Введение к работе
Актуальность проблемы
За последние года достигнуты значительные успехи в изучении [ологии опухолевых клеток кроветворной и лимфатической системы, гот прогресс стал возможным благодаря приманених), наряду о клас-[ческими ьюрфоцитохимическими, таких методов исследования,как (мунодиагносгнка, цитогенетика и клонирование в подуяидных ере-їх.
На основании морфоцптохишгчебких данных бнли выделены и оха-«теризованы типы бласгов и разработаны классификации острых ійкозов (Ю.И.Лорие, 1974; А.И.Воробьев, И.ЛЛертков, М.Д.Брилли-іт, 1976; ФАБ-класовфикация, 1976 г.) н тедатосарком (Н.А.Проба-іва, 1982; классификация ВОЗ, 1976 г.). Применение их в практичной гематологии способствовало значптельноиу повышении еффек-шностп льченпя больных.
Однако рутинные метода на всегда позволяли охарактеризовать (ухолевый субстрат. В части случаев клетки оставались неиденти-щированяыми. Кроив того не бшш решены вопросы, связанные о дв$-іренциальной диагностикой лейкозов а гэиатосарком в стадна яей-«шзации. Разработка современных программ терапии требует четкой рактериотшес бластннх элементов,как для диагностики, гак п для югноза заболевания.
Использование новых подходов к оценке особенностей опухолево-
> субстрата при гемоблаогозах способствовало существенному рзс-
ренпв современных двагаостпчеекпх Еозиогноотей. Применение ич-
кологнчеокюс методов позволило определить гястогенеткческую при-
длегность и степень зрелости бласгов в большшетве олучаев ге-
бластозов, выявило фепогшшческую гетерогенность клеток опухо-
вой популяции (А.Ю.Барышшсов, 1984; Janoasi , 1981). На
нованип питогонетических данных были установлены аакономернос-нзменепкя кариотшга лейкозннх клегок в зависимоога от вариан-геиобластоза п типа бластов (Е.В.Фяейдаап, 1775$ Bioonfeid, 60; Rylejr t 1980).
Культивирование в полужидких средах позволило выявить разяи-л в клоноганной способности бластов шолоидного п линфоидного окоходдйния (Б.В.Афаяаоьев, 1983; Metcalf" , 1974; По ore 81).
_ 4 -
Однако,в настоящее время комплексное изучение опухолевых эл центов проводится, как правило, при каком-либо одной из гемоблаї товов. Практически не встречаются работ, в которых бы осуществи ся сравнительный анализ особенностей бластяых элементов одноврег но при острых лиырэбластша и нелщфобластных лейкозах (0ІД и 01 хроническом ыаалолейкове в период бластного криза (ЕК XUI) н леі ішзации геїшїосаркоіш (ГСА). В то ае вредя, проведение подобных следований позволило бы подучить целостное представление об ооо< ноотях клеток при неопластическоа порагенли гєаопоБтнческсй тш и установить, какие ия выявленных закономерностей являются общи» для всех геыобластозов, а какие характерны только для одного из вариантов заболевания.
Сопоставление результатов всследораяня функциональных пока** тедей бластных влеиентов с их иорфоцитохЕшческой характеристик,!, представляет значительный интерес, т.к. способствует расшрешш вошохаюотей диагностики в дифференциальной диагностики гедоолас тозов, позволяет выявить отличительные особенности бластов, схо; них по морфологический показателям.
Осуществление подобной работы является актуальный, пооколькз в современной онкогематологии подхода к терапии больных решающа образом вависят от характера опухолевого поранения.
Диссертационная работа была проведена в соответствии с плане НИР НИИ клинической онкологии ВОЩ АМН СССР п1!орфо-функционалыи и иммунологические особенности бластных клеток при геыобластоэаз й Гос.регистрации 01.85.0.078777.
Целью исследования явилось изучение гистогенетичвекой приро; Е уровня ДЕфференцирозкп бластных клэюк болышх различными гене бластозаш для определения общих закономерностей, характерных ди всех вариантов заболевания, и особенностей, специфичных только ; лейкозов или геиатосар^ом с лейкемиЕацией.
Основные задачи исследования:
-
Разработать унмфЕцированнне иорфоцитохныичеокие критерии для оценки особенностей оластных клеток и с их помощью выделить типы бласгов при различных гемобластозах.
