Содержание к диссертации
Введение
1. Литературный обзор 7
1.1. Некоторые аспекты предполагаемого биогенеза дитерпеновых алкалоидов 8
1.2. О систематике дитерпеновых алкалоидов 10
1.3. Физические методы исследования дитерпеновых алкалоидов 13
1.3.1. Рентгеноструктурный анализ 14
1.3.2. ЯМР-спектроскопия 17
1.3.3. Масс-спектрометрия 21
1.4. Особенности химических трансформаций дитерпеновых алкалоидов 21
1.4.1. Реакции окисления 21
1.4.2. Реакции дезоксигенирования 28
1.4.3. Реакции метилирования и деметилирования 28
1.4.4. Реакции метиленирования и деметиленирования 30
1.4.5. Реакции ацилирования и дезацилирования 33
1.4.6. Перегруппировки дитерпеновых алкалоидов 36
2. Обсуждение результатов 38
2.1. Алкалоиды хохлатки прямой (Corydalis stricta Steph.) 38
2.2. Алкалоиды живокости губоцветной (Delphinium cheilanthum Fisch.)
и аконита вьющегося (Aconitum volubile Pall.) 39
2.3. Аконит бородатый {Aconitum barbatumPers.) как источник зонгорина 42
2.4. Z- и Е- оксимы зонгорина 43
2.5. Синтез производных элатина 46
2.6. Фармакологические свойства некоторых производных элатина 54
3. Экспериментальная химическая часть 58
3.1. Выделение и характеристики алкалоидов хохлатки прямой
(Corydalis stricta Steph.) 61
3.2. Выделение и характеристики алкалоидов живокости губоцветной (Delphinium cheilanthum Fisch.) и аконита вьющегося (Aconitum volubile Pall.)
3.3. Выделение и характеристики зонгорина
3.4. Смесь Z- иЕ- оксимов зонгорина
3.5. Синтез производных элатина
4. Экспериментальная фармакологическая часть
Выводы Список литературы
- ЯМР-спектроскопия
- Реакции метиленирования и деметиленирования
- Аконит бородатый {Aconitum barbatumPers.) как источник зонгорина
- Выделение и характеристики алкалоидов живокости губоцветной (Delphinium cheilanthum Fisch.) и аконита вьющегося (Aconitum volubile Pall.)
ЯМР-спектроскопия
Спектроскопия ЯМР в настоящее время является одним из наиболее информативных физико-химических методов исследования органических соединений.
Из спектров ЯМР Н получают следующую информацию: значения химических сдвигов атомов водорода; относительные интенсивности сигналов, пропорциональные числу однотипных атомов водорода; значения констант спин-спинового взаимодействия (КССВ).
Для определения взаимодействия атомов водорода применяют методы двойного резонанса и метод двумерной протон-протонной (2D Н-1!! COSY) корреляционной спектроскопии. Полученные данные дают информацию о структуре молекул.
Из спектра ЯМР 13С получают несколько иную информацию: значения химических сдвигов атомов углерода; значения КССВ С - Н (через одну, две и более связей). Для определения значений КССВ 13С - 1Н используют метод монорезонанса [26]. Для определения спин-спинового взаимодействия С - Н через одну связь и более используют методы гетероядерного двойного резонанса: 1) полной развязки ССВ ядер 13С и Н (широкополосное подавление взаимодействий в режиме "ВВ" или в режиме J-модуляции (JMOD)); 2) частичной развязки 13С - Н взаимодействий путем внерезонансного облучения протонов, так называемого "off- resonance" и другими методами. Для определения ССВ 13С - Н через одну связь и более используют также методы двумерной ЯМР 13С - 1Н корреляционной спектроскопии, так называемые 2D 13С - Н (COSY 125 Гц) для подавления дальних ССВ и 2D 13С - lR (COLOC 7-Ю Гц) - для подавления ближних ССВ.
