Введение к работе
Актуальность темы. Прошедшее столетие ознаменовалось рядом
крупных открытий в области этиологии и лечения инфекционных заболеваний
Одним из немаловажных достижений явилось открытие и создание
антимикробных средств, способных воздействовать на патогенные
возбудители
Однако постоянное и широкое применение таких препаратов приводит к ряду явлений, осложняющих возможность их рационального использования (Красильников АП, 1995, Вичканова СА, 2003, Лабинская АС с соавт, 2004)
Причинами этого являются природная или приобретенная устойчивость ряда болезнетворных микроорганизмов к антимикробным препаратам, которая обуславливает их низкую терапевтическую эффективность (Мефодьев, В.В, 2002, Бурмистрова АЛ с соавт, 2004), а также способность возбудителей изменять свои патогенные и персистентные свойства под действием этих средств (Бухарин О В , 1999, Кириллов Д А., 2004)
Кроме того, стоит отметить побочные реакции при антибиотикотерапии, которые выражаются в токсическом действии (органотропное фармакологическое действие), аллергических реакциях (крапивница, контактный дерматит, бронхиальная астма и др ), торможении иммуногенеза под действием антибиотиков, а также в виде дисбиотических процессов, развивающихся после длительного приема антибиотиков с широким спектром действия (Машковскии М Д, 2000, Страчунский Л С с соавт, 2000, Коротяев А И с соавт , 2002)
В плане решения этих актуальных проблем большой интерес представляют лекарственные растения, которые способны служить не только основой для разработки средств с антимикробной активностью, но и выступать в качестве источника соединений, обладающих необходимой модифицирующей активностью в отношении патогенного и персистентного потенциала патогена (Мизина П Г, 2001, Бухарин О В с соавт, 2003, Челпаченко О Е, 2003, Куркин В А, 2004; Тарасевич А В , 2004, Smith-Palmer А, 2002)
Таким образом, изучение способности фитосубстанций изменять биологические свойства бактерий и создание антимикробного лекарственного средства на основе полученных данных является в настоящее время актуальной задачей, решение которой требует комплексного и системного подхода
Цель и задачи исследования. Целью исследования явилась оценка воздействия фитосубстанций на биологические свойства микроорганизмов для разработки антибактериального препарата на основе фракции углекислотного экстракта гвоздики
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи
1 Определить чувствительность патогенных и условно-патогенных
микроорганизмов к фитосубстанциям, содержащим
фенйлпропаноиды и флавоноиды
Изучить действие фитосубстанций на патогенные и персистентные свойства, а также антибиотикочувствительность бактерий под действием фитосубстанций
Разработать и исследовать свойства лекарственной антимикробной мембраны, изготовленной на основе активной фракции углекислотного экстракта гвоздики
Научная новизна работы. Впервые проведен целенаправленный анализ регуляции биологических свойств микроорганизмов, высеянных из гнойных ран, фитосубстанциями на основе фенилпропаноидов и флавоноидов.
