Содержание к диссертации
Введение
I. Обзор литературы 8
1.1. Морфологическое строение органов гомеостаза у млекопитающих 8
1.2. Патогенез и патоморфология у лабораторных животных при криптоспоридиозе 18
1.3. Клинико-биохимические показатели патологического процесса в организме сельскохозяйственных животных при криптоспоридиозе 26
1.4. Влияние некоторых препаратов па организм животных при паразит арных заболеваниях 33
II. Собственные исследования 39
2.1. Материал и методы исследования 39
3. Результаты собственных исследований 42
3.1. Патоморфологические изменения в отдельных органах и тканях мышей при экспериментальном заражении ооцистами Cryptosporidium parvum 42
3.1.1. Патоморфологические исследования у животных контрольной группы 42
3.1.2. Патоморфологические изменения в печени мышей, экспериментально инвазировапных С. parvum 43
3.1.3. Патоморфологические изменения в почках мышей, экспериментально инвазированных С. parvum 53
3.1.4. Патоморфологические изменения в надпочечниках мышей, экспериментально инвазировапных С. parvum 60
3.1.5. Сравнительная патоморфологическая оценка действия препаратов ципрофлоксацина и ампролиума на органы, ответственные за гомеостаз при криптоспоридиозе мышей 64
3.2. Гистохимические изменения в органах, ответственных за гомеостаз у мышей, экспериментально инвазированных ооцистами криптоспоридии, до и после применения препаратов 73
Обсуждение полученных данных 85
Выводы 100
Практические предложения 102
Список использованной литературы 103
Приложение 124
- Патогенез и патоморфология у лабораторных животных при криптоспоридиозе
- Влияние некоторых препаратов па организм животных при паразит арных заболеваниях
- Патоморфологические исследования у животных контрольной группы
- Сравнительная патоморфологическая оценка действия препаратов ципрофлоксацина и ампролиума на органы, ответственные за гомеостаз при криптоспоридиозе мышей
Введение к работе
Актуальность темы. На современном этапе развития науки биологическое моделирование болезней становится важнейшим методом научного познания. Это обусловливает необходимость создания па лабораторных животных таких экспериментальных моделей, которые наиболее адекватно отражали бы механизм возникновения и развития заболеваний или отдельные их патогенетические звенья, а также механизмы выздоровления (Давыдовский, 1962; Саркисов, 1990). Большинство исследователей (Шибалова, 1968, 1969; Алиев, 1993; Бочкарев, 1996; Ямпольский, 1997; Васильева, Небайкина, 1997, 2000; Васильева, 2002; Fayer, 1997, и др.) в качестве такой модели использовали культуры клеток, что сопряжено с определенными трудностями.
Известно, что впервые криптоспоридии были обнаружены у мышей (Tyzzer, 1907), следовательно, белые лабораторные мыши могут быть использованы для воспроизведения криптоспоридиоза. Вопрос лишь в том, как подобрать оптимальную дозу криптоспоридии, получаемых от поросят, телят, и в каком возрасте наиболее ярко проявляется заболевание, вызываемое простейшими класса Sporozoasida, отряда Eucoccidiorida, и в частности криптос-поридиями (Шибалова, 1987; Никитин, Павласек, 1988, 1989; Тайчииов, 2000; Landverk, 1987; Castro-Hermida, Freire, Oteiza, 2000; Lindsay Woods Upton et al., 2000, и др.).
Для уточнения деталей развития болезни, а также апробации новых терапевчических средств нами была разработана экспериментальная модель криптоспоридиоза на белых мышах и проведено тщательное патоморфоло-гическое исследование органов гомеостаза, так как разработка и внедрение новых лекарственных препаратов, ускоряющих восстановительные процессы в поврежденных органах и тканях, является актуальной задачей ветеринарной науки (Бейер, Пашкин, Рахманова, 1987; Шибалова, 1997; Васильева, 2004, 2005, и др.).
Поскольку лечение паразитарных болезней вызывает необходимость применения специфических препаратов, то знание механизма их воздействия на органы, ответственные за гомеостаз имеет принципиальное значение.
Изменение состояния животных в результате применения химиотера-певтических средств изучено недостаточно, так как возникающий при этом побочный эффект обусловливает непосредственное фармакологическое действие препаратов на иммуногенез, а также опосредованное - через массовое поступление метаболитов или соматических антигенов паразита. В связи с этим необходимо комплексное изучение происходящих в организме изменений.
