Введение к работе
Актуальность темы. Метапневмовирусная инфекция широко распространена в стадах коммерческой птицы (куры-несушки, бройлеры и индейки) в птицеводческих хозяйствах разных стран мира (S.B. Buys & J.H. Du Preez, 1980; S.B. Buys et al., 1986; J.S. Mc Dongall & Cook, 1986; G.P. Wilding et al., 1986; A.N. Alkhalaf, 2002; R.C. Jones, 2004).
Первичная вирусная инфекция часто осложняется болезнями бактериальной и вирусной природы, ведущими в результате к высокой заболеваемости и смертности (И.А.Борисова, А.В.Борисов, 2009; J.K.A. Cook, 2000).
Случаи возникновения метапневмовирусной инфекции птиц отмечены в птицехозяйствах Российской Федерации (В.Н.Ирза с соавт., 2003,2005; З.Б.Хлебовец с соавт., 2005; Д.В.Дмитриев, 2007; Б.Б.Трефилов с соавт., 2010). У невакцинированных кур-несушек и бройлеров регистрировали специфические антитела к метапневмовирусу.
Исходя из обширных различий в антигенной структуре и аминокислотной последовательности гена, существующие штаммы метапневмовируса классифицированы на четыре подтипа A,B,C,D (И.А.Борисова, 2008; J.K.A. Cook, D. Cavanagh, 2002; M.I. Sabara, J.E. Larence, 2002).
Проблема антигенной структуры метапневмовируса помимо большого теоретического значения представляет в настоящее время существенный практический интерес в период массовой вакцинации против этой болезни, а также при изучении репликации вакцинных и эпизоотических штаммов вируса в организме и культурах клеток и их распространения среди птицы.
Чувствительность клеточных культур к метапневмовирусу птиц установлена многими исследованиями (И.А. Борисова, 2008; А.С.Пронин с соавт., 2006; B. Panigrahy et al., 2000; F.E. Jirjis et al., 2000, J.K.A. Cook et al., 2001). Однако какая бы система не была использована для обнаружения вируса, его идентификация может быть подтверждена при помощи различных серологических методов исследований.
Изучение антигенной специфичности и степени нейтрализации штаммспецифической антисывороткой метапневмовируса птиц в литературе не сообщалось.
Вместе с тем, по результатам исследований сотрудниками ГНУ ВНИИЗЖ (А.С.Пронин с соавт., 2006) установлена циркуляция метапневмовируса птиц на территории РФ подтипов А и В.
В связи с вышеизложенным изучение репродукции метапневмовируса (МПВ) птиц в гомологичных и гетерологичных культурах клеток и определение антигенных штаммовых различий вируса являются актуальными.
Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение культуральных и антигенных свойств метапневмовируса птиц.
Для ее достижения были поставлены следующие задачи:
- выделить метапневмовирус птиц и провести его идентификацию;
- изучить культуральные свойства метапневмовируса птиц;
- изучить антигенные свойства метапневмовируса птиц;
- разработать методические положения по диагностике метапневмовирусной инфекции птиц.
Научная новизна. Установлена возможность использования культуры клеток куриных эмбрионов и клеток Vero для выделения из патологического материала метапневмовируса птиц. Показана возможность культивирования МПВ птиц в различных клеточных культурах и установлена их отличие в чувствительности к вакцинным и эпизоотическим штаммам возбудителя болезни. Выявлена высокая репликационная способность вакцинных штаммов МПВ птиц в клетках Vero.
Впервые изучены антигенная специфичность и степень нейтрализации гомологической и гетерологической штаммспецифической сывороткой вакцинных штаммов МПВ птиц в реакции нейтрализации и иммуноферментном анализе и установлено их отличие по Ag и An признакам. Определена степень антигенного родства вакцинных и эпизоотических штаммов МПВ птиц.
Практическая значимость работы. Установлена перспективность использования клеток Vero для наработки вирусного материала при изготовлении средств диагностики и специфической профилактики метапневмовирусной инфекции птиц.
Разработаны и утверждены Россельхозакадемией Методические положения «Диагностика метапневмовирусной инфекции птиц».
Основные положения , выносимые на защиту:
- результаты по выделению изолятов вируса и их идентификации;
- культивирование метапневмовируса птиц в первично-трипсинизированных культурах клеток;
- культивирование метапневмовируса птиц в клетках Vero;
- результаты изучения антигенности вакцинных штаммов метапневмовируса птиц, их антигенной специфичности и степени нейтрализации со штаммспецифическими сыворотками.
Апробация работы. Результаты исследований по теме диссертации доложены и обсуждены на заседаниях Методического совета отдела вирусологии и ОБП и Ученого совета ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии (2007-2010гг.), на Международном агропромышленном конгрессе «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии» (Санкт-Петербург, 2009г.); Актуальные проблемы ветеринарии и животноводства: материалы Межрегиональной научно-практической конференции (Самара, 2010).
Личный вклад соискателя. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Отдельные этапы выполнены совместно с ведущим научным сотрудником Никитиной Н. В., за что автор выражает ей сердечную благодарность.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано четыре научные статьи.
Структура и объем диссертационной работы. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы и приложение.
Похожие диссертации на Культуральные и антигенные свойства метапневмовируса птиц
