Содержание к диссертации
ВВЕДЕНИЕ 9
Глава 1. Современное состояние проблемы деятельности глазных
тканевых банков по забору, заготовке и сквозной
трансплантации трупных роговиц человека
(Обзор литературы) 23
Основные направления деятельности Глазных тканевых банков 23
Проблема трансплантации и инфекционной безопасности
при заготовке трупных роговиц человека 26
Проблема жизнеспособности и отбора трупных роговиц человека для сквозной трансплантации 36
Проблема консервации трупных роговиц человека для сквозной трансплантации 57
Пути совершенствования гипотермической консервации трупных роговиц человека в культуральных средах 68
Заключение 71
Глава 2. Материал и методы доклинических и клинических
исследований 72
Общая характеристика доклинического и клинического материала по задачам исследования 72
Характеристика клинического материала и методика формирования клинических групп сравнения реципиентов с трансплантатами нативных и консервированных в отечественной среде Борзенка-Мороз донорских роговиц 77
Методы контроля жизнеспособности (функциональной полноценности) трупных роговиц человека на этапе их отбора и заготовки 84
Методы гипотермической консервации трупных роговиц человека в культуральных средах для сквозной трансплантации 90
Методы офтальмологических исследований сквозных трансплантатов донорских роговиц в клинике 98
Методы исследования вирусной инфицированности трупов-доноров роговиц 99
Статистические методы исследования 100
Глава 3. Пути решения эпидемиологических проблем в деятель
ности Глазных тканевых банков России 103
Клинико-эпидемиологические исследования инфицированности вирусами гепатитов В и С трупов-доноров роговиц 103
Лабораторно-клинические и экспериментальные исследования инфицированности вирусами гепатитов В и С трупов-доноров роговиц 107
Заключение 115
Глава 4. Применение морфо-функциональных критериев жизнеспо
собности при отборе трупных роговиц человека для
сквозной трансплантации 116
4.1. Поиск функционально значимого и энергетически
зависимого критерия жизнеспособности трупных роговиц
человека для сквозной трансплантации 116
Разработка адреналиновой пробы — критерия жизнеспособности и функциональной активности донорских роговиц 111
Связь показателей адреналиновой пробы с концентрацией АТФ в изолированных роговицах трупных глаз человека 122
3. Содержание основных катионов - Na+, К*, Са +, ІҐ (рН) в
водянистой влаге трупных глаз человека в зависимости от
сроков посмертного периода и их связь с показателями
адреналиновой пробы 124
Связь показателей биомикроскопической характеристики и плотности эндотелиальных клеток трупных роговиц человека с показателями адреналиновой пробы 126
Цветность радужной оболочки глаз человека -дополнительный критерий жизнеспособности роговиц на этапе первичного отбора трупного донорского материала 132
Клиническая оценка биологического результата приживления сквозных трансплантатов нативных донорских роговиц, отобранных на основе адреналиновой пробы и биомикроскопической характеристики трупных роговиц человека 140
Заключение 148
5. Разработка технологии гипотермической консервации
трупных роговиц человека в культуральных средах
для сквозной трансплантации 149
Пилотные исследования гипотермической консервации трупных роговиц человека в импортной среде Dexsol (модификация прописи среды McCarey-Kaufman) 149
Разработка отечественной среды с энергетически сберегающими свойствами для гипотермической консервации трупных роговиц человека 156
1. Характеристика недостатков импортных сред.