Цель работы. Целью нашей работы является изучение сравнительной патоморфологической и гистохимической оценки эффективности действия ампролиума и ципрофлоксацина на органы гомеостаза до, и после применения препаратов.
Задачи исследования. Для реализации указанных целей были поставлены следующие задачи:
1. Выявить патоморфологические изменения в печени, почках и надпочечниках экспериментально зараженных мышей криптоспоридиями.
2. Провести сравнительный анализ препаратов ампролиума и ципрофлоксацина патоморфологическими и гистохимическими методами.
3. Определить взаимосвязь между патоморфологическими и гистохимическими изменениями до и после введения препаратов.
Научная новизна. Впервые изучено действие препаратов из группы цефалоспоринов и кокцидиостатиков на органы гомеостаза лабораторных животных.
Впервые дана сравнительная патоморфологическая и гистохимическая оценка эффективности этих препаратов.
Результаты патоморфологического и гистохимического исследования изменения гликогена и липидов на различных стадиях развития болезни позволили с учетом литературных данных и наших исследований раскрыть ряд вопросов патогенеза криптоспоридиоза до и после применения препаратов. Практическая ценность работы. Практическая ценность работы в том, что показана необходимость при отборе химиотерапевтических препаратов для лечения животных больных протозоозами, проводить всестороннее изучение патоморфологических и гистохимических изменений в организме животных, происходящих под влиянием этих препаратов. Полученные данные по патоморфологическим и гистохимическим изменениям в органах го-меостаза при криптоспоридиозе и после применения ципрофлоксацииа и ам-пролиума могут быть использованы при изучении действия вновь синтезируемых препаратов из группы ципрофлоксацииа и кокцидиостатиков на организм животных.
Кроме того, они используются при чтении лекций по паразитологии студентам специальности «Ветеринария», а также слушателям ФПК.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
1. Патоморфологические и гистохимические изменения в органах гомеостаза лабораторных животных до применения ципрофлоксацииа и ампролиума.
2. Патоморфологические изменения в органах гомеостаза лабораторных животных после применения препаратов.
3. Гистохимические изменения в органах гомеостаза лабораторных животных после применения ципрофлоксацииа и ампролиума.
Апробация работы. Основные положения работы доложены на Всероссийской научно-практической конференции «Эффективность адаптивных технологий в животноводстве» (Ижевск, 2004); сборнике научных работ «Научные проблемы производства продукции животноводства и улучшения ее качества» (Брянск, 2004); Международной научно-практической конференции «Основные итоги и приоритеты научного обеспечения ЛПК Евро - Северо -Востока» (Киров, 2005); Всероссийской научно-производственной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» (Москва, 2005); III Международном симпозиуме «Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии» (Санкт-Петербург, 2005); XXXIV Огаревских чтениях Мордовского госуниверситета «Естественные и технические науки» (Саранск, 2006); XI научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов МГУ имени Н.П. Огарева «Естественные науки» (Саранск, 2006); на расширенном заседании кафедры патанатомии, инфекционных и инвазионных болезней животных Аграрного института Мордовского госуниверситета (протокол № 2 от 10 марта 2009 г.)
Внедрение результатов исследования. Основные положения диссертационной работы достаточно полно отражены в 4 научных статьях, включая 1 в центральном издании, рекомендованном ВАК Минобразования и науки РФ.
Полученные результаты внедрены на кафедре патанатомии, инфекционных и инвазионных болезней животных Мордовского государственного университета имени Н.П. Огарева; на кафедре патанатомии, анатомии и гистологии животных Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии; на кафедре инфекционных и инвазионных болезней животных Ижевской государственной сельскохозяйственной академии и в лабораториях Республики Мордовия.
Объем и структура диссертации. Диссертация включает общую характеристику работы, обзор литературы, анализ результатов собственных исследований, их обсуждение, выводы, практические предложения, список использованной литературы, приложение. Она изложена на 120 страницах машинописного текста, иллюстрирована 40 рисунками, 5 диаграммами. Список использованной литературы включает 190 источников, в том числе работы иностранных авторов.
