Введение к работе
Актуальность теми. Б инфекционной патол-тии свиней важную роль играет вирус энцефаломиокардита. У супоросных свиноматок он вызывает гибель и мумификацию плодов, аборты, рождение мёртвых и слабых поросят. Большинство слабых поросят погибает в течение первых 2-3 недель после рождения. У поросят І-4-месячного возраста развивается энцефалит и миокардит, причём летальность достигает 50-80 % ( Н. Acland, 1989J Н. Kim, 1989 ).
Впервые заболевание свиней, вызываемое вирусом энцефаломиокардита, было зарегистрировано в 1958 году в Панаме ( т. миг-папе, i960 ). В настоящее время знцефаломиокардит свиней диагностируют во многих странах мира: США, Канаде, Бразилии, Гватемале, Пуэрто Рико, Австралии, Новой Зеландии, Южной Африке, №;алии, Греции, Бельгии,' Голландии, Швейцарии, Великобритании, Чехословакии, Болгарии, Японии и на Кубе.
Заболевание причиняет значительный экономический ущерб. Так, в течение только одной вспышки энцефаломиокардита свиней на двух фермах штата Миннесота, США, ущерб оценивался в 54 тысячи долларов ( W. Christianaon, 1990 ).
Вирус энцефаломиокардита широко распространён в свиноводческих хозяйствах ряда стран и в зависимости от патогенности циркулирующего штамма отмечают как вспышки заболевания с различной летальностью, так и субклиническое течение болезни.
Клинические признаки заболевания и патологоанатомические изменения при энцефаломиокардите свиней сходны с таковыми при различных инфекционных ( ящур, болезнь Тешена ) и незаразных < недостаток витамина Е и селена ) болезнях. В связи с этим окончательный диагноз на наличие заболевания в хозяйстве ставят по результатам лабораторных исследований ( н. Joo, 1988 ).
Диагностика зіщефч'.ломиакардита свиней р нэыри стране не проводилась, в связи с этим разработка средств к методе;, диагностики данного заболевания является актуальной задачей.
Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилась разработка лабораторньк методов диагностики энцефаломиокардита свиней.
В задачи исследований входило:
получить гипериммунные сыворотки к концентрированным препаратам вируса энцефаломиокардита свиней на подсвинках и морских свинках;
отработать оптимальные условия постановки реакций гемагглютинации, торможения гемагглютинации и диффузионной преципитации в агаровом геле для диагностики энцефаломиокардита свиней;
провести сравнительное изучение диагностической ценности реакций нейтрализации, торможения гемагглютинации и диффузионной преципитации для выявления специфических антител;
провести серологическое обследование свиней на наличие антител к вирусу энцефаломиокардита в ряде свиноводческих хозяйств;
разработать набор компонентов для выявления антител к вирусу энцефаломиокардита свиней в реакции торможения гемагглютинации.
Научная новизна. Изучены гемагглютинирухщие свойства вируса энцефаломиокардита свиней в зависимости от вида и концентрации эритроцитов, используемого буфера, рН и температурных режимов. Определены условия освобождения сывороток крови свиней от неспецифических ингибиторов гемагглютинации и гетероагглютини-нав. Отработаны методы получения гипериммунных сывороток крови к вирусу энцефаломиокардита на подсвинках и морских свинках.
Определена диагностическая ценность PITA и РДП в сравнении с РН. Серологическим обследованием свиней установлена циркуляция вируса энцефаломиокардита в ряде свиноводческих хозяйств России. Изучено влияние хранения на активность компонентов набора для выявления антител к вирусу энцефаломиокардита свиней в РТГА.
Практическая ценность работы. Отработаны реакции торможения гемагглютинации и'диффузионной преципитации в агаровом геле для выявления антител к вирусу энцефаломиокардита свиней.
Разработан лабораторный регламент на изготовление набора для выявления антител к вирусу энцефаломиокардита свиней в реакции торможения гемагглютинации.
Результаты проведённых исследований использованы при составлении временного наставления по применению набора для выявления антител к вирусу энцефаломиокардита свиней в реакции торможения гемагглютинации.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседании Учёного совета ВЮВ (1994 г.), научной конференции (г.Покров, 1994 г.) и межлабораторном совещании сотрудников ВЮВ (1995 г.).
Публикация результатов исследований. Основные материалы диссертации опубликованы в 3 научных работах.
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 102 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практические предложения и список литературы. Работа иллюстрирована 18 таблицами и I рисунком. Список использованной литературы включает 137 источников, из них II отечественных и 126 зарубежных авторов.
