Введение к работе
Актуальность проблемы.
Аллергическая теория формирования язвенной болезни возникла еще в начале 20-х годов [Cesares D.,1923]. В течение последних десятилетий достаточно полно изучено состояние местного иммунитета при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки [Аруин Л.И.,1983; Brandtzaeg Р.,1991]. Проводятся исследования секреторных и сывороточных иммуноглобулинов при этой патологии [Janssen М.,1995; Maaroos Н.,1995]. На основании полученных данных сформулирована концепция "второй линии защиты" [Ройт А., 1991; Tomasi Т..1972]. Стали считать, что не только образование, но и рубцевание язвы находится под иммунным контролем. Ведутся дискуссии по вопросу о наличии, выраженности и направленности при язвенной болезни иммунных сдвигов.
Возникновение новых разделов иммунологии, в частности абзи-мологии [Азаренок К.С.,1987; Schultz P.G.,1986; Shuster A.M.,1992; Sun М.,1994; Tawflk D.S., 1995], дало новый толчок в исследовании иммунологических изменений при различных заболеваниях, в том числе и язвенной болезни. Начало абзимологии связано с открытием иммуноглобулинов (ИГ), обладающих ферментативным действием или антител-ферментов [Lerner R.А,1986]. Доказано существование поликлональных иммуноглобулинов, обладающих широким спектром ферментативной активности [Азаренок К. С., 1987; Бронштейн И.Б.,1990; LI L.,1995]. Изучено участие каталитических ИГ в некоторых патологических процессах.
Исследование ферментативной активности препаратов иммуноглобулинов при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки (ДПК) представляется актуальным. Можно предположить, что они могут в определенной мере стимулировать ферментативную активность желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывать нарушение гемодинамики в слизистой оболочке гастродуоденальной зоны и способствовать формированию язвенной болезни. Данные фракции иммуноглобулинов могут участвовать в усилении местного иммунитета, в удалении с поверхности слизистой продуктов распада тканей (остатков клеток и их ядерного аппарата, различных белковых компонентов), т.е. обладать защитным действием. Появляется возможность разработать новые диагностические и прогностические критерии при данной патологии.
Выделение ИГ из слизистой ЖКТ представляется достаточно
сложным. Однако отражать активацию В-лимфоцитов in situ в стенке желудка может активность ИГ сыворотки крови. Отсюда в качестве объекта исследования была выбрана фракция гюликлональных иммуноглобулинов. Изучение ферментативной активности IgG-фракции у больных данной патологией до настоящего времени не проводилось.
Цель исследования.
Целью исследования явилось изучение роли фракции сывороточных иммуноглобулинов класса G, обладающей ДНК-азной и БАПНА-ами-дазной активностью, в патогенезе и течении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.
Задачи исследования:
-
изучить ДНК-азную и БАПНА-амидазную активность фракции иммуноглобулинов класса G выделенных из сыворотки крови больных язвенной болезнью желудка, язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки и здоровых лиц;
-
исследовать уровни ДНК-азной и БАПНА-амидазной активности выделенных препаратов IgG у больных язвенной болезнью и их влияние на клиническую картину заболевания, взаимосвязь с полом и возрастом больных, локализацией язвенного дефекта, периодом обострения и ремиссии;
-
изучить влияние тагамета, ацилока, метацина, висмута и винилина на уровень ДНК-азной и БАПНА-амидазной активности имму-ноглобулиновой фракции при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки;
-
разработать метод иммунологической диагностики степени тяжести язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, метод определения ДНК-азной активности фракции иммуноглобулинов, способ выделения препаратов поликлональных IgG из сыворотки крови больных и здоровых лиц.
Научная новизна работы.
-
Впервые выявлена фракция IgG у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, обладающая способностью расщеплять дезоксирибонуклеиновую кислоту и белковые соединения по аминокислотам аргинин-лизин.