Обоснование прописи отечественной консервационной
сред ы Борзенка-Мороз. 156
Технология приготовления отечественной среды (пропись Борзенка-Мороз) для гипотермической консервации донорских роговиц 160
Токсикологические, аллергологические и санитарно-химические исследования отечественной среды (пропись Борзенка-Мороз) и трупных роговиц человека консервированных в ней на безопасность клинического применения 163
Сравнительный анализ морфологических характеристик эндотелиальных клеток трупных роговиц человека, консервированных в отечественной среде (пропись Борзенка-Мороз) и импортной среде Optisol (современная модификация прописи среды McCarey-Kaufman) 165
Сравнительные исследования приживления сквозных трансплантатов аллогенных роговиц, консервированных в среде Борзенка-Мороз и среде Optisol, у кроликов с моделью ожогового бельма 173
3. Разработка методики тканевощадящего выкраивания
роговично-склерального диска из трупного глаза человека
для гипотермической консервации в культуральных средах 177
Экспериментально-морфологическое обоснование выбора оптимальной методики выкраивания сквозного трансплантата из консервированной роговицы. Разработка устройства и методики интраоперационного выкраивания сквозного трансплантата из консервированной роговицы 183
Заключение 193
Клинические исследования результатов сквозных керато-пластик, выполненных нативными и консервированными в среде Борзенка-Мороз донорскими роговицами 194
Результаты сквозных оптических кератопластик у пациентов с кератоконусом, выполненных нативными и консервированными донорскими роговицами 194
Результаты сквозных реконструктивных кератопластик у пациентов с различной патологией, выполненных нативными и консервированными донорскими роговицами 204
Показания к использованию консервированных роговиц
для сквозной кератопластики 218
6.4. Заключение 221
Глава 7. Пути решения нормативно-правовых и организационных
проблем в деятельности Глазных тканевых банков России 223
Законодательное и нормативно-правовое регулирование в области забора и заготовки трупных донорских роговиц человека в Российской Федерации 223
Модель функционирования единой медико-технологической системы Глазных тканевых банков России 228
Типовое положение о Глазном тканевом банке России 232
Проблемы легитимности в деятельности Глазных тканевых банков России 236
Заключение 238
ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ 240
ВЫВОДЫ 262
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 266
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 268
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АП адреналиновая проба
АТФ Аденозинтрифосфат
ЭЭД Эпителиально-эндотелиальная дистрофия роговицы
ВГ Вирусный гепатит
ВГВ Вирусный гепатит В
ВГС Вирусный гепатит С
ГТБ Глазной тканевой банк
ГОМК Гамма-оксимасляная кислота (у-оксибутират)
ЗМ Зеркальная микроскопия эндотелия роговицы
ИОЛ интраокулярная линза (искусственный хрусталик)
ИФА Иммуноферментный анализ
КЦ Кератоциты
ПТР Показатель трансплантабельности роговиц
ПЦР Полимеразная цепная реакция
ПЭК Плотность эндотелиальных клеток
ПЭО-400 полиэтиленоксид с мол. М. 400 Д (криопротектор)
СКП Сквозная кератопластика
ЭК эндотелиальные клетки роговицы (задний эпителий роговицы)
ЭМ электронная микроскопия
ЯМР ядерно-магнитный резонанс
DMEM
ЕВАА
ЕЕВА
F-12
OS Q-SOP
среда Игла в модификации Дульбекко
Dexsol среда
Американская Ассоциация Глазных банков
Европейская Ассоциация Глазных банков
Среда F-12 (Хэма)
Вирус гепатита В
Вирус гепатита С
K-Sol («Кэй-Сол») среда
McCarey-Kaufinan (МакКэри-Кауфмана) среда
Optisol среда
Качественно-Стандартная Операционная Процедура
Введение к работе
Актуальность проблемы
В Российской Федерации насчитывается более 500 тысяч слабовидящих и слепых [98], из них до 18% приходится на пациентов с патологией роговицы [116]. Большая половина этой категории лиц нуждается в трансплантации роговицы [42, 70, 114]. В связи с существующими проблемами забора и заготовки трупных роговиц человека на всей территории РФ ежегодно выполняется не более 1500 кератопластик, при том что реальная потребность в трансплантационном лечении пациентов с патологией роговицы только в системе ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова» составляет около 15 тысяч операций в год.
Начиная с первых работ В.П.Филатова [176, 271], наша страна являлась признанным мировым лидером в разработке проблемы трансплантации роговиц [236, 241, 309]. Школа академика С.Н.Федорова также внесла весомый вклад в мировую офтальмологию, доказав на практике и в фундаментальных исследованиях возможность широкого применения нативных донорских роговиц человека для сквозной кератопластики [81, 83, 172, 173, 241]. С 1980-х гг нативные (неконсервированные) трупные роговицы стали предпочтительным трансплантационным материалом для выполнения оптических и реконструктивных кератопластик [63, 70, 73, 151, 202]. Однако среди отечественных офтальмологов до настоящего времени нет единого мнения о преимуществах нативных и консервированных трупных роговиц человека при выборе донорского материала для выполнения сквозных кератопластик [42, 70, 114, 116, 152].