В модификации спектров ЯМР 13С резонансные линии, показывающие спин-спиновое взаимодействие соседних С - С атомов (через одну связь) проявляются с интенсивностью на -10 раза ниже, чем линии, отражающие спин-спиновое взаимодействие С - Н, что і о і о связано с малой степенью вероятности наличия молекул с С - С соседними связями. Тем не менее современная приборная база (чувствительные спектрометры с накопительной спектральной системой), а также применение высококонцентрированных растворов образцов позволяют извлечь информацию о С - С взаимодействиях из так называемых спектров 2D INADEQUATE (Incredible Natural Abundance Double Quantum Transfer Experiment) [13, 27].
Анализ совокупности данных о значениях j КССВ С - 13С выявляет существенное различие этих значений для каждой пары смежных атомов углерода в зависимости от строения молекулы. Сопоставлением значений одинаковых констант J связанных между собой углеродных атомов устанавливают последовательность связывания углеродов в молекуле и окончательно полную структуру молекулы.
}Н ЯМР - спектроскопия ]Н ЯМР - спектроскопия является наиболее распространенным методом для решения некоторых структурных проблем в химии ДА [28]. Дж. Тсуда и Л. Марион положили начало систематическому изучению дитерпеновых алкалоидов этим методом [29]. Они установили взаимное положение ацетильной и бензоильной групп в аконитине 24, дельфинине 37 и в ряде других алкалоидов. Было обнаружено, что в случае, когда бензоильная группа имеет а-конфигурацию при С(14) в ЯМР Н спектре С(8) - ацетоксильная группа проявляется при 8-1.3, вместо обычного положения (5 2.0). В данном случае метил ацетоксильной группы попадает под влияние анизотропного поля бензольного кольца, что и вызывает смещение сигнала в сильное поле. Установлено, что сигнал протона при С(14) в аконифине 38 смещен на 0.44 м.д. в слабое поле по отношению к соответствующему сигналу в спектре аконитина 24 [29]. Это обусловлено дезэкранирующим влиянием С-10 гидроксильной группы на /?-С(14) протон. В таблице 1 [30] представлены химические сдвиги протонов различных функциональных групп Cig- ДА. Отнесения химических сдвигов сделаны на основе данных одномерной JH ЯМР - спектроскопии с экспериментами по спин-спиновой развязке, двумерной - H-COSY И Н-13С HETCOR.
Информативным методом изучения структуры ДА является 13С-ЯМР-спектроскопия. Исследованию 13С-ЯМР-спектроскопии ДА предшествовали фундаментальные исследования в ряду насыщенных азотсодержащих гетероциклических систем, в результате которых был накоплен значительный объем информации об эффектах замещения и аддитивности.
В области химии ДА метод 13С-ЯМР-спектроскопии впервые применен А. Джонсом и М. Бенном [31,32] установивших структуру двух новых алкалоидов. Позднее, некоторые отнесения, сделанные А. Джонсом и М. Бенном для каммаконитина, акомонина и делькозина (илиензина), были исправлены В. Пелетье [33, 34].
В. Пелетье с сотрудниками проводят систематическое изучение ЯМР 13С спектров ДА и их производных, что позволило им составить 13С ЯМР банк данных множества алкалоидов. На базе этого банка созданы компьютерные программы, способные предсказать структуры известных и новых ДА исходя из их спектров ЯМР С [35]. Ниже указаны общие пределы изменения химических сдвигов углеродных атомов скелета Сід-ДА [30].
Сигналы четвертичных атомов углерода С(4), С(8) и С(11) проявляются в виде синглетов с различными пределами химических сдвигов в зависимости от характера заместителей. Синглет между 32.0 и 35.0 м.д. указывает на присутствие метильной группы при С(4). Группы -СН2ОН, -СНгОМе и -СНгОАс при С(4) легко обнаруживаются как синглеты в пределах между 37.0 и 41.0 м.д. Присутствие различных кислородных группировок при С(8) доказывается синглетом между 72.5 и 92.5 м.д. Синглет при С(11) в зависимости от характера соседствующих с ним групп проявляется в виде трех различных пределов химических сдвигов.Установив эти пределы, можно определить присутствие различных функциональных групп при С(1) и С(10). Сигналы метановых углеродных атомов можно разделить на две группы: слабополевые (90 - 70 м.д.) и сильнополевые (50 - 40 м.д.). Слабополевые метановые группы у окси-замещенных метановых углеродных атомов С(3), С(6), С(14), С(15), С(16) имеют относительно постоянные химические сдвиги. Отнесение высокополевых метановых групп наиболее затруднительны ввиду близости сигналов. Метальные углеродные атомы присутствуют в молекулах ДА в следующих видах: О-Ме, N-Ме, N-СНг-Ме, -CR2-Me и СО-Ме. Химические сдвиги вышеуказанных углеродных атомов имеют достаточно характерные пределы, чтобы сделать их строгое отнесение.