Патогенез и патоморфология у лабораторных животных при криптоспоридиозе
В начале века Е.Е. Тиццер (Tyzzer, 1907) обнаружил в клетках эпителия желез желудка лабораторных мышей ранее не известных одноклеточных паразитов, достигавших на самых крупных стадиях развития 6-7 мкм в диаметре. Принадлежность этих паразитов к кокцидиям не вызывала у Е.Е. Тиццера сомнений, несмотря на их необычайно мелкие размеры, а также кажущуюся внеклеточную локализацию. Свои родовое и видовое названия — Cryptosporidium muris - эти кокцидии получили лишь через 3 года (Tyzzer, 1910). А еще через 2 года в эпителии тонкого кишечника мышей был описан другой вид этого рода - С. parvum, имеющий еще более мелкие ооцисты - 4 - 5 мкм в диаметре (Tyzzer, 1912).
В дальнейшем из разных позвоночных животных было описано еще несколько видов Cryptosporidium. Последующая ревизия этих видов свела многие из них в синонимы (Levine, 1984; Fayer, Ungar, 1986). В настоящее время валидными видами считаются С. muris и С. parvum - млекопитающих, С. meleagridis и С. baileyi - у птиц, а также С. crotali и С. nasorum — соответственно у пресмыкающихся и рыб, хотя S.J. Upton (1990) признает, валидным для пресмыкающихся другой вид - С. serpentis.
Известно, что морфология и размеры ооцист и их структурных компонентов (спороцист, спорозоитов, остаточных тел, микропиле, шва, тельца Штида) играют большую роль в систематике кокцидии, прежде всего кишечных. Известны случаи, когда новые виды кокцидии описывались только по ооцистам, оказавшимся единственной доступной стадией развития паразита (Pellerdy, 1974). Это может быть оправдано тем, что даже на уровне светового микроскопа и без специальной обработки структура ооцисты в целом оказывается достаточно информативной по многим параметрам.
Т.В. Бейер, Н.В. Сидоренко, М.В. Григорьев (1995) экспериментальным путем доказали, что у зараженных крысят ооцистами С. parvum в дозе 20 000 і на одну голову наблюдалась массивная колонизация ворсинок и крипт эндогенными стадиями паразита. Наиболее сильно зараженным обычно оказывался дистальный отдел тонкой (подвздошной) кишки, на расстоянии 2 - 7 - 14 см от червеобразного отростка, т.е. примерно в 35 - 37 см от желудка, при общей длине тонкой кишки у 14 - 20-дневных крысят 40 - 42 см. Локализация криптоспоридий ограничивалась зоной щеточной каемки призматических эпителиоцитов.
В.А. Васильева, Л.А. Иебайкина (1995, 1997) при патоморфологичес-ском исследовании органов и тканей лабораторных животных, инвазирован-ных ооцистами криптоспоридий , наиболее выраженные изменения обнаружили у мышат, убитых на третьи сутки после заражения.
В печени рисунок балочного строения долек был сохранен. Гепатоциты центральной части долек с явлениями зернистой дистрофии. Эпителий желчных капилляров отклонений не имел. В эндотелии центральной вены наблюдали пролиферацию, утолщение междольковой соединительной ткани.
В просвете отдельных альвеол и в толще стенок легких отмечали выраженные геморрагии. Стенки альвеол были утолщены, в просвете бронхиол содержались эритроциты и слущенные эпителиальные клетки. Междольковая соединительная ткань в состоянии отека. Регистрировали отечность интер-стиции миокарда и зернистую дистрофию миокардиоцитов. Просвет больших извитых канальцев почек был расширен, эпителий утолщен. В просвете извитых канальцев, видна белковая масса. Стенки сосудов микроциркуля-торного круга с явлениями мукоидного набухания.
В селезенке обнаружили гиперплазию лимфоидной ткани, расширение границ фолликулов и отечность трабекулы. Красная пульпа содержала значительное количество лимфоидпых клеток. Слизистая оболочка кишечника утолщена, с обширной инфильтрацией лимфоидно-гистиоцитарпых клеток. Отмечали атрофию эпителия ворсинок.
Н.В. Свежова (1995) установила экспериментальным путем на крысятах, зараженных С. parvum, необычную экстрацитоплазматическую локали 20 зацию возбудителя в компартменте щеточной каемки эптероцита кишечника и симптомы, вызываемые этим паразитом (профузная диарея), что наводят на мысль о возможности уменьшения паразитом активности фосфатаз - основных ферментов пристеночного пищеварения в зараженных клетках. На модели экспериментально зараженных крысят - сосунков светооптически удалось показать, что паразитирование С. parvum снижает активность щелочной и полностью активность кислой фосфатазы. При этом активность щелочной фосфатазы, хоть и в ослабленном виде, удалось выявить даже на зараженных клетках кишечника. Она предполагает, что сам паразит, а, возможно, и индуцированная паразитом структура клетки хозяина (dense band) препятствуют латеральному перемещению по мембранам ворсинок, образующих экстраци-топлазматическую паразитоформную вакуоль, таких мембран связанных ферментов гликокаликса как кислая и щелочная фосфатаза.
