Введение к работе
Актуальность темы. Специфическая профилактика вирусных болезней птиц занимает ведущее место в условиях современного ведения промышленного птицеводства. Вакцинопрофилактика инфекционного бронхита кур и Ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве проводится раздельно с применением моновакцин против каждой инфекции с интервалом в 1-2 недели.
В целях обеспечения ветеринарного благополучия птицеводческих хозяйств возникает необходимость профилактических прививок против двух, трех и более вирусных болезней.
В то же время известно, что одним из важнейших вопросов упрощения и оптимизации прививочного календаря, является создание поливалентных или ассоциированных вакцин.
В настоящее время доказано, что применение ассоциированных вакцин, а также комплексной и ассоциированной иммунизации в сравнении с многократными прививками различными монопрепаратами имеет несомненные преимущества в плане значительного сокращения времени на создание иммунитета одновременно к нескольким инфекциям, совершенствования громоздких схем профилактических прививок и снижения аллергических реакций. Основными преимуществами ассоциированных вакцин, комплексных и ассоциированных прививок является то, что при этом резко сокращается число инъекций, а количество вводимых антигенов не уменьшается.
В связи с этим большое значение придается применению ассоциированной вакцины против ИБК и НБ, преимущество которой заключается в создании иммунитета сразу к двум болезням одновременно при экономии времени и трудозатрат.
В последние годы в нашей стране в ряде птицехозяйств применяли дорогостоящую ассоциированную вакцину против ИБК и НБ - «Ма5» + «клон 30» (Интервет, Голландия), которая обеспечивала надежную защиту
от ИБК, но иммунный ответ к НБ был низким. Поэтому возникла острая необходимость создания отечественной ассоциированной вакцины против ИБК и НБ, лишенной вышеперечисленных недостатков.
Однако многие вопросы, связанные с получением и применением ассоциированной вакцины против инфекционного бронхита кур и Ньюкаслской болезни, требовали доработки в области технологии получения вакцины, а так же изучения ее свойств. Вакцинные штаммы этих вирусов имеют различные иммунобиологические и антигенные свойства и возникает необходимость подбора штаммов, обеспечивающих создание напряженного иммунитета у птиц. В то же время возникает необходимость изучения совместимости вакцинных штаммов при создании их ассоциации и влияния ассоциированных вакцин на иммунный ответ птиц после введения, а также в определении сроков наступления иммунитета у птиц. Недостаточно изучены вопросы влияния путей введения вакцины на иммунный ответ птиц.
Таким образом, разработка технологии изготовления ассоциированной вакцины против инфекционного бронхита кур и Ньюкаслской болезни и изучение иммунобиологических свойств этой вакцины являются весьма актуальными и требуют решения.
Цель и задачи исследований. Целью наших исследований являлась разработка технологии получения ассоциированной вакцины против инфекционного бронхита кур и Ньюкаслской болезни и изучение иммунобиологических свойств этой вакцины.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- подобрать и изучить вакцинные штаммы вируса инфекционного
бронхита кур и Ньюкаслской болезни для изготовления ассоциированной
вакцины;
- отработать оптимальные условия, режим получения и компонентный
состав живой ассоциированной вакцины против ИБК и НБ;
- отработать условия культивирования вакцинного штамма вируса
ИБК;
- изучить иммунобиологические свойства живой ассоциированной
вакцины против ИБК и НБ;
- определить иммуногенную эффективность ассоциированной
вакцины из вирусов ИБК и НБ при различных методах применения;
- изучить свойства ассоциированной вакцины в процессе длительного
хранения;
провести лабораторные и производственные испытания "ассоциированной вакцины против ИБК и НБ;
разработать нормативно-техническую документацию на ассоциированную вакцину против ИБК и НБ.
Научная новизна. В результате проведенных исследований подобраны вакцинные штаммы вируса инфекционного бронхита кур и Ньюкаслскои болезни, которые пригодны для получения ассоциированных вакцин и обладают выраженными антигенными и иммуногенными свойствами. Отработан метод культивирования штамма "Н-120" вируса ИБК. Изучены иммунобиологические свойства ассоциированной вакцины против ИБК и НБ и определена иммуногенная эффективность этой вакцины при различных методах применения. Установлено, что ассоциированная вакцина против ИБК и НБ может применяться методом выпаивания с водой, крулнокапельного распыления, интраназально и окулярно. Определены оптимальные иммунизирующие дозы для указанных методов применения. Обнаружено наличие вариантных штаммов вируса ИБК на территории РФ с помощью серологических методов. Приготовлена экспериментальная серия полиштаммной инактивированной вакцины против ИБК из вариантных штаммов, встречающихся на территории нашей страны. Она оказалась стерильной, безвредной и иммуногенной, а ее высокая антигенная эффективность подтверждена серологическими методами.
Практическая значимость. В результате выполненных исследований разработана ассоциированная вакцина против ИБК и НБ для различных методов введения, которая может успешно применяться в хозяйствах с различным направлением ведения птицеводства. Ассоциированная вакцина стерильна, безвредна, ареактогенна и обладает высокой
имуногенной активностью. Ассоциированная вакцина прошла производственные комиссионные испытания в 9 птицехозяйствах объединения «Кубаньптицепром» на поголовье более 2 млн. птиц.
Нормативно-техническая документация на разработанную вакцину одобрена ученым советом института и утверждена Департаментом ветеринарии Российской Федерации. Ассоциированная вакцина против ИБК и НБ внедрена в промышленное производство и применяется в птицеводческих хозяйствах России.
Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые на защиту:
подбор и изучение вакцинных штаммов вируса инфекционного бронхита кур и Нькжаслской болезни, пригодных для изготовления ассоциированной вакцины;
обоснование оптимальных условий получения и компонентного состава живой ассоциированной вакцины против ИБК и НБ;
- результаты изучения иммунобиологических свойств живой
ассоциированной вакцины против ИБК и НБ;
обоснование методов применения ассоциированной вакцины против ИБК и НБ;
результаты изучения свойств ассоциированных вакцин в процессе длительного хранения;
- типирование вируса ИБК по наличию специфических антител в сыворотках крови в РН и РТГА;
- оценка антигенной активности полиштаммной инактивированной
вакцины против ИБК серологическими методами.
Апробация результатов работы. Материалы диссертации были доложены на заседаниях ученого совета ВНИИЗЖ в 1997-1Э99г.г. и на научных конференциях ВНИИЗЖ (г. Владимир, 1997; 1998).
Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ.
Директором ВНИИЗЖ утверждены «Методические указания по определению уровня антител к вирусу инфекционного бронхита в реакции
торможения гемгглютинации» и «Методические указания по постановке реакции нейтрализации при инфекционном бронхите кур».
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 172 листах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение, выводы, практические предложения и список литературы, который состоит из 239 источников, в том числе 45 работ отечественных исследователей. Работа иллюстрирована 33 таблицами, 3 рисунками и дополнена приложением документов, подтверждающих внедрение результатов работы в ветеринарную практику.