71263 головах трупного рогатого скота в 6 областях республики: в 33 хозяйствах на 67 фермах, в тон числе симультанной пробой с использованием ППД туберкулина для пткц - на 5437 головах (10 хозяйств, 16 ферм) и с применением КАН - на 7761 голове (13 хозяйств, 21 ферма).
Учет аллергических реакций проводили в динанике через 72 ч, а тахяе через 24 и 48 ч в случаях повторного введения аллергенов реагировавшим акивотным. Всего исследовали 57696 коров и нетелей в 6 областях на 64 фермах 32 хозяйств,' в которых выяви-ли 5773 головы реагировавших животных.
Для совершенствования методов оздоровления неблагополучных по туберкулезу ферм исследования проведены на 12922 головах крупного рогатого скота 22 ферм из 15 хозяйств.
ВнутрихожноЙ аллергической пробой исследовали 35851 голову свиней 34 ферм (комплексов) из 34 хозяйств, в том числе 2461
голову - в неблагополучной по туберкулезу комплексе.
Диагностическому убою подвергли 5795 регировавших на туберкулин животных. Пробы материала отбирали и исследовали бактериологически в соответствии с "Настаалениеи по диагностике туберкулеза животных" (1986 г.). Дополнительно проводили бакте-ігюскопив мазков, приготозленных из суспензия высеваемого на штательные среды материала я из суспензии для заражения лабо->аторкых енвотных. Всего исследовали 981 пробу паткатериала от гивотных н выделили 725 культур михобактерий.
С целью изучения распространения михобактерий в окружающей щвотных среде проведены исследования 297 проб различных объек-ов внешней среды, кормов и дополнительного материала от реаги-ювавших на туберкулин хивотных, из которых выделили 57 культур [икобактерий.
Исследование спермы на содержание возбудителя туберкулеза проводили в соответствии с "Рекомендациями по вопросам ветери-:арс*ч стран-членов СЭВ" (1980 г-).
Для герметизации пробирох с посевами материала испольэова-и ватно-марлевые пробки с последувкцэй заливкой парафином, ре-иноЕые пробки без- и с вырезанным косым желобком, корковые робки и металлические затворы.
гУ выделенных культур микобавтерий, наряду с изучением ультурально-морфологическях, тннкториальках а биологических войстз, определили наличие корд-фактора (фактора внруяентнос-и) по В.$.Еалан с соавт. (197S'г.) а иааеЯ модификации. В работе использовали эталонные итакка кякобактериЗ: M.bovis, Vallee, И 8, BCG; И.tuberculosis, М, НзїЕ*; .avuin^ 1603, 780; M.phlei 1889, M.fortultua 392, M.saeqnatis, .srcofulaceum 509, M.scotochroiaoqeasa, получении* нз UBIffiT, ГНКИ и ВЙЭЗ (Москва), a rasse куяьтур%,иннобгхтврп8, выделение из материала от реагироваваяя на туберкулин животных п из бьектоэ внешней среды.
Статистическув обработку цифровых данных прозодяля по .б.Рокицкому (1967 г.). ЗЕОНоинческуэ эффективность разработок іределяжі по методике З.П.Урбана, В.П.Шпасоза (1991 г.) с учэ-зм удельных коэффициентов затрат при ігроведенїпі протиэотубер-глезных мероприятий по В.Я.Сксятгаиову (1994 r.J.
«