Н.В. Сидоренко (1995) установил, что скармливание 10-дневным крысятам культуры ооцист С. parvum за 30 минут до вскрытия показало, что внедрение спорозоитов в клетку хозяина происходит достаточно быстро. С. parvum локализуется и развивается в нижних отделах подвздошной кишки тонкого кишечника, а при сильном заражении колонизирует тонкий кишечник по всей длине, включая крипты.
Н.В. Сидоренко, Н.В. Свежова, И.В. Григорьев (1995) на экспериментально зараженных крысятах показали, что сильная колонизация слизистой тонкого кишечника эндогенными стадиями С. parvum приводит к полной или частичной инактивации щелочной и кислой фосфотаз в зараженных энтеро-цитах.
М.А. Мусаев, Г.Д. Гаибова, Г.И. Исмаилова (1996) при исследовании выделений ооцист С. parvum крысами, мышами, кроликами, нутриями после заражения изолятами ооцист от сельскохозяйственных животных средние размеры их в большинстве случаев оставались стабильными. Но при заражении нутрий и мышей изолятами ооцист телят и поросят соответственно происходило достоверное увеличение размеров ооцист. Ю.А. Дубровский, Л.П. Емельянова, СВ. Лисина (1997) проведя ряд исследований выявили высокое обилие зараженных типично для мелких грызунов, пойманных ими в деревенских домах, в которых скот содержался под одной крышей с жилым помещением -домовой мыши (6 из 12, или 50,0%) и полевой мыши (16 из 22, или 72,7%). Они полагали, что коровы и телята служат для них дополнительным источником заражения криптоспоридиями.
Среднее обилие зараженных (30 - 40%) зарегистрировано у рыжих (п = 584) и серых полевок (п = 66) - лесных и полевых (луговых) зверьков, постоянно роющихся в поверхностном горизонте почвы в процессе сооружения обширных нор и питания зеленью и корнями растений.
Напротив, низкий уровень зараженности характерен для лесной (9 из 71, или 12,7%) и желтогорлой мыши (2 из 23, или 8,7%), питающихся преимущественно семенами и беспозвоночными, не склонных к сооружению нор в земле. Минимальная зараженность выявлена у насекомоядного зверька - обыкновенной бурозубки (4 из 77, или 5,2%).
В.А. Васильева (1998, 1999, 2000, 2004) выявила наиболее выраженные изменения у мышат, убитых на 8 и 9 день после инвазирования, которые по сравнению с контролем, выражались в следующем: в топком отделе кишечника слизистая утолщена за счет инфильтрации ее лимфоидно-гистиоцитарпыми клетками, эозинофилами и отечности соединительнотканной основы ворсинок. Ворсинки деформированы, в апикальной части их часто обнаруживаются явления десквамации эпителия. Видны ооцисты и шизонты С. parvum в ворсинках кишечника, спорозоиты и мерозоиты в межворсинчатых пространствах.
Влияние некоторых препаратов па организм животных при паразит арных заболеваниях
Основным методом борьбы при заболеваниях простейшими является химиотерапия. В неблагополучных хозяйствах обработку проводят ежемесячно. Длительное использование одних и тех же препаратов приводит к снижению эффективности проводимых мероприятий за счет появления препарат— устойчивых изолятов паразитов. Для успешной борьбы с простейшими и во избежании появления резистентных изолятов необходимо иметь, набор препаратов разной химической природы и механизма действия.
СВ. Горбов, Б.Є.Цыряпкин (1984) считают, что в многофакторной этиологии диарей молодняка сельскохозяйственных животных определенное место занимают. криптоспоридии. Были полученьь удовлетворительные рет зультатыпри одновременном применении полимиксина в дозе 30 -40 тыс. ЕД с фуразолидоном 6 — 10 мг/кг массы животного два раза в день в течение пяти - шести дней подряд телятам страдающим диареями смешанной этиологии.
