Введение к работе
1.1. Актуальность проблемы. Развитие продовольствегаюй и сырьевой базы 10 многом зависит от успехов в области биологических и сельскохозяйственных гаук, требуя постоянного расширения и углубления исследований как в тео-)етическом плане, так и в плане внедрения достижений науки в производство.
Как известно, благодаря широкому применению разработанного отечествен-{ыми учеными метода искусственного осеменения и усовершенствованных при-:мов племенной работы, удалось в течение двух-трех десятилетий преобразовать, лсталое в прошлом, грубошерстное овцеводство нашей страны в тонкорунное и галутонкорушюе и создать ряд новых высокопродуктивных пород овец.
Главное преимущество искусственного осеменения заключается в возмож-юсти наиболее рационального использования особо ценных производите-іей для быстрейшего повышения продуктивности животных на племенных і товарных фермах. Для достижения эт;ой цели требуется значительно увели-шть количество приплода, получаемого от ценных элитных производите-іей. Последнего можно добиться увеличением продолжительности случного іериода, применением методов длительного хранения спермы, обеспечива-ощих возможность ее заготовки на протяжении всего года, уменьшением юзировки спермы без ущерба для оплодотворяемости осемененных овец.
Первый способ в районах развитого овцеводства не может дать положительного эффекта, поскольку границы практически применяемого сезона случ-<и ограничены здесь полутора - двумя месяцами (октябрь - ноябрь). Второй ;пособ в настоящее время не имеет широкого применения в связи с низкой лшодотворяемостыо овец при использовании замороженной спермы барана.
Что касается возможности уменьшения дозировки свежеполучае-мой спермы, то в этом отношении высказывалось, как правило, пессимистическое мнение. Снижение узаконенной дозы 0,05 мл неразбавленной спермы, содержащей около 150 млн. спермиев, неизбежно приводило к закономерному сни-кению оплодотворяемости овец. В то же время у коров регистрируется вы-:окая оплодотворяемость при введении 30 и даже 20 млн. спермиев.
При решении задачи уменьшения дозировки спермы при искусственном эсеменении овец следует учитывать, что с помощью микрошприцев можно звести сперму в объеме не менее 0,05 мл. Поэтому при уменьшении дозы со 150 до 50 или 30 млн. спермиев необходимо разбавить сперму в 3 или 5 раз.
Отсюда возникает вопрос, не снижается ли переживаемость и оплодотворяющая способность спермиев под действием применяемого разбавителя и нельзя ли предотвратить это нежелательное явление применением биологи-іески полноценных синтетических сред? Решение этого вопроса могло по-
служить основой поиска биологически полноценных разбавителей спермь барана при уменьшении дозы спермиев, используемой для осеменения овец
В решении проблемы ускоренного воспроизводства овец существуют V многие другие аспекты. Необходимо заметить, что широко применяемый і настоящее время метод анабиоза, осуществляемый при охлаждении спермы до температуры +2 -+4С,приводит к определенному снижению оплодотво-ряемости овец, осемененных сохраняемой спермой. Это явление может быть связано с целым комплексом факторов, таких как биологическая полноценность применяемых разбавителей, степень разбавления, температура и длительности хранения, способ транспортировки, влияние микроорганизмов, развивающихся в процессе сохранения спермы и мн. др.
Следует учесть, что все эти факторы могут оказывать определенное влияние на основное свойство спермиев -детерминацию нормального развития зиготы. Следствием этого могут быть нарушения пренатального развития зародыша, эмбриональная смертность и бесплодие овец.
1.2. Цель и задачи исследований. Исходя из вышеизложенного и была
определена основная цель проведенных исследований - научное обоснова
ние и разработка рекомендаций, направленных на повышение оплодотворя-
емости овец, осеменяемых свежей и сохраняемой спермой.
Для достижения цели решались следующие задачи:
сравнительная оценка биологических свойств и оплодотворяющей способности эпидидимальной и эякулированной спермы барана с хронической фистулой одного спермопровода;
изучение влияния различных разбавителей на биологические свойства спермы барана и жизнеспособность возникающих при оплодотворении зигот;
изучение оплодотворяемое овец, осемененных уменьшенными дозами спермы, разбавленной полноценными синтетическими средами;
оценка морфологических, физиологических и биохимических свойств спермиев в зависимости от применяемого разбавителя и способов транспортировки сохраняемой спермы;
установление степени количественной и качественной бактериальной и грибковой загрязненности спермы (видовой состав микрофлоры, изменение ее в процессе хранения, влияние на выживаемость и оплодотворяющую способность спермиев);
изучение бактериальной и микозной загрязненности родополовых путей и ее изменение при использовании различных технологических приемов в искусственном осеменении.