Масс-спектрометрия играет важную роль при установлении элементного состава и строения органических веществ [36-39]. Современные масс-спектрометры высокого разрешения позволяют по экспериментально найденному точному значению молекулярной массы соединения подобрать возможную эмпирическую формулу. С учетом знания о структуре и составе исходных соединений, используемых для получения исследуемого образца, можно достоверно судить о брутто-формуле данного соединения [40]. В литературе существует обстоятельный обзор [41] по изучению закономерностей образования продуктов фрагментации ДА. В связи с этим нами не рассматриваются вопросы, касающиеся подробностей установления строения ДА с помощью метода масс-спектрометрии.
Реакции метиленирования и деметиленирования
Растения рода хохлатки (Coiydalis) семейства дымянковых (Fumariaceae) богаты протобербериновыми алкалоидами [90]. Они применяются в традиционной монгольской медицине в качестве стимулирующего, ранозаживляющего средства [91], в китайской медицине - в качестве анальгетика и антисептика [92], в индийской и исламской медицине - для лечения глазных болезней, в качестве антисептика, релаксанта мышц матки и кровеостанавливающего средства [93].
В Монголии произрастает 5 видов хохлатки [94]. Ранее из надземной части хохлатки прямой (С. stricta Steph), собранной в Монголии в период цветения, выделены следующие алкалоиды: стилопин, скулерин, изокорипальмин, хайлантифолин и др. [95]. Нами использованы в качестве объекта исследования сухие корни хохлатки прямой, собранные в сентябре 1997 г. в местности Цэцэг Монгольского Алтая. Из суммы алкалоидов данного растения удалось выделить протобербериновые основания (-)-(S)-корипальмин 107, (-)-(8)-изокорипальмин 108, (-)-(8)-скулерин 109 и (-)-(S)-хайлантифолин 110 [96,97]. Как уже отмечалось во введении, основополагающее вещество протобербериновых алкалоидов - береберин проявляет широкий спектр биологической активности, в том числе противовирусную активность, что делает возможным его применение при лечении вирусных гепатитов [98]. В связи с этим образцы выделенных нами оснований переданы в лабораторию вирусологии Монгольского медицинского университета (ММУ) для испытаний противовирусной активности.
Растения родов Delphinium (живокость, шпорник) и Aconitum (аконит, борец) семейства Ranunculaceae (лютиковых) являются основными источниками ДА, обладающих высокой физиологической активностью и сложной химической структурой. В Монголии произрастает 7 видов живокости и 11 видов аконита [94]. В популярной в Монголии индо-тибетской медицине и самобытной народной медицине применяют растения вышеуказанных родов для получения лечебных сборов, используемых в борьбе с острыми и хроническими инфекционными болезнями, такими как дизентерия, грипп, ящур, фурункулез и др.
С середины 80-тых годов в лаборатории химии природных соединений ИХХТ МАН начато изучение ДА, выделенных из растений флоры Монголии. Наиболее полно изучен алкалоидный состав надземной части Aconitum barbatum Pers., A. Altaicum Steinb.n A. Turczaninovii Worosch. Из этих растений выделены 23 ДА, для которых установлено химическое строение [99-104].
Настоящая работа является продолжением этих исследований. Нами исследованы надземные части растений живокости губоцветной (D. cheilanthum Fisch.) и аконита вьющегося (A. volubile Pall.), собранные в августе 1997 г. в Центральной Монголии в период цветения.