В бывшем СССР широкое использование трупных тканей и органов человека составляло неоспоримый приоритет советской медицины [113]. До 1990-х гг система отечественной трансплантологической службы не строилась на принципах международного права и биомедицинской этики [51,
52, 79, 148, 149, 374]. В 1992 г был принят Закон РФ № 4180-1 от 1992 г «О трансплантации органов и (или) тканей человека» и законодательная база РФ была приведена в соответствие с требованиями ВОЗ. Согласно Закону Министерству здравоохранения РФ и РАМН требовалось издать приказ, утверждающий перечень органов и тканей человека - объектов трансплантации и перечень учреждений здравоохранения, которым разрешено осуществлять трансплантацию органов и тканей. Однако в силу ряда причин такой приказ (в части тканей - объектов трансплантации) издан не был, а заготовка и трансплантация трупных роговиц человека на всей территории РФ продолжали осуществляться нелегитимно [33, 40, 153, 157].
Вместе с тем в середине 1990-х гг в РФ сложилась критическая ситуация по парентеральным вирусным гепатитам [87, 99, 123, 137, 154, 169, 194], в результате которой увеличилось количество инфицированных трупов-доноров тканей и органов [91, 96], ужесточились требования к их серологической диагностике [123], забору и заготовке [62, 70, 114, 153]. Неблагоприятная эпидемиологическая обстановка и отсутствие отечественных стандартов на трупный пересадочный материал повлияли на необходимость введения в трансплантологическую практику РФ международных стандартов качества донорских тканей [249].
Опыт деятельности отечественных Глазных банков [29, 42, 62, 70, 98, 114, 116, 152] свидетельствует о том, что большинство офтальмологических клиник оказались не готовыми к переходу на принципиально новую платформу формирования национальной стратегии трупного тканевого донорства по рациональному отбору и консервации роговиц с учетом передового опыта зарубежных Глазных тканевых банков [211, 214, 237, 238,243,372,290].
Нерешенность нормативно-правовых, методологических и медико-технологических аспектов деятельности Глазных тканевых банков России в обеспечении операций по сквозной трансплантации трупных роговиц человека определили цель и задачи исследования.
Цель исследования
На базе современного законодательства и с учетом медико-биологических и клинических достижений в области офтальмологии и трансплантологии разработать медико-технологические и методологические основы эффективной деятельности Глазных тканевых банков России в обеспечении операций по сквозной трансплантации трупных роговиц человека.
Задачи исследования
1 .Разработать скрининговый неинвазивный тест определения жизнеспособности трупных донорских роговиц человека для отбора, заготовки и выполнения сквозных трансплантаций.
2.Разработать алгоритм прогноза ожидаемого результата адреналиновой пробы с помощью скринингового неинвазивного теста определения жизнеспособности трупных донорских роговиц для первичного отбора на этапе танатологических отделений.
3.Провести экспериментальные и клинические исследования базисных методов консервации трупных роговиц человека для сквозной трансплантации.
4.Разработать отечественную культуральную среду с энергетически сберегающими свойствами для гипотермической консервации и сквозной трансплантации трупных роговиц человека.
5.Разработать методику выкраивания роговично-склерального диска на основе тканевощадящей микрохирургической техники для гипотермической консервации трупных роговиц человека.
6.Разработать и экспериментально обосновать оптимальную методику интраоперационного выкраивания сквозных трансплантатов трупных роговиц человека, консервированных в культуральной среде.
7.Провести сравнительные клинические исследования результатов сквозных трансплантаций нативных и консервированных в отечественной культуральной среде трупных роговиц человека.
8.Проанализировать основные проблемы в деятельности Глазных тканевых банков России: современное состояние нормативно-правового регулирования в области забора и заготовки трупных тканей человека для трансплантации на основе законодательной базы РФ в области трансплантологии, а также эпидемическую ситуацию по инфицированности трупов-доноров роговиц вирусами гепатитов В и С и методики их лабораторной диагностики.
9.Разработать единую медико-технологическую систему эффективного функционирования Глазных тканевых банков России и предложить Проект Положения о Глазном тканевом банке.
Научная новизна результатов исследования
Выявлены высокие показатели ложно-положительных и ложно-отрицательных результатов диагностики инфицированности вирусами гепатитов В и С трупов-доноров роговиц и возможность прижизненного проникновения вируса гепатита С через гемато-офтальмический барьер и его кумуляция в эндотелии роговицы, что представляет потенциальную биологическую опасность инфицирования реципиентов через сквозные трансплантаты донорских роговиц.
Выявлено наличие связи между результатами адреналиновой пробы и уровнем содержания АТФ в клетках эндотелия трупных роговиц человека, что позволило установить минимально допустимые пороги концентрации
АТФ в эндотелии и разработать классификацию трансплантабельности роговиц для сквозной кератопластики.
Изучена посмертная динамика концентрации основных катионов (К , Na+, Са+2, ЬҐ") водянистой влаги трупных глаз человека, позволившая определить предельно допустимый период от момента смерти донора до сквозной трансплантации роговицы или ее консервации, равный 18 часам.
Разработан алгоритм прогнозирования адреналиновой пробы на основе шкалы цветности радужных оболочек для первичного отбора жизнеспособных трупных роговиц человека на этапе первичного отбора в танатологических отделениях.
Разработана отечественная культуральная среда Борзенка-Мороз, состав которой сбалансирован по содержанию аминокислот с водянистой влагой и дополнительно содержит натрия у-оксибутират, что позволяет стабилизировать липопротеидный комплекс клеточных мембран и внутриклеточных органелл и сохранять нормальные морфометрические характеристики эндотелиальных клеток до 6 суток при гипотермической консервации трупных донорских роговиц человека для сквозной кератопластики.
Изучена морфологическая характеристика и экспериментально обоснована оптимальная техника интраоперационного выкраивания со стороны переднего эпителия сквозных трансплантатов роговиц, консервированных в культуральных средах.
Практическая значимость результатов исследования
Выявлена группа высокого риска трупов-доноров роговиц, потенциально инфицированных вирусами гепатитов В и С, состоящая из лиц молодого возраста (28-33 лет) преимущественно мужского пола, смерть которых наступила в результате передозировки наркотиков, отравления экзогенными ядами, суицида, сочетанной травмы, несовместимой с жизнью.
Выявлена невысокая точность серологической диагностики инфицированности трупов-доноров роговиц вирусами гепатитов В (HBV) и С (HCV) методом иммуноферментного анализа (ИФА), при котором по сравнению с результатами полимеразной цепной реакции (ПЦР) ложно-отрицательные показатели составили для HBV - 22%, для HCV - 17%; ложно-положительные показатели составили для HBV - 48%, для HCV -40%.
Разработан скрининговый неинвазивный тест определения жизнеспособности трупных роговиц человека (адреналиновая проба), позволяющий количественно оценивать энергетически значимый критерий жизнеспособности и адаптационные резервы донорских роговиц перед консервацией и сквозной кератопластикой.
С помощью биомикроскопической характеристики трупных роговиц человека установлен нижний порог плотности эндотелиальных клеток, определяющий их пригодность для сквозных трансплантаций, равный 2200 кл/мм .
Предложен алгоритм прогноза результата адреналиновой пробы на основе шкалы цветности радужных оболочек для первичного отбора жизнеспособных трупных роговиц человека на этапе танатологических отделений.
Разработана классификация трансплантабельности роговиц трупных глаз человека, отобранных на основе показателей адреналиновой пробы (функциональный критерий) и биомикроскопической шкалы признаков (морфологический критерий).
Разработана отечественная культуральная среда Борзенка-Мороз с энергетически сберегающими компонентами на основе прописи сред McCarey-Kaufman для гипотермической консервации трупных роговиц человека в условиях Глазных тканевых банков России, в которой сроки хранения пролонгированы до 6 суток по сравнению с зарубежными средами Dexsol и Optisol.
Показана принципиальная возможность широкого применения трупных роговиц человека, консервированных в отечественной среде Борзенка-Мороз, для выполнения оптических и оптико-реконструктивных сквозных кератопластик при различных хирургических патологиях роговицы.
Разработана технология гипотермической консервации трупных роговиц человека в жидких средах в условиях Глазных тканевых банков России. С помощью лабораторных, экспериментальных и клинико-экспериментальных исследований доказана медико-биологическая безопасность и клиническая эффективность разработанной технологии.
Разработано устройство для фиксации консервированной роговицы и интраоперационного выкраивания сквозных трансплантатов из консервированных роговиц в культуральных средах.
Определены основные проблемы деятельности Глазных тканевых банков России, обусловленные несовершенством нормативно-правовой базы в области забора и заготовки трупных тканей для трансплантации, и прогрессивным увеличением количества трупов-доноров роговиц, инфицированных вирусными гепатитами В и С. Разработаны и предложены пути преодоления основных проблем в деятельности Глазных тканевых банков России.
Показана принципиальная возможность использования разработанной нами отечественной среды (пропись Борзенка-Мороз) для гипотермической консервации трупных роговиц человека и их использование в клинике для выполнения сквозных оптических и реконструктивных кератопластик по сравнению с использованием нативных донорских роговиц.
Установлено, что проблема нормативно-правового регулирования при изъятии трупных тканей и органов человека должна решаться в рамках приказа Минздравсоцразвития России и РАМН №357/40 от 25.05.2007 г., позволяющего государственным лечебно-профилактическим учреждениям, имеющим соответствующую лицензию и введенным в Перечни настоящего
приказа, осуществлять забор и заготовку трупных тканей и органов человека для трансплантации.
Разработаны модель функционирования медико-технологической системы Глазного тканевого банка и проект Типового Положения о Глазном тканевом банке России, позволяющие увеличивать количество жизнеспособных консервированных донорских роговиц, прогнозировать и улучшать биологический результат сквозных кератопластик, предупреждать инфицированность реципиентов ВИЧ-инфекцией, вирусами гепатитов В и С, сифилисом, бактериально-грибковыми и другими инфекциями.
Основные положения, выносимые на защиту
1.Высокие показатели ложно-положительных и ложно-отрицательных
результатов диагностики инфицированности вирусами гепатитов В (HBV) и
С (HCV) трупов-доноров роговиц (для HBV- 22%, для HCV - 17%) и
возможность прижизненного проникновения HCV через гемато-
офтальмический барьер и его кумуляция в эндотелии роговицы представляют
потенциальную биологическую опасность инфицирования реципиентов через
сквозные трансплантаты донорских роговиц. Диагностика
инфицированности трупов-доноров роговиц HBV и HCV должна осуществляться методами иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПНР).
2.Скрининговый неинвазивный тест определения жизнеспособности трупных роговиц человека (адреналиновая проба) позволяет количественно оценивать энергетически значимые критерии жизнеспособности и адаптационные резервы донорских роговиц для сквозной трансплантации.
3.Отечественная культуральная среда Борзенка-Мороз (БМ) для гипотермической консервации трупных роговиц человека обладает выраженными адаптоген ными, энергетически сберегающими и
антисептическими свойствами, нетоксична, неаллергенна, доступна для основного использования в условиях Глазных тканевых банков России.
4.Трупные роговицы человека, консервированные в среде БМ, не уступают по жизнеспособности и трансплантационным свойствам нативным донорским роговицам и могут широко применяться в клинике для выполнения оптических и оптико-реконструктивных сквозных кератопластик.
5.Проблема несовершенства нормативно-правового регулирования трупного тканевого донорства в РФ должна решаться в рамках изданного приказа Минздравсоцразвития России и РАМН №357/40 от 25.05.2007 г. «Об утверждении Перечня органов и (или) тканей человека - объектов трансплантации, Перечня учреждений здравоохранения, осуществляющих трансплантацию органов и (или) тканей человека, и Перечня учреждений здравоохранения, осуществляющих забор и заготовку органов и (или) тканей человека», позволяющего легитимно осуществлять забор, заготовку и трансплантацию трупных донорских роговиц на всей территории РФ.
б.Алгоритм функционирования медико-технологической системы Глазного тканевого банка России позволяет надежно осуществлять стандартную процедуру отбора и консервации жизнеспособных трупных роговиц человека для сквозных трансплантаций и значительно повышать уровень реабилитации слабовидящих и инвалидов по зрению.
Апробация работы
Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на следующих конференциях, симпозиумах и съездах:
на Всероссийской научно-практической конференции «Медицинская и социальная реабилитация больных при повреждениях органа зрения» (Краснодар, 1988); 2-й Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Офтальмохирургия и применение лазеров в
офтальмологии» (Москва, 1991); 2-ом Международном симпозиуме по рефракционной хирургии, имплантации ИОЛ и комплексному лечению атрофии зрительного нерва (Москва, 1991); 2-й Международной конференции «Успехи современной криобиологии» (Украина, Харьков, 1992); на Научной конференции «Боевые повреждения органа зрения» (Санкт-Петербург, 1993); 6-м Съезде офтальмологов России (Москва, 1994); 7-й конференции Европейской Ассоциации Глазных банков (Венгрия, Будапешт, 1995); 8-й конференции Европейской Ассоциации Глазных банков (Франция, Безансон, 1996); 9-й конференции Европейской Ассоциации Глазных банков (Италия, Венеция, 1997); Всероссийской научно-практической конференции «Ожоги глаз и их последствия» (Москва, 1997); Международной конференции по трансплантации роговицы и Глазным банкам (Болгария, София, 1998); Международной научной конференции, поев. 90-летию Н.А.Пучковской (Украина, Одесса, 1998); 5-м Всероссийском съезде врачей-инфекционистов (Москва, 1998); 8-ом Съезде офтальмологов России (Москва, 2000); на Всероссийской научно-практической конференции «Брошевские чтения» (Самара, 2002); 15-й конференции Европейской Ассоциации Глазных банков (Бельгия, Брюссель, 2003), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Новые технологии в лечении заболеваний роговицы», Федоровские чтения — 2004 (Москва, 2004); 3-м Всероссийском конгрессе по патофизиологии с международным участием «Дизрегуляционная патология органов и систем» (Москва, 2004), 16-й конференции Европейской Ассоциации Глазных банков (Испания, Барселона, 2004), Республиканской юбилейной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Т.В. Бирич «Хирургическое лечение и реабилитация больных с офтальмологической патологией» (Белоруссия, Минск, 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Регенеративная медицина и трансплантация тканей в офтальмологии» (Москва, 2005); на трех научно-клинических конференциях ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад.
С.Н. Федорова (Москва, 2006); на Всероссийской научно-практической конференции «Федоровские чтения - 2007» (Москва, 2007).
Диссертация апробирована на совместной конференции ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова», кафедры глазных болезней МГМСУ с участием специалистов по трансплантологии из ФГУ «Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов Росмедтехнологии» (Москва, 2007).
Внедрение в практику
Впервые разработанный нами «Алгоритм заготовки трупных роговиц человека для трансплантации» (медицинская технология) в 2007 г внедрен на всей территории Российской Федерации. С 2004 г применяется в Одесском научно-исследовательском институте глазных болезней и тканевой терапии им. В.П.Филатова (Украина). Созданная на базе Глазного тканевого банка ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова Росмедтехнологии» медико-технологическая система и алгоритм ее функционирования в 2006 г внедрены в деятельность всех филиалов Учреждения (приказ Генерального директора №123 от 06.05.2006 г).
Результаты диссертационной работы используются в лекционных курсах для клинических ординаторов, аспирантов и курсантов Научно-педагогического центра ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова», а также ординаторов и аспирантов кафедры глазных болезней Московского государственного медико-стоматологического университета.
Публикации
Всего по теме диссертации опубликовано 170 работ, из них основных — 70, в том числе в ведущих рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК
для опубликования основных научных результатов по теме диссертации — 12, в иностранных изданиях - 20. Непосредственно по теме диссертационной работы получено 8 Патентов РФ и 2 свидетельства на полезные модели.
Объем и структура работы
Текст диссертации изложен на 306 страницах, содержит 45 таблиц и 50 рисунков. Работа состоит из введения и 7 глав, включающих обзор литературы, материалы и методы исследования, 5 глав результатов собственных исследований, заключение, выводы и практические рекомендации. Список литературы состоит из 420 источников, включающих 208 отечественных и 212 иностранных публикаций.
Благодарности
Благодарю заведующую отделом трансплантации и хирургии роговицы профессора З.И.Мороз и основателя нашего Института академика С.Н.Федорова за предоставленную тему диссертационной работы и возможность организации крупнейшего в РФ Глазного тканевого банка.
Благодарю сотрудников отдела трансплантации и хирургии роговицы к.м.н. Е.В.Ковшун, к.м.н. О.С.Волкову, д.м.н. Ю.Ю.Калинникова, к.м.н. С.Б.Измайлову, Л.С.Олешко, О.В.Мороз, Л.Г.Колесник, И.А.Маклакову, З.В.Костылеву. за неоценимую помощь в выполнении научных исследований по теме диссертационной работы и организации Глазного тканевого банка.
Благодарю сотрудиников лаборатории трансплантологии с Глазным тканевым банком, взявшим на себя нелегкое бремя оказания помощи в организационной и научной работе: к.м.н. Ю.А.Комаха, Г.А.Неверовскую, Л.В.Чегесову, М.А.Филимонову, С.Я.Юсипову, Т.М.Самелюк, С.С.Козыря, Н.С.Егорову.
Благодарю научных консультантов диссертационной работы: профессора Х.П.Тахчиди и профессора Н.А.Онищенко, неофициальных научных консультантов профессора З.И.Мороз и д.б.н. С.В.Петричук за ценные рекомендации по работе и редактирование рукописи.
Благодарю рецензентов диссертационной работы: д.м.н. Н.С.Ходжаева, д.м.н. Зубареву, д.м.н. профессора В.С.Сускову за доброжелательность, глубокое и детальное изучение и ценные замечания по работе.
Отдельно благодарю Генерального директора ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федоров» профессора Х.П.Тахчиди, заместителей Генерального директора д.м.н. Б.Э.Малюгина и д.м.н. А.В.Догу, ученого секретаря ученого совета д.м.н. В.В.Агафонову, ученого секретаря диссертационного совета к.м.н. М.В.Косточкину, референтов Т.П.Сыровикину и Т.П.Батракову за предоставленную возможность творческой работы над диссертацией и помощь в ее подготовке к официальной защите.
Выражаю признательность всем сотрудникам ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова», помогавшим в организации, становлении крупнейшего Глазного тканевого банка России и проведении научных исследований по теме диссертационной работы.
Выражаю благодарность моим коллегам из разных учреждений РФ и СНГ, принимавшим участие и оказывавшим консультативную помощь в выполнении диссертационной работы: к.б.н. Т.Н.Власик, д.б.н. профессору С.И.Воробьеву, к.м.н. Е.В.Горбатенко, к.б.н. З.Н.Духовой, к.х.н. В.Я.Зайцеву, к.м.н. Л.Н.Земсковой, д.м.н. профессору Змызговой, члену-корреспонденту РАН Г.Р.Иваницкому, к.м.н. С.Л.Илуридзе, к.м.н. Н.П.Исаевой, к.м.н. Е.А.Куликовой, д.б.н. профессору М.Н.Кондрашовой, к.м.н. Г.И.Кричевской, д.ф.-м.н. В.И.Ларкиной, д.м.н. профессору Р.П.Нарциссову, академику РАН М.А.Островскому, д.б.н. Петричук, д.б.н. Н.В.Перовой, к.б.н. М.Ю.Писцову, д.м.н. профессору И.С.Ролику, д.б.н. Г.Ф.Семеновой, к.ф.-м.н. Н.Г.Сергеевой, д.б.н. профессору О.С.Слеповой, к.б.н. Т.Б.Фельдман, Е.В.Фомичевой, д.м.н.
профессору И.П.Хорошиловой-Масловой, д.м.н. Е.В.Ченцовой, к.м.н. Т.М.Шарлай, к.м.н. В.Б.Шигееву, д.м.н. профессору В.М.Шищенко, д.м.н. профессору Т.Н.Юрченко.
Моя бесконечная благодарность первым учителям-офтальмологам по кафедре глазных болезней Кубанской медицинской акадении (Краснодар) и офтальмологической клиники им. проф. С.В.Очаповского заведующей кафедрой профессору Н.А.Юшко, профессору Л.А.Каленич, к.м.н. В.И.Колосову, доценту О.П.Воложениной, к.м.н. А.А.Гурджиян, К.Д.Гурджиян, М.К.Розенкранцу, П.А.Авдееву, С.Д.Левичкиной, а также заведующему кафедрой биоорганической химии д.м.н. профессору С.И.Крайневу.
Низкий поклон моей маме, Вере Ивановне Борзенок, моим друзьям к.м.н. Ю.А.Комаху, к.м.н. А.В.Литвинову и Н.В.Пинчуковой, Н.Е.Глинскому, Н.В.Батяевой, Д.В.Михайлову, игумену Спиридону (Иващенко) и игуменье Ксении (Зайцевой)- без их любви и поддержки окончание рукописи диссертации было бы невозможно.