-
Определить иммунологические, кульгуральвые и цигогенетич* кое свойства различных типов бластных влеиентов.
-
Охарактеризовать различия в патогенетической природе и
пени зрелооти клеток опухолевых субстратов при острых лейкозах, хронического инелолейкоза г. лейкемизации ГСА.
-
Установить прогностическое значение выделенных типов блао-пра отдельных вариантах генобластозов.
-
Разработать рабочую классификационную схему типов опухоло-злеиентов, общую для острых лейкозов, БК ХЩ и ГСА в стадии
кемнзации на основании иорфо-функцпональных особенностей бласт-клеток.
Основные положения, выдвигаемые на запилу;
1. Диагностика гемобластозов должна осуществляться на основа-
унифицированной комплексной характеристики свойств блаотных
ментов, включавдей морфоцитохинические, иммунологические, цито-етическне и культуральные данные.
2. Наиболее ранними миелоидными елементами при всех гемоблас-
ах являются шлодпфференщгровашше ииелобласгы, характвризуэ-
іоя наличии доффувно располояенного ШИК-полозштельиого вещеот-
фенотнпом гранулоцптов п гранулоплтов-иакрофагов и отоутотвя-остальных признаков ииелоидной принадлеаностн (зернистости, юксидазы, хлорацетат зотеразн, несдецлфичеокой оотэразы, опс-іностп к патологическому росту в культура),
3. В бдаспшх клетках гранулоцитарюго ряда опредоляетоя вз-
лпюсть иедду степенью их морфологической зрелооти а онзишшн
ітусом, фенотипом, карнотшом и поведением в культуре. По «еро
іленля признаков дифференцпровкп активность специфических фер-
iTOB нарастает, экспрессия антигенов снигавтся, способность к
зту в агаре повышается. Фунгадашальнда особенности моноблаотов
связаны с этапом их дифференцировки.
4. лямфобластн при ОЛЯ н лиифоидном БК ХШ, как правило, пио-
фввотпп ранних В-предшественников, а при лейкемизацш ЛСА -
здвпх В-фори. Т-ди?лфобласты разной степени зрелоотз опредедявт-с одинаковой частотой при ОМ и лейкедазацпи IGA.
-
Сиешанный фенотип блаотных плеток обнаруживается пра всех аобластозах, паиболее часто при БК ХШ.
-
При ОМЛ прогноз заболевания коррелирует о субтипоц блас-в. Наличие в клетках признаков созревания , патологического ота в культуре, повышение числа граяулоцитов в костном юаго лее 6# являются благоприятными прогаостичеоквма признаками тения болезни.
7. Наличие зернистости в дим$областах является неблагоприятный прогностическим признаком и при 0ЛП,и при лейкеынзации ЛСА.
Научная новизна
В работе впервые на большой шгериале проведено сравнительна комплексное исследование иорфофігнкционадьних особенностей бдасг-ных клеток при различных гемоблаогозах: острой лейкоз з, ШШ и ГСА в огадЕЗ лэнкеиизациз.
Показано, что уровень дпффзренцировки опухолевых клеток существенно различается при лейкозах и гештооаркоиах. Наиболее ра нее поражение определяется при Ш ШЛ.
Установлены закономерные изменения морфоцитохшическпх, вицу нологичэокпх, нптогенегнческих и культурадышх параметров клеток
В ЗаВДСЕКООТИ ОТ СТепеНИ ИХ даЗфервПЦарОВКИ, Специфичные ДЛЯ КаД
кого варианта гемобластоза.
Охарактеризованы типы ранних лейкозных клеток: бяастов со сметанным феноіипои и калодЕфференцированных шедобдастов, обни-ругенше при всех ге?іоблаото8ах.
Определены особенности лиьфэбластов с зернистостью е показано их неблагопри гное значение для прогноза при лгафоблаотных ге шбластозах (ОЛЯ и ЛС&.).
Научно-дтактическое значение. Изучение биологических своист блаотных элзментов расширяет наше пиннгание патогенетических основ геыобластозов, выявляет завпсишоти ыааду гистогенетнческой природой клетки, степенью ее дпфферендцровки, стіюениеи генетического аппарата к клиническими проявлениями заболевания. Сравне нив особенностей клеток опухолевых субстратов при различных гене бластозах позволяет, с одной счоровы, выявить специфичность отдельных показателей бдастов для кагдого варианта заболевания к, о другой, установить признаки, общие для разных неопластпчоеккх порааений окетемы гемопозза.