Хроматографией суммы алкалоидов надземной части живокости губоцветной (D. cheilanthum Fisch.) на колонке с АЬОз нами выделено 5 оснований [105-108]. На основе сравнения спектральных данных и физических констант с литературными, выделенные основания идентифицированы с дитерпеновыми алкалоидами метилликаконитином 35, мезаконитином 111, делькозином 112, дельсолином 113, дельталином 114. Из суммы алкалоидов надземной части аконита вьющегося (A. volubile Pall.) выделены и идентифицированы с известными дитерпеновые алкалоиды сенбузин А 115, неолин 116, аконитин 24, 12-эпидегидронапеллин 117, зонгорин 48, 12-эпинапеллин 118 и альтаконитин 119 [109]. Спектральные данные и физические константы выделенных алкалоидов см. в Экспериментальной части. Образцы ДА, вьщеленных из живокости губоцветной и аконита вьющегося, переданы в лабораторию фармакологии ММУ для испытаний миорелаксантной, антиаритмической, инсектицидной и противовоспалительной активности.
Нами предложен фитоагент для лечения ревматизма "Дельдинит", содержащий экстракт надземной части живокости губоцветной [ПО]. Состав, мае. %: эфирное масло багульника болотного (Ledum palustre L.) - 2; сгущенный спиртовый экстракт живокости губоцветной {Delphinium cheilanthum Fisch), содержащий 0,5 % суммы алкалоидов - 20; конский жир - 78. Ме0 оме
Экстракт аконита вьющегося, содержащего, как указано выше, аритмогены аконитин 24, альтаконитин 120 и ряд других алкалоидов, послужил основой для получения инсектицидного фитоагента "Хорсит" [111]. Для уничтожения насекомых-вредителей бумагу или ткань рекомендуется пропитывать следующим составом, объем. %: 10 %-ный спиртовый экстракт багульника болотного {Ledum palustre L.) - 10; 10 %-ный спиртовый экстракт стеллеры карликовой (Stellera chamaejasme L.) - 5; 10 %-ный спиртовый экстракт аконита вьющегося (Aconitum volubile Pall), содержащий 0,6 % суммы алкалоидов - 85. "ОМе
Весьма ценным ДА с каурановым скелетом является зонгорин 48 [112]. Зонгорин 48 оказывает стимулирующее действие на центральную нервную систему, проявляет свойства характерные для типичных антидепрессантов [113], а также выраженное антиаритмическое действие на различных экспериментальных моделях аритмии [114]. При восстановлении с помощью NaBHU зонгорин 48 образует смесь напеллина 20 и 12- эпинапеллина 118 [112].
Бензоилирование напеллина 20 приводит к его 1,12,15-трибензоату, гидролиз которого дает ценный 1-бензоилнапеллин. Гидрохлорид последнего обладает выраженным местно-анестезирующим действием, превосходящим по активности и длительности действия новокаинамид и не уступающим кокаину [115]. Названный гидрохлорид можно использовать также в качестве антидота при случайных отравлениях людей и животных аконитоподобными алкалоидами [115-117]. Вышеуказанные факты повышают значимость исследований, направленных на изучение структуры зонгорина 48 и его производных.
Ранее из сухой надземной части аконита бородатого (Aconitum barbatum Pers.) (окрестности Улан-Батора, ранний период вегетации), выделена сумма алкалоидов (вьпюд 1.5 %), из которой хроматографией выделен зонгорин 48 (14 % от суммы) [ 118,119]. Из сухих корней этого же вида аконита сибирского происхождения (Кемеровская обл., период вегетации не указан) выделена сумма алкалоидов (выход 1.6 %), из которой хроматографией выделен зонгорин 48 наряду с ликоктонином 25, делькозином 113 и дельсолином 114 [120].
В ЛЛХ и БАС НИОХ СО РАН нами из сухих корней аконита бородатого алтайского происхождения (сбор июля) выделена сумма алкалоидов с выходом 1.76 %, обработка которой эфиром способом [121] дала кристаллический зонгорин 48 (36 % от суммы). Последний идентифицирован сравнением физических констант (т. пл. и удельного вращения) и спектральных данных (ЯМР Ни С) с приведенными в литературе [122-125]. Таким образом, и сибирские и монгольские популяции аконита бородатого могут служить источником ценного соединения зонгорина 48.