Впервые изучена чувствительность микроорганизмов к ряду фитосубстанций и доказано, что различные роды микроорганизмов, вызывающих гнойно-воспалительные заболевания мягких тканей, обладают разнонаправленной чувствительностью к представленным фитообразцам
Изучено изменение патогенных и персистентных свойств бактерий под действием фитосубстанций и установлено, что фитообразцы оказывают модифицирующее влияние на биологические свойства микроорганизмов, вызывающих гнойно-воспалительные заболевания мягких тканей
Доказано, что изменения патогенных и персистентных свойств микроорганизмов, помимо видовой принадлежности бактерий, зависят от природы самой субстанции
Выявлена закономерность между воздействием субингабирующих концентраций второй фракции углекислотного экстракта гвоздики (УЭГ) на микроорганизмы и их антибиотикочувствительностью (АЧ) Установлено, что штаммы Staphylococcus spp, Streptococcus spp и Escherichia coh изменяют чувствительность к таким препаратам, как цефтриаксон, цефтазидим, эритромицин и доксициклин
Разработана и изучена лекарственная пленка, изготовленная на основе 0,7% диметилсульфоксидного раствора второй фракции УЭГ и комбинации пленкообразователей хитозан-метилцеллюлоза (1,5 1)
Выявлено, что при применении 0,5% лекарственной фотопленки для лечения белых крыс с гнойно-некротическими ранами стафилококковой этиологии очищение и заживление раны происходит быстрее, чем в группах животных, у которых применяли препараты сравнения
Практическое значение работы. Экспериментальное изучение биологической регуляции микроорганизмов фитосубстанциями, содержащими фенилпропаноиды и флавоноиды, показывает целесообразность применения ряда фитообразцов в клинической практике в качестве вспомогательных противомикробных средств как на этапе этиотропного лечения, так и для профилактики ряда инфекционных заболеваний
Разработан оригинальный состав 0,5% лекарственной пленки, изготовленной из второй фракции УЭГ на основе хитозана и метилцеллюлозы (1,5 1) (патент РФ на полезную модель 66198 от 10 09 2007 года)
Данные по регуляции биологических свойств микроорганизмов фитосубстанциями и результаты исследований разработанной антимикробной лекарственной пленки для лечения гнойных ран используются в учебном процессе и включены в материалы лекций й практических занятий на кафедрах общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии (акт внедрения от 2410 2007 года), фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии (акт внедрения от 30 10 2007 года), фармацевтической технологии ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава» (акт внедрения от 13 112007 года) Антимикробные фитопленки используются при лечении гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей у крупного рогатого скота в СХА «Восход» Похвистневского района Самарской области (акт внедрения от 16 11 2007 года)
Основные положения, выносимые на защиту:
Патогенные и условно-патогенные микроорганизмы гнойно-воспалительных ран, обладают разнонаправленной чувствительностью к фитосубстанциям, содержащим флавоноиды и фенилпропаноиды
Фитосубстанции модифицируют факторы патогенности, персистенции и антибиотикочувствительность бактериальных патогенов Характер и степень изменений факторов определяется химическим составом субстанций и видовой особенностью микроорганизмов
Вторая фракция углекислотного экстракта гвоздики обладает максимальной антимикробной активностью и значительно ингибирует патогенные и персистентные свойства патогенной флоры
Обоснование состава, технологии получения и результаты изучения химиотерапевтической активности лекарственной пленки на основе хитозана и метилцеллюлозы (1,5:1) с 0,5% содержанием активной фракции углекислотного экстракта гвоздики
Апробация рабогы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на Международном конкурсе по антимикробной химиотерапии, посвященном памяти член-кор. РАМН, профессора Л С Страчунского (Смоленск, 2007), II Международном молодежном форуме «Развитие» (Сочи, 2007); I Международной Пироговской научной медицинской конференции (Москва, 2006), Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, 2006), IX Всероссийской Пироговской научной медицинской конференции (Москва, 2005), 60-й Итоговой научной конференции молодых ученых (Ростов-на-Дону, 2006); 71-й Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2006), 64-й открытой научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Волгоград, 2006)
Основное содержание диссертации опубликовано в 15 научных работах Получен патент Российской Федерации на полезную модель «Антимикробная лекарственная мембрана» № 66198 от 10 09 2007 года
Диссертационная работа выполнена в соответствии с Республиканской программой МЗ и СР РФ «Создание и стандартизация фитопрепаратов на основе фенилпропаноидов и флавоноидов» (номер государственной регистрации 01990007536) и тематического плана НИР ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава» (номер государственной регистрации 01200202299)
Объём и структура работы. Диссертационная работа изложена на 155 страницах машинописного текста, содержит 13 таблиц, 23 рисунка Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 3-х глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований и их обсуждение, заключения, выводов, приложения и списка литературы, включающего 215 источников, из которых 54 - иностранных авторов