1.3. Научная новизна и теоретическая значимость работы. Изучена мор
фология, физиология и биохимия спермиев эпидидимальной спермы барана
и выяснена физиологическая роль секретов придаточных половых желез. Усовершенствование методики наложения хронической фистулы на сперми-опровод позволило получать свежую эпидидимальную сперму систематически на протяжении длительного периода. Наложение односторонней фистулы дало возможность от одного и того же животного получать и сравнивать как эпидидимальную сперму, так и сперму, смешанную с секретами придаточных половых желез.
Методом прямого биоконтроля выяснены основные биологические свойства эпидидималыюй спермы: переживаемость в половом тракте самки, оплодотворяющая способность и биологическая полноценность в смысле детерминации нормального развития зародыша. Установлено положителыюе действие секретов придаточных половых желез на переживаемость спермиев в половом тракте самки.
Впервые проведена сравнительная оценка различных синтетических и биологических разбавителей спермы барана методом внутритрубного введения спермы, разбавленной испытуемыми средами в 1000 раз. Изучены и теоретически обоснованы способы снижения дозы спермы для осеменения овец со 150 до 50, а возможно и до 30 млн. спермиев, доказано преимущество «фосфатных» разбавителей, применяемых для разбавления спермы.
Установлены основные причины снижения оплодотворяемости овец, осемененных перевозной спермой. Разработаны теоретические обоснования перспективности осеменения овец кратковременно сохраняемой спермой, разбавленной глюкозо-желточно-фосфатным разбавителем.
Впервые изучена динамика количественных и качественных изменений бактериальной и микозной микрофлоры в сохраняемой сперме барана и ее влияние на оплодотворяющую способность спермиев.
Разработано теоретическое обоснование использования люминесцентной микроскопии для оценки качества свежей и сохраняемой спермы барана.
Проведено изучение микрофлоры различных участков половых органов овец на интактных животных и животных с хронической фистулой рога матки. Наряду с этим исследовалось бактериальное содержимое половых путей при интравагиналыюм способе синхронизации.
Исследованы основные причины эмбрионлыюй смертности и бесподия овец. Проведены бактериологические и микологические исследования гениталий бесплодных животных.
1.4. Практическая значимость работы. Материалы исследований позволили рекомендовать в производство способ осеменения овец трехкратно уменьшенными дозами спермы, разбавленной глюкозо-фосфатным или глюкозо-желточно-фосфатным изотоническим раствором. Эти рекомендации широко применя-
гатся в овцеводческих хозяйствах Ставропольского края, способствуя значительному увеличению числа маток, осеменённых элитными производителями.
Результаты исследований использованы для разработки технологии транспортировки спермы, сохраняемой в глюкозо-фосфатном разбавителе при комнатной температуре в течение 3-4 часов.
Использование рекомендаций, разработанных на основании проведенных зксперимеїггов, позволяет сшпитьэмбрионалыгуюсмерпгостьнбесгшодиеу овец.
1.5. Реализация результатов исследований. Основные научные положения
и практические предложения вошли в "Рекомендации по оптимальному ре
жиму использования высокоценных племенных баранов при длительной их
эксплутации на протяжении года", ВАСХНИЛ, Москва, 1987, "Рекоменда
ции по организации осеменения овец", утвержденной начальником Госпле-
минспекции 9.9.90 г., рекомендации Совета по пропаганде и организации
освоения достижений науки и техники ВАСХНИЛ "Организация осемене
ния овец", Москва, 1991. Метод исскуствеиного осеменения овец уменьшен
ными дозами спермы широко используется на овцетоварных фермах.
Материалы диссертации вошли в рекомендации и учебные пособия, цитируются в научных работах, используются при проведении обучения ветврачей, зооинженеров и техников по искусственному осеменению.
1.6. Апробация работы. Основные материалы исследований неоднократно
доложены и одобрены на научных конференциях и ученых советах ВНИИОК,
на научных конференциях Ставропольской сельскохозяйственной академии и
Ставропольского государственного университета, на 7-ом Международном кон
грессе по размножению и искусственному осеменению животных в Париже.
1.7.Публикации. Основные материалы исследований, включенные в диссертацию, опубликованы в 38 печатных работах.
-
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 302 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований, анализа результатов собственных исследований, выводов, практических предложений, списка используемой литературы, включающей 302 наименования, в том числе 173 иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована 20 фотографиями микрофотографиями.
-
Предметом защиты является научно обоснованная технология получения большего числа потомства от наиболее ценных производителей, учитывающая специфические особенности воспроизводительной способности баранов и маток, а именно: