Введение к работе
Актуальность теки. К настоящему времени накоплен огромный экспериментальный и клинический материал, который свидетельствует об активном и разнообразном участии системы иммунитета в механизмах противоопухолевой зашиты организма. Основную роль в противоопухолевом иммунитете выполняют макрофаги,. Т-лимфоциты, естественные киллеры и др. клетки, способные эффективно элиминировать опухолевые клеткм-мишени. Установлено, что В-лимфзцитц продуцируют in vitro цитотоксические антитела, которые также могут осуществлять лизис опухолевых клеток (Witz et al. ,1984). В то же время антитела, связываясь с опухолевыми антигенами, либо с рецепторами зф-фекторных клеток, способны оказывать усиливающий рост опухоли эф-фект(Не11з1гот,1971). Образование комплексов антиген-антитело яв ляется интегральной частью иммунного ответа организма, направленного на удаление чужеродных антигенов, и поддержание гомеоетаза.
В общей оценке состояния иммунологической реактивности организма, и в частности, по В-звену. одним из определявших факторов является его способность к иммунному ответу при назначении антигенного стимула. Исследования иммунологических показателей у онкологических больных, а также в эксперименте, выявили, что при большинстве нозологических форм злокачественных новообразований преобладает заметное снижение их уровня сравнительно с величиной в здоровом организме (Rowland et al., 1971;Pikowski et al., 1975; Yarashita et al. , 1982; Dean et al. , 1983; Suzuki et al. , 1986; и др.). Это свидетельствует о том, что зачастую потенциальные возможности эффекторных клеток противоопухолевого иммунитета в условиях in vivo не реализуются в полной мере. При опухолевой росте одной из основных причин возникновения такой ситуации является активация супрессорных клеток, как антиген-специфических, так и неспецифических (Nelson et al. ,1987). Суирессоршю механизмы, по мнению некоторых авторов, во многом обеспечивают парадоксальный рост имыупогенных типов опухолей (Naor, 1979; North, 1984).
Известно, что супрессоры представлены множеством вариантов, различающихся по условиям возникновения, кинетикой, специфичностью действия генетической рестрикцией функции, разнообразием свойств, степенью зрелости и антигенными маркерами, природой сек-ретируемьк факторов и да*е механизмами еупрееоии (Ерондэ, 1987),
В последнее время внимание исследователей привлекают работы, свя-заннные с выделением и идентификацией так называемых естественных супрессорных клеток из костного мозга и селезенки, регулирующих иммуннный ответ. Так, в костном мозге человека и животных показано" существование антигеннеспецифичееких супрессорньн клеток, подавлявших гуморальный иммунный ответ in vivo и in vitro (Петров и еоавт., 1976;1978;, Dmre et al., 1978;, Козлов и соавг. ,1984), митогенстимулированную пролиферацию лимфоцитов (Holda et al. ,1986; Young- et al. ,1987), антиген-сгимулированную пролиферацию Т-клеток в СКЛ (Duwe et al., 1978), а также клеток плазмацитомы X -63. Ag 8. 653, мастоцитош Р815 и гибридных клеток, продуцирующих моноклинальные антитела (Сидорович и др., 1984). Действие этих оупрее-сорных клеток осуществляется посредством выделения растворимого фактора (Duwe et al. ,1078; Сидорович и соавт. ,1987), который способен блокировать также продукцию и активность интерлейкина-2 (toes et al., 1988). Активацию естественных супрессорных клеток костного моэга и появление их в селезенке наблюдали при прогрессивном росте карциномы Эрлиха (Хаитов,1984; Subiza et al., 1989), аденокарциноми Льюиса (Young et al., 1987;1988). Однако, биологическая роль этих клеток еще не совсем ясна.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является сравнительная характеристика функцирнального состояния В-звена системы иммунитета, изучение роли естественных супрессорных клеток в механизмах регуляции иммунитета в условиях экспериментального злокачественного роста, а также при воздействии экстремальных экологических факторов.
В рамках этой цели решались следующие задачи:
-
Провести сравнительное изучение функционального состояния В-эвена и естественных супрессорных механизмов у инбредных мышей, оппозитных по спонтанному бластомогенезу.