Аконит бородатый {Aconitum barbatumPers.) как источник зонгорина
Использованы корни хохлатки прямой, собранные в сентябре 1997 г. в местности Цэцэг Монгольского Алтая.
Выделение алкалоидов. Воздушно-сухие измельченные корни (3 кг) смачивали 25 %-ным раствором аммиака (3.3 л). Вьщержанную в течение 24 ч смесь экстрагировали хлороформом. Экстракт сконцентрировали до объема 1 л отгонкой растворителя в вакууме. Сумму оснований экстрагировали 5 %-ной серной кислотой (4x100 мл). Кислотный раствор подщелочили 25 %-ным раствором аммиака до рН 10 и смесь исчерпывающе экстрагировали эфиром. Экстракт высушили безводным сульфатом натрия. После отгонки получили 3.5 г суммы алкалоидов (0.12 %-ов от массы сухого растения). Раствор полученной суммы в 5 мл хлороформа разделяли на колонке с окисью алюминия (90 г). Для фракционного градиентного элюирования алкалоидов применяли бензол и смесь бензол-спирт в различных соотношениях. Гомогенность фракций контролировали с помощью ТСХ (силуфол), ср. [167]. Применяли системы элюентов: циклогексан - диэтиламин (9:1), циклогексан -СНСІз - диэтиламин (7:2:1) и (6:3:1). Пятна алкалоидов обнаруживали проявлением парами иода. Индивидуальные алкалоиды выделяли кристаллизацией или рехроматографией с последующей перекристаллизацией. Выделены алкалоиды (-)-(8)-корипальмин 107 (0.28 г), (-)-(S)- изокорипальмин 108 (0.35 г), (-)-(8)-скулерин 109 (0.35 г) и (-)-(8)-хайлантифолин 110 (0.18 г). Выходы соединений 107-110 составляют соответственно 8, 10, 10 и 5 %-ов от суммы алкалоидов. Характеристики полученных образцов (-)-(8)-Корипальмин 107, т. пл. 234-236 С (СНС13-МеОН) (капилляр, запаянный при 3 Тогг). Ср. лит. [168]: т. пл. 234-236 С (СНС13-МеОН). Данные спектров ЯМР !Н и 13С идентичны литературным, описанным для тетрагидройатрорризина (R-, S- корипальмина) [169]. [а] -281 (с 0.8, СНС13), лит. [168]: [а] 5 -284±3 (с 0.58, СНС13). (-)-(8)-Изокорипальмин 108, т. пл. 239-241 С (Me2CO-Et20). Ср. лит. [168]: т. пл. 238-241 С (Me2CO-Et20). Данные спектров ЯМР Ни 13С идентичны литературным [170, 171]. [а] -295 (с 1, СНСІз). Ср. лит. [168]: [а] 0-298о±5о (с 0.53, СНС13).
По данным РСА (-)-(8)-изокорипальмин в кристаллической форме имеет транс-сочлененные кольца В и С, то есть атом 13а-Н находится в транс-положении к неподеленной электронной nape sp -гибридного атома азота [172].
(-)-(8)-Скулерин 109, т. пл. 197-198 С (Et20). Ср. лит. [167]: 197-198 С (Et20). Данные спектров ЯМР Н и 13С идентичны литературным [173]. [сс]ц -320 (с 1, СНС13). Ср. лит. [ 167]: [а] -315 (СНС13).
(-)-(8)-Хайлантифолин 110, т. пл. 174-176 С (МеОН). Ср. лит. [174]: т.пл. 174С (МеОН). Данные спектров ИК и ЯМР Н [175], а также С [176] идентичны литературным, описанным для К,8-хайлантифолина. [а] -315 (с 1, МеОН). Ср. лит. [174]: [а]р0-311 (с 0.11, МеОН). Выделение и характеристики алкалоидов живокости губоцветной {Delphinium cheilanthum Fisch.) и аконита вьющегося {Aconitum volubile Pall.)
Нами исследованы надземные части растений живокости губоцветной ( . cheilanthum Fisch.) и аконита вьющегося (A. volubile Pall.), собранные в Центральной Монголии (долина реки Тэрэлж близ г. Улан-Батора) в августе 1997 г. в период цветения.
Выделение алкалоидов. Измельченные сухие надземные части (4 кг) смачивали 5 % -ным раствором карбоната натрия (4.4 л). Выдержанную в течение 24 ч смесь экстрагировали хлороформом. Экстракт сконцентрировали до объема 0.5 л отгонкой растворителя в вакууме. Сумму оснований экстрагировали 5 %-ной серной кислотой (4x100 мл). Кислотный раствор подщелочили содой до рН 10 и смесь исчерпывающе экстрагировали хлороформом. Экстракт высушили безводным сульфатом натрия. После отгонки растворителя из экстракта живокости губоцветной получили 5.4 г суммы алкалоидов (0.14 % от массы сухого растения), из экстракта аконита вьющегося - 8.5 г суммы алкалоидов (0.4 % от массы сухого растения).
30 %-ные растворы полученных сумм алкалоидов в СНСІз разделяли на колонке с АІ2О3 (массовое соотношение сумма алкалоидов / АЬОз равно 1:30). Фракционное градиентное элюирование алкалоидов проводили гексаном, смесью гексан-хлороформ, хлороформом, смесью хлороформ - метанол. Гомогенность фракций контролировали с помощью ТСХ (АЬОз), ср. [84]. Применяли системы элюентов: 2-пропанол - Et20 (1:9) и (1:1) и ацетон - БігО (1:1). Индивидуальные алкалоиды выделяли кристаллизацией или рехроматографией с последующей перекристаллизацией. Из живокости губоцветной выделены метилликаконитин 35, мезаконитин 111, делькозин 112, дельсолин 113 и дельталин 114 с выходами соединений 35, 111-114, составляющими 15, 5, 15, 12 и 10 %-тов соответственно от суммы алкалоидов надземной части.
Из аконита вьющегося выделили сенбузин А 115, неолин 116, аконитин 24, 12-эпидегидронапеллин 117, зонгорин 48, 12-эпинапелин 118 и альтаконитин 119 с выходами соединений 115, 116, 24, 117, 48,118 и 119 , составляющими 5, 8, 10, 10, 15, 12 и 10 %-тов соответственно от суммы алкалоидов.
Выделение и характеристики алкалоидов живокости губоцветной (Delphinium cheilanthum Fisch.) и аконита вьющегося (Aconitum volubile Pall.)
Антраноилэлатидин [18-(2-аминобензоилокси)-7,8-метилендиокси-1ос,бр,14а, 1бр-тетраметокси-20-этилаконитан] (146). Смесь 2.53 г (5.27 ммоля) элатидина 42, 0.119 г (0.975 ммоля) DMAP, 2.13 г (14.5 ммоля ) изатойного ангидрида и 6.4 мл DMF нагрели до у 100 С при перемешивании. Полученный раствор выдержали при этой температуре в течение 9 ч. К остывшей реакционной смеси добавили при перемешивании 30 мл насыщенного раствора NaCl. Смесь экстрагировали 3 раза по 15 мл эфира. Из экстракта удалили растворитель, остаток высушили при 50 С (3 Торр). Полученный аморфный порошок растворили в 10 мл /ире/и.бутилметилового эфира и подвергли препаративной ТСХ на АЬОз (ТУ 6-09-3916-75, Россия, размер частиц 50-250 мкм, II степень активности), содержащем -1 люминофор К-35 (1 % от массы оксида). Собрали полосу сорбента с Rf 0.54, люминесцирующего голубым светом при УФ-облучении. Целевой продукт элюировали /ирет.бутилметиловым эфиром. После удаления растворителя из элюата и высушивания остатка при 50 С (3 Торр) получили 2.99 г (95 %) атраноилэлатидина 146 в виде аморфного порошка, [ос]20578 +13.3 (с 4.2, СНзОН). Масс-спектр высокого разрешения, m/z: 598.3296 [М]+. C33H46N2O8. Вычислено: М 598.3254. Спектр ЯМР !Н (5, м.д., J/Гц): 1.04 (т, ЗН, NCH2CH3, J = 7); 3.24 (с, ЗН), 3.31 (с, 6Н) и 3,40 (с, ЗН) (1-, 6-, 14- и 16-ОСН3); 4.07 (с, 2Н, СН-18); 5.04 (с, 2Н, ОСН20); 5.70 (широкий сигнал, 2Н, NH2); 6.57-6.66 (м, 2Н, СН-3\5 ); 7.24 (т. д, 1Н, J = 8 и 1.5, СН-4 ) и 7.80 (д. д, 1Н, J = 8 и 1.5). ИК-спектр (KBr), V/CM 1: 752, 963, 1091, 1161,1196,1245,1295, 1385,1456,1487, 1591, 1619,1690 (С=0), 2818, 2878, 2933 и 2973. УФ-спектр (ЕЮН), 1тах/нм (lg є): 220 (4.32), 249 (3.84) и 341 (3.71). Хлористоводородная соль (146-2НС1), т.пл. 153-155 С (с разл.). Найдено, %: О (ионный) 10.85; 10.82. Css eNiOg 2 НС1. Вычислено, %: С1 10.55. Данные спектров ЯМР 13С соединения 146, его гидрохлорида 146-2НС1, а также соединений 147-150 и гидрохлоридов 147-НС1 и 150 4НС1) приведены в табл. 10.
Бензоилэлатидин (18-бензоилокси-7,8-метилендиокси-1а,63,14а, 16р-тетра метокси-20-этилаконитан) (147). К раствору 1.22 г (8.64 ммоля) бензоилхлорида в 12.8 мл абс. пиридина добавили при перемешивании 3.60 г (7.5 ммоля) элатидина. Смесь выдержали в течение 16 ч при 20 С, затем добавили по каплям при перемешивании 39 мл воды и 30 мл СНСІз. Хлороформный слой отделили, водный - экстрагировали 2 раза по 10 мл СНСІз. После удаления растворителя из объединенных экстрактов в вакууме остаток высушили при 40 С (3 Торр). Полученное вязкое масло растворили в 15 мл СНСІз, раствор нанесли на 51 г АЬОз (II степени активности по Брокману). Продукт элюировали хлороформом. После удаления хлороформа остаток высушили при 40 С (20 Торр) и экстрагировали 30 мл Et20. После удаления растворителя получили 3.55 г (88 %) целевого продукта в виде вязкого масла, [а]2578 +10.2 (с 4.70, СНС13). Масс-спектр высокого разрешения, m/z: 583.3143. СззН45Ж 8. Вычислено: М 583.3144. Спектр ЯМР 1И (5, м.д., J/Гц): 1.03 (т, ЗН, NCH2CH3, J = 7); 3.23 (с, ЗН), 3.36 (с, 6Н) и 3.39 (все с по ЗН, 1-, 6-, 14- и 16-ОСН3); 5.03 (с, 2Н, ОСН20); 7.41 ( м, 2Н, 3\5 -H); 7.50 (м, Ш, 4 -Н); 7.98 (м, 2Н, 2\Є-И). ИК-спектр (2 %-ный раствор в СС14, толщина слоя 0.1 мм), V/CM 1: 963, 1027, 1095, 1197, 1271, 1384, 1452, 1725 (С=0), 2820, 2927. УФ-спектр (ЕЮН), XmJmi (lg s): 223 (4.34), 252 (4.08) и 310 (3.65). Хлористоводородная соль (147-НС1), т.пл. 205-210 С (с разл.). Найдено, %: С1 (ионный) 5.90; 5.76. С3зН45Ж)8 НС1. Вычислено, %: С1 5.72.