Разработанная рабочая классЕфккрционная охєіа шдеет больгоо практическое значение для уточнения оубварЕантов острых лейкозов БК ХМД ж ГСА ? стадии лейкешаащш. Она позволяет прогнозировать особенности клинического течения и результаты терапнн этих забол ванни.
УвифицЕроганвдЗ подход к оценке блаотных клеток дает вокдох-нооть проводить дивранциальную диагностику различных гвиоблао-
юв со сходными морфологичеокша особеьвосгяш опухолевого оуб-ита.
Полученные данные необходимы для разработка п применения но-с адекватных программ лечения больных гемобластозаш.
Представленная рабочая oxeia типов бластнкх плеток и вариан-) гемобластозов может быть использована в практической деятель-!тп гематологических лабораторий в специализированных онкологп-жпх стационарах практического здравоохранения.
Внедрение в практику
Метод комплексного всследования бластных клеток, базирущий-на торфоцитохимической характеристике элементов о попользова-!М иммунологического, цитогенетического п культурального подхо-I, внедрен в практику клтшко-дЕагноогической лаборатории и гэ-хыгогического отделения НИИ клинической онкологии БОНД ШІЇ СССР, і примене-гие дает возможность разрабатывать и изучать зффзктнв-!ть различных програш терапия больных геїдобластозамя в завиоп-!тн от характерпсгики опухолевых элементов.
Разработан нетод морфологического исследования (фиксирования жраскл) препаратов агаровых культур клеток крови и костного іга, позволяющий оценить морфологический состав гранулоцптар-: колоний и класторов и количество г.якрофагов. Получено удосто-юппе на рационализаторокоа предлогение Д 519 от 24 mm 1982г. >т метод внедрен в практику в БОНД АШ СССР, в ВШ гематология [ореливания крови г.Лешшграда, НИИ геиатологип д переливания »вп г.Кирова, Всесовзного тавтологического центра г.Мооквы, UI лейкозологип г.Рпгя, НИИ криобиология г.Харькова.
Модифицирован пероксидазо-антпперокспдазинй метод (ПАП) опро-іепия пачшологзчоского фенотипа клеток па газках кровп п коот-<о иозга (Удостоверение о рационализаторской продаозешш 162 от 19 пюші I98S г.). Этот шгод внедрен в практику в ВОНЦ [ СССР, НИИ педиатрии АМН СССР г.Иосквы.
Материалы были апробированы на; Пленуме правления Воесоюзяо-научного общества врачей-лаборантов в г .Ленинграде в 1972 г.,
-
Всесоюзной съезде врачей-лаборантов в г.Харьковв в 1973 г., заседаниях Московского общества врачей-гематологов в 1973,
-
и 1982 г.г., на ХШ Научной конференции Груа.НИИ гсиатодо-t и переливания крови в г.Тбшшси в 1975 г., на П Всесоюзной
о*взде врачей-лаборантов в Ворошиловграде в 1979 г., на Всво вой научной конференции "Распознавание в меры борьбы о лейко ыи человека и животных" в г. Белой церкви в 1982 г., на сишо ме "Новые достижения в диагностике и лечении нелнмфоцнтарнш лейкозов" в г.Риге в 1983 г., на сессии Груз. НИИ геиатологи переливания крови, посвященной 50-летию института,в г.Тбяднс 1985 г., на симпозиуме "Пробдеыы клинической вваимслогнн" в Увгороде в 1989 г.
По теме диссертации опубликовано 52 работы.
Объем и структура диссертации, Диссертация представлена 260 отр. машинописи, состоит из введения, обзора литератур 4 глав собственного материала, заключения, выводов в списка пользованной литературы, вкдтапцей 62 отечественных в 276 з бзхных работ.
В работе 72 таблицы, 8 рисунков и 14 шшрофотогрефпй.
Работа выполнена в клшико-диагвоотичеокой лаборатории Е клиннчеокои онкологии ВОЫЦ АМН СССР.
![Морфофункциональная характеристика ядрышкового аппарата клеток при фоновых, предраковых и злокачественных заболеваниях [Электронный ресурс]](/i/i/4501/181097.png "Морфофункциональная характеристика ядрышкового аппарата клеток при фоновых, предраковых и злокачественных заболеваниях [Электронный ресурс] Бобров Игорь Петрович")