-
Изучить влияние экстремального воздействия на гуморальный иммунитет и активность неспецифических супрессоров у экспериментальных животных. Используя препараты природного происхождения -тимоптин и экстракт родиолы розовой, провести иммунокоррекцию выявленных сдвигов.
-
Охарактеризовать функциональное состояние В-лимфоцитов у животных со спонтанными злокачественными опухолями молочной же-
лезы, .а тагае в динамике химического канцерогенеза.
-
Оценить сулреесорную активность клеток костного мозга и селезенки, продукцию костномозгового супрессорного фактора на ука-залвных вше моделях экспериментального злокачественного роста.
-
Изучить влияние Кон А-активированного супернатанта, гидрокортизона и липополисахарида на продукцию супрессорного фактора клетками костного мозга
-
Провести сравнительный анализ изучаемых показателей в возрастном аспекте у мышей высокораковой линии.
Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые, комплексно охарактеризовано гуморальное звено иммунитета у мышей, оппозигных по предрасположенности к спонтанному опухолевому росту, а также на различных моделях экспериментального злокачественного роста
Впервые показано, что в костном мозге мышей высокораковой линии в возрасте 11-15 месяцев происходит активация естественных супресоорных клеток, а в селезенке появляется клеточные элементы, обладавшие способностью неспецифически ингибировать генерацию ан-тителообразувдих клеток у нормальных сингенных реципиентов, иммунизированных эритроцитам барана.
Впервые установлено, что в латентном периоде канцерогенеза, индуцированного 7,12-ДОБА, происходит выраженное угнетение имуноре-гуляторной функции костного мозга.
Впервые показано, что тимоптин и экстракт золотого корня эффективно предупреждают развитие стресс-шдуцированных нарушений в гуморальном иммунном ответе.
Теоретическое и практическое значение работы. Теоретическое значение полученных результатов заключается в расширении представлений об иимуяорегуляции и межклеточного взаимодействия в условиях возникновения и роста злокачественных новообразований. Проведенные исследования позволяв? оценить вклад антигеннеспецифичес-ких супрессорных механизмов в развитие сдвигов, происходящих в системе иммунитета при старении, неопластическом процессе, а также при воздействии экстремальных факторов.
Полученные данные могут служить основой для создания новых і«-тодов иммуиокоррекции. Дальнейшее выделение и очистка инмуносул-рессорного фактора, продуцируемого естественными супресоорньми
клетками, может привести к созданию эффективных иммунотерапевти-ческих препаратов, перспективными для клинического применения.
Экспериментальные данные, полученные в работе, были включены в материалы экспозиции "Служба экспериментального биомедицинского моделирования в решении задач медицинской науки и практического здравоохранения в Сибири", представленной на ВДНХ СССР. Экспозиция была удостоена медали.
Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на отчетных конференциях НИИ онкологии Томского научного центра АМН СССР (1984-1988 гг. );на областной конференции "Молодые ученые - народному хозяйству" (Томск; 1Э86);на Мевдуиародном аим- позиуме "Научные и прикладные аспекты биотехнологии лабороторных животных" (Лущига, 1989); на заседании Томского научного общества иммунологов (1990).
Публикация результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 16 работ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 135 страницах машинописного текста, иллюстрируется 19 рисунками, 12 таблицами и состоит из введения, б глав, заключения и выводов, списка литературы из 204 наименований.
Основные положения, представляемые к защите.
-
Характеристики состояния В-лимфоцитов различны у животных инбредных линий с разной генетически.обусловленной предрасположенностью к спонтанному опухолевому росту. Реакция В-эвена на экстремальный раэдролштель также неодинакова у мышей высокораковой и низкораковой линий.
-
Развитие злокачественных новообразований у экспериментальных животных сопровождается активацией неспецифических еупрессор-ных клеток и появлением их в селезенке.
-
При росте спонтанных опухолей молочной железы и в процессе ДОБА-индуцированного канцерогенеза происходит угнетение функциональной активности В-лимфоцитов, нарушается их способность к гуморальному иммунному ответу.
-
Иммунорегуляторная активность клеток костного мозга при злокачественном росте изменяется.