Ацетилантраноилэлатидин[18-(2-ацетиламинобензоилокси)-7,8-метилен-диокси-1а,бр,14а,1бр-тетраметокси-20-этилаконитан] (148). Смесь 0.043 г (0.072 ммоля) соединения 146 и 0.028 г (0.275 ммоля) Ас20 нагревали при 100 С в течение 4 ч. Затем избыток Ас20 и образовавшуюся уксусную кислоту удалили в вакууме. Остаток высушили при 100 С (3 Торр), получили 0.044 г (95 %) соединения 148 в виде аморфного порошка. [а]2578 +10.8 (с 1.5, МеОН). Масс-спектр высокого разрешения, m/z: 640.3353 [М]+. C35H48N209. Вычислено: М 640.3360. Спектр ЯМР JH (5, м.д., J/Гц): 1.04 (т, ЗН, NCH2CHs, J = 7); 2.19 (с, ЗН, NHCOCHj); 3.28, 3.34, 3.35 и 3.40 (все с по ЗН, 1-, 6-, 14- и 16-ОСН3); 4.11 (с, 2Н, СН-18); 5.04 (с, 2Н, ОСН20); 7.06 ( т, Ш, J = 7.5, СН-5 ); 7.51 (т. д, 1Н, J = 8.5 и 1.5, СН-4 ); 7.94 (д. д, 1Н, J = 8.5 и 1.5, СН-6); 8.70 (д, Ш, J = 8.5, СН-3 ) и 10.96 (уширенный с, 1Н, NH). ИК-спектр (КВг), V/CM"1: 758, 1089, 1123, 1164, 1238, 1262, 1297, 1449, 1528, 1590, 1606, 1688 (С=0), 2889, 2931 и 2973. УФ-спектр (EtOH), WHM (lg є): 223 (4.34), 252 (4.08) и 310 (3.65). N,N,- мc-[18E-(7,8-Meтилeндиoкcи-la,6p,14a,16p-тeтpaмeтoкcи-20-этил-аконитилиден)-1,6-гександиамин (149). Раствор смеси 0.056 г (0.50 ммоля) 1,6-гександиамина и 0.478 г (1.00 ммоль) элатидаля 44 в 1.2 мл СНС13 кипятили с обратным холодильником в течение 0.5 ч, затем растворитель удалили в вакууме. К остатку прибавили 2 мл СНС13, следы влаги удалили перегонкой азеотропа. Кубовый остаток высушили при 50 С (3 Торр), получили 0.492 г (95 %) соединения 149 в виде вязкого масла. Найдено, % : С 67.36, 67.25; Н 8.61, 8.75; N 5.10, 5.10. CsgH On. Вычислено, % : С 67.27; Н 8.78; N 5.41. Спектр ЯМР Н (8, м.д., J/Гц): 1.04 (т, ЗН, NCH2CHj, J = 7); 3.18, 3.24, 3.31 и 3.39 (все с по ЗН, 1-, 6-, 14- и 16-ОСНз); 4.98 и 5.01 (оба с, по 1Н, ОСН20); 7.39 (с, 1Н, СН-18)., ИК-спектр (КВт), V/CM"1: 752, 961, 1037, 1091, 1197, 1454, 1666 (C=N), 2818 и 2983. №-#ис-(18-Элатидил)-1,6-гександиамин - ис-[18-(7,8-метилендиокси 1а,бр,14а,1бр-тетраметокси-20-этил-аконитил]-1,6-гександиамин} (150). К раствору 0.414 г (0.40 ммоля) соединения 149 в 10.0 мл МеОН порциями при перемешивании прибавили 0.400 г (11.2 ммоля) NaBH4. Спустя 1 ч прилили 14.8 мл НгО, затем смесь экстрагировали СНСІз (3x10 мл). Из экстракта удалили растворитель, остаток высушили при 50 С (3 Торр), получили 0.333 г (80 %) соединения 150 в виде вязкого масла. Найдено, % : С 66.77, 66.90; Н 8.95, 8.90; N 5.11, 5.15. C58H94N4O12. Вычислено, % : С 67.01; Н 9.13; N 5.39. Спектр ЯМР !Н (5, м.д., J/Гц): 0.96 (т, ЗН, NCH2CH3, J = 7); 3.17, 3.25, 3.27 и 3.34 (все с по ЗН, 1-, 6-, 14- и 16-ОСНз); 4.97 и 4.98 (оба с, по 1Н, ОСН20). ИК-спектр (КВг), V/CM"1: 964, 990, 1009, 1036, 1089, 1162, 1198, 1385, 1450, 1468, 2820, 2871, 2932 и 2965. Хлористоводородная соль (150-4НС1), т.пл 195-200 С (с разл.). Найдено, %: О (ионный) 12.10; 11.86. C58H94N4O12 4НС1. Вычислено, %: С1 11.96.