Предложенное лечение Я;П. Литвинским, В.И: їїутьш (1989) позволило снизить падеж телят и тем самым обеспечить их. сохранность. Для этого применяли химкокцид — 7 в дозе 1 г теленку 1 раз в день за 1 ч до выпаивания молока и молозива; в сочетании с полимиксином из расчета 0,004 г на 1 кг массы тела три раза в день. Одновременно с этим использовали 2 раствора в состав которых входили: 1) 3;5 г хлорида:натрия, 2,5 г натрия гидрокарбоиа-та, 1,5 г калия хлорида,.20 г глюкозы и 1 л воды кипяченой; 2) 3,5 г натрия хлорида; 2,9 г натрия цитрата, 2,5 г калия хлорида., 10 г глюкозы.щ! л воды, кипяченой. рН фекалий определяли лакмусовой бумажкой. Если они имели щелочную реакцию больным .телятам выпаивали раствор 2, если кислую — . раствор 1 по 250 - 500 мл животному.
Ф.Н: Єамигулин, А .М- Буканов (2000) при диарее животных криптоспо-ридийнойл этиологии,, они. рекомендуют применять следующие схемы лечения: химкокцид;. химкокцид + тримеразин; химкокцид + . полимиксин; химкокцид ..+ трибриссии; химкокцид + левомицетин; ринталилжфенкур в сочетании; с,сульфадимизином: Наибольший.эффект был получен;от применения комбинированного препарата; состоящего из химкокцида:(45;4 %), фармазина (45,4 %), полимиксина:(4 6:%), аскорбиновой кислоты (4,6 .%). . . , ,
P.F. Калимуллина (2000); изучая влияние гумата на неспецифические факторы естественной резистентности организма, телят выявила, что этот препарат является активным биостимулятором, обеспечивающим устойчивость организма молодняка, к неблагоприятным факторам окружающей среды воздействуя на клеточные и гуморальные механизмы неспецифической защиты. Наиболее благоприятное влияние на организм препарат оказывает в дозе 0,5 мл на 1 голову в сутки.
В.А. Васильева (2001, 2002, 2004) изучая оценку терапевтической эффективности фтазина при криптоспоридиозе поросят, установила, что наиболее эффективной дозой является 0,5 г на голову с применением 2 раза в сутки в течение 5 дней подряд. Экстенсэффективность составила 80,0 %.
Препарат цигро (0,3 г/кг массы тела) в сочетании с витамином В\2 (5 мг/кг массы тела) показал ЭЭ - 80 %, цигро в сочетании с циплином (в дозе 0,2 мг/кг) - 73,6 %, цигро и литовит (0,14 г/кг массы тела) - 84,9 %.
Также она разработала комплексный метод терапии смешанной инвазии криптоспоридиоза и эзофагостомоза поросят. Полученные результаты позволили рекомендовать фепбендазол с препаратом цигро в течении трех дней подряд по 1 разу в день в дозе 5 мг/кг и 0,3 г/кг массы тела соответственно.
Проведя сравнительную характеристику влияния, на организм мышей при экспериментальном криптоспоридиозе цефалоксина и циплина установила; что лучше использовать циплин, так как он обладает эффективным терапевтическим эффектом и меньшей токсичностью.
В.А. Козявин (2001) утверждает что, препарат ферран близок к гемоглобину крови, обуславливается быстрой транспортировкой и адаптацией в организме. Он обладает высокой гемосовместимостыо и нормализует состав крови, оказывает благоприятное воздействие на Т - и В - системы.иммунитета, что так необходимо при инвазионных заболеваниях которые ведут к развитию вторичных иммунодефицитов.
Е.А. Логачева, В.И. Терехов, А.Я. Сапунов (2001) при лечении телят и поросят, больных эймериозом препаратом эндофарм, не установили каких либо осложнений или побочных явлений. В ходе проведенных опытов они выявили, что эндофарм является эффективным и безопасным препаратом при эймериозе молодняка крупного рогатого скота и свиней. Эндофарм действует на различные виды эймерий и гнилостные бактерии паразитируещие в желудочно-кишечном тракте телят и поросят, что ставит его в разряд перспективных для применения в ветеринарии при лечении как моно - так и смешанных протозоопозиых и протозоонознобактериальных заболеваний.
Н.А. Трошин, Н.А. Трошин (2001) отметили терапевтическую эффективность Вифазола при гастроэнтеритах телят, которая выражалась в следующем, среднесуточный прирост массы тела животных опытной группы был выше, чем у телят контрольной группы на 35 %. Повысились уровень гемоглобина, количество эритроцитов, понизились количество лейкоцитов и содержание альбуминов. За счет этого значительно выше количество гамма — глобулиновой фракции и фагоцитарная активность лейкоцитов.
Результаты опытов Н.А. Терехова, Ы.А. Тельнова, A.M. Маркова (2001) показали, что разработанная ими кормовая добавка «Гидрогемол» может найти широкое применение в технологии интенсивного выращивания свиней в качестве профилактического средства при диареях.
Поросята опытных групп, начиная с первого дня после отъема, с удовольствием потребляли корм с кормовой добавкой, их очень привлекал вкус и запах пищи, конкуренция за место у кормушки создавала ажиотаж, что стимулировало аппетит и жизненную активность даже у ослабленных поросят.
СИ. Калюжный, СВ. Ларионов, Р.Т. Маннапова (2002, 2003) на основании результатов исследования заключили, что иммуностимуляция поросят, больных крипт оспоридиозом, Т - и В - активином и особенно прополисом, а также пробиотикотерапией на фоне специфической терапии способствует восстановлению бактерицидной активности сыворотки крови.
Патоморфологические исследования у животных контрольной группы
В сердце мышей, миокардиоциты имели хорошо выраженную продольно-поперечную исчерченность сарколеммы. Рисунок гетерохроматина ядер не изменен. Соединительная ткань интерстиция нежная, умеренно выражена, содержала небольшое количество гистиоцитарных клеток и нежные волокна. Кровеносные сосуды микроциркуляторного русла умеренно заполнены кровью, стенки их без изменений.
В надпочечниках животных контрольной группы соединительнотканная капсула хорошо развита. От нее в глубь органа проникают тонкие волокна рыхлой соединительной ткани. Клубочковая зона небольшая и образована мелкими светлыми клетками с крупным округлым ядром, в центре которого находилось хорошо выраженное ядрышко. Гетерохроматин в виде крупных гранул располагался маргинально. Пучковая зона была представлена крупными клетками с большим округлым светлым ядром с небольшим количеством мелких гранул гетерохроматина. Цитоплазма клегок эозинофильная с небольшими вакуолями, сетчатая зона также небольшая. Ядра клеток несколько вытянутые, темные, с относительно равномерно расположенным гетерохро-матииом. Цитоплазма слабо эозинофильная, гомогенная. Периферия мозговой части железы сформирована клетками, заполненными бурым пигментом. В центре зоны находились крупные темные клетки с базофильной цитоплазмой и крупным округлым светлым ядром. Близко к поверхности органа располагались нервные ганглии, представленные крупными телами нейронов, окруженных глиалыюй оболочкой.
В почках извитые канальцы выстланы однослойным эпителием, в просвете ряда канальцев - единичные клетки слущенного эпителия. В мозговом веществе собирательные трубки выстланы призматическим эпителием, клеточные границы отчетливые.
В печени мышей отмечено1 полнокровие сосудов, хорошо выражена система балок правильного строения. Гепатоциты крупных размеров, много двуядерных. Цитоплазма несколько разрыхлена, междольковая соединительная ткань слабо развита.
Легкие воздушные, малокровные, вокруг некоторых мелких бронхов имеются лимфатические узелки, составляющие пакет из двух - трех узелков. Лимфоциты представлены клетками примерно одной зрелости. Альвеолоциты лежат пристеночно, с явлениями набухания, слущивание их незаметно.
В селезенке красная и белая пульпа отчетливо различимы, рельефно выступают трабекулярный остов и пульпарные артерии. Центральная часть лимфатических фолликулов состояла из крупных, более светлых лимфобла-стов. Фолликулы были опоясаны зоной более мелких лимфоцитов. Красная пульпа содержала ретикулярные клетки с их волокнами, в сети которых располагались лимфоциты, эритроциты, небольшое число эозинофилов.
В тонком и толстом отделах кишечника со стороны как ворсинок, так и сосудов характерных изменений не выявлено.
Печень играет важную роль с точки зрения межсистемной кооперации и является центром обмена веществ в организме, что обусловливает ее функциональное значение как основного органа, обеспечивающего поддержание гомеостаза у животных и выполняющего роль главного адаптивного органа. Всякий процесс адаптации связан с изменениями гомеостаза.
Центральное место в межуточном обмене занимает печень, активно участвующая в сохранении гомеостаза организма. Состояние работоспособности печени определяет интенсивность компенсаторных и адаптационных возможностей организма (Батурин, Тимченко, Арешидзе, Руденко, 2003).
Экспериментальным путем, многие ученые в частности R.L. Kemp, 1974; I. Pavlasek, V.F. Nikitin, 1983, 1987; Т. Landverk, 1987; T.A. Шибалова, 1987; Ю.К. Горбов, А.П. Мачинский, А.Р. Омаров, 1991; С.А. Acedo, G. Quflez, 1995; И.И. Бочкарев, 1996; У.Г. Тайчинов, 1996, 2000; L.G. Davis, R. Soave, 1998; В.А. Васильева, 1998, 2003, 2005; M.S. Abrahamsen, 1999; Т.И. Решетникова, 2004 и другие доказали, что наиболее выраженные патоморфологические изменения у различных видов животных развиваются в тонком и толстом отделах кишечника. Они раньше появляются и более интенсивны в дистальном участке тощей кишки и в подвздошной кишке, что связано с более сильным поражением их криптоспоридиями. Позднее и менее значительно поражаются проксимальный участок тощей кишки и ободочная кишка.
При патоморфологическом изучении печени мышей, зараженных С. parvum, мы учитывали тот факт, что у имматурантных животных этот орган на ранних этапах постнаталы-юго онтогенеза имеет ярко выраженные возрастные особенности. В первые сутки после рождения в печени мышат доль-ковое строение не выражено, имеется мало триад и центральных вен. Ретикулярный каркас представлен небольшим количеством тонких волокон. В дальнейшем, в органе происходило быстрое увеличение количества центральных вен и триад. Ретикулиновые волокна становились более многочисленными. Метаболическая активность гепатоцитов увеличивалась. Содержание жира снижалось, и он встречался преимущественно в отдельных гепатоцитах периферической зоны долек. Резко возрастало количество дву-ядерных клеток. В последующем, взаимное расположение центральных вен и триад, соотношение их между собой, структура гепатоцитов приближалась к таковым у взрослых животных. Это мы учитывали при патоморфологическом исследовании печени мышат, зараженных С. parvum.
На 5-е сутки после заражения у мышей второй опытной группы отмечали слабое венозное полнокровие ткани печени, вследствие этого дольчатость междольковой перегородки прослеживалась только в проекции печеночных триад. Ткань печени набухшая, гепатоциты очерчены слабо, их объем в средней и периферических зонах дольки увеличен. Цитоплазма гепатоцитов резко набухшая, с грубой зернистостью. При этом гепатоциты содержали округлые относительно темные ядра, гиперхроматин которых располагался дисперсно между ними в виде гранул. При этом очертания клеток и ядер были не всегда отчетливыми. В других участках преобладали признаки очаговой формы гиалиново-капельной дистрофии, а также отмечались скопления соединительнотканных клеток.
Сравнительная патоморфологическая оценка действия препаратов ципрофлоксацина и ампролиума на органы, ответственные за гомеостаз при криптоспоридиозе мышей
Нас особенно интересовало влияние ципрофлоксацина и ампролиума на органы, ответственные за гомеостаз, так как некоторые химиотерапевтические препараты небелковой природы являются неполноценными антигенами. Такие лекарственные вещества, вступая в связь с белком крови, лимфы, клеток, становятся полноценными комплексными антигенами. Реакция между белково-лекарственным антигеном и антителом приводит к выделению гистамина, серо-тонина и других токсических веществ, вызывающих комплекс отрицательных симптомов.
Препараты, применяемые для лечения протозойных болезней, должны обладать максимальным паразитоцидным и минимальным органотропным действием. У мышей, получавших ципрофлоксацин и ампролиум, в третьей и пятой опытных группах, патологических изменений в исследуемых органах не установлено. У мышей, получавших ципрофлоксацин, на 5-е сутки после дачи препарата, ткань печени была с явлениями значительного венозного полнокровия и гемостаза. Дольчатость строения была слабо нарушена, гепатоциты очерчены плохо, с округлыми полиморфными центрально расположенными ядрами, с рыхлым сетчатым хроматином, встречаются двуядерные клетки. Наблюдали некроз единичных гепатоцитов со скоплением в этих участках макрофагов и лимфоцитов; прослеживаются очаги жировой дистрофии гепатоцитов, пролиферации и гипертрофии звездчатых ретикулоэндотелиоцитов (рис. 24).
В последующем (через 10-12 суток) ткань печени слабо набухшая, гепатоциты очерчены слабо, с округлыми полиморфными центрально расположенными ядрами, с рыхлым сетчатым хроматином, встречаются двуядерные клетки. Балочная система строения долек выражена слабо, просвет большинства центральных вен расширен, с явлениями слабого гемостаза.
На 16 — 20-е сутки после дачи препарата признаки венозной гиперемии выражены слабо. У некоторых животных в различных отделах долек находили мелкие скопления клеток содержащих кроме лимфоцитов и макрофагов эозипофильные лейкоциты. В мазках отпечатках, полученных из кусочков печени животных этой группы ооцист С. parvum не обнаружено (рис. 25). На 22 - 28-ые сутки дольчатость печени сохранена, междольковые перегородки выражены. В гепатоцитах много гликогена. На 30-е сутки изменения идентичны предыдущим, что свидетельствует об активизации защитных сил организма и его иммунологической перестройке, как ответной реакции на поступление ципрофлоксацина как антигена. У мышей, получавших ампролиум, иммуноморфологические изменения менее выражены. На 5-е сутки было выявлено, что в ткани печени явления значительного венозного полнокровия и гемостаза. Дольчатость строения нарушена, меж-дольковые перегородки прослеживаются только в проекции печеночных триад. Ткань печени резко набухшая, гепатоциты очерчены слабо. Отмечается клеточный и ядерный полиморфизм (рис. 26). Интенсивность окраски гепатоцитов и компактность хроматина различны. Цитоплазма клеток резко набухшая, с грубой зернистостью, множеством прозрачных вакуолей с явлениями выраженной гидропическои и геалиново-капельной дистрофии (рис. 27). На 8-е сутки отмечались выраженные признаки венозной гиперемии. У некоторых животных балки в центре были несколько истончены и отодвинуты друг от друга. Узелковые скопления клеток неболыни. Отмечалось наличие зернистой дистрофии гепатоцитов. На 10-е сутки после дачи препарата ткань печени набухшая, дольча-тость строения незначительно нарушена, так как междольковые перегородки прослеживаются в основном в проекции печеночных триад. В просвете желчных ходов и желчных капилляров незначительное скопление желчи. Просвет большинства центральных вен расширен, с явлениями гемостаза. В мазках -отпечатках полученных из кусочков печени животных этой группы найдены ооцисты С. parvum (рис. 29). На 12 - 16-е сутки в печени животных этой группы отмечено незначительное полнокровие сосудов, система балок правильного строения. Гепато-циты крупных размеров, много двуядерных, цитоплазма несколько разрыхлена.
В последующем, на 22 - 30-е сутки, изменения идентичны. Так как хи-миопрепараты при введении в организм животного стимулируют или угнетают развитие защитных сил. В нашем опыте мы установили, что под действием ампролиума подавляются защитные силы организма мышей.
Таким образом, у мышей обеих групп в печени выявлены изменения характерные для иммунологической перестройки при криптоспоридиозиой инвазии, а также следует рассматривать как явление, свидетельствующее об участии гепатоцитов в обезвреживании токсинов возбудителя и поступившего в организм препарата, так как иод его действием происходит постепенное восстановление структуры органа, когда у нелеченных животных ткань печени остается с явлениями выраженного полнокровия и гемостаза сосудов, множеством мелких геморраргий междольковых просветов, нарушением дольчатости строения с плохо различимыми гепатоцитами, выраженным ядерно-клеточным полиморфизмом, в проекции печеночных триад и междольковых пространств встречаются крупные инфильтрации из лимфоцитов, гистиоцитов и плазматических клеток.
Животных четвертой опытной группы, которые были заражены и получали ципрофлоксацин, цитоморфология различных зон коркового и мозгового вещества приближалось к контролю (рис. 30), но характерно расширение капилляров пучковой и сетчатой зон коркового вещества. При этом явления жировой дистрофии и атрофические изменения не обнаруживались, что свидетельствует о синтезе и выделении, прежде всего, альдостерона и стероидных гормонов, купирующих воспалительные процессы. У зараженных мышей, получавших ампролиум, капсула надпочечников была представлена более толстыми волокнами и фиброцитами с темными удлиненными волнистыми ядрами.