-
Показана взаимосвязь ДНК-азной и БАПНА-амидазной активности препаратов IgG с клиническими проявлениями заболевания, а также отсутствие влияния лечения препаратами тагаметом, ацило-ком, метацином, висмутом и винилином на функцию последних.
-
Выявлены антитела класса G к антигенам слизистой оболочки
двенадцатиперстной кишки и дезоксирибонуклеиновой кислоте у больных язвенной болезнью желудка и ДПК.
4. Разработан метод иммунологической диагностики степени тяжести язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, высокочувствительный метод определения дезоксирибонуклеазной активности и способ выделения высокоочищенных препаратов поликлональных иммуноглобулинов из сыворотки крови.
Практическая значимость работы.
По материалам исследований разработан метод иммунологической диагностики степени тяжести язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (инструкция на метод МЗ РБ от 02.06.95.), позволяющий использовать показатели ДНК-азной и БАПНА-амидазной активности фракции IgG как дополнительный критерий для ретроспективной и уточняющей диагностики степени тяжести язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, метод определения ДНК-азной активности (патент РБ №1066), позволяющий проводить в клинике оценку уровня ДНК-азной активности иммуноглобулиновых фракций и других биологических объектов, обладающих данной активностью, способ выделения препаратов поликлональных IgG из сыворотки крови и устройство для его осуществления, дающий возможность выделять из сыворотки крови высокоочищенную фракцию IgG (), без примесей других белковых соединений.
Основные положения диссертации выносимые на защиту:
-
у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки фракция сывороточных IgG ускоряет распад белковых соединений по аминокислотам аргинин-лизин и гидролиз дезоксирибонуклеиновой кислоты;
-
фракция IgG сыворотки крови больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки обладает высокой, по сравнению со здоровыми лицами, ДНК-азной и БАПНА-амидазной активностью, которая зависит от пола, возраста больных, локализации язвенного дефекта, фазы и тяжести заболевания;
-
препараты IgG сыворотки крови больных язвенной болезнью содержат антитела к антигенам слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки и дезоксирибонуклеиновой кислоте;
-
у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки определяются прямые взаимосвязи показателей ДНК-азной и БАПНА-амидазной активностью фракции IgG с уровнем сывороточных антител к антигенам слизистой оболочки дуоденальной зоны и приз-
- 4 -наками характеризующими тяжесть болезни, что свидетельствует о значении подобных иммуноглобулинов в патогенезе и течении язвенной болезни.
Личный вклад соискателя.
Все проведенные автором исследования в рамках диссертационной работы выполнены самостоятельно.
Апробация результатов диссертации.
Материалы диссертации доложены на 45 научной конференции молодых ученых и студентов "Актуальные вопросы теоретической и практической медицины" (Минск,1991), на 51 научно-практической конференции, посвященной 60-й годовщине основания ТОДНГМИ "Актуальные вопросы медицины" (Ашхабад, 1991), на научной конференции посвященной 60-летию ВМИ "Актуальные проблемы современной медицины" (Витебск, 1994), на XXIX, XXX и XXXI научно-практических конференциях Витебской областной клинической больницы (Витебск, 1993,1994 и 1995), на научной конференции студентов-активистов СНО и молодых ученых "Вопросы фундаментальной и прикладной медицины" (Витебск,1995), на 50 и 51 научных сессиях Витебского медицинского института (Витебск, 1995 и 1996).
Опубликованность результатов диссертации.
Материалы диссертации опубликованы в 25 печатных работах (журнальных статей - 8, в том числе в иностранных журналах - 1, статей в научных сборниках - 8, в тезисах конференций и съездов - 9). Издана инструкция на метод МЗ Республики Беларусь "Иммунологическая диагностика степени тяжести язвенной болезни двенадцатиперстной кишки" от 02.06.95г. Выдан патент Республики Беларусь №1066 "Способ определения ДНК-азной активности". Подана заявка на изобретение "Способ очистки иммуноглобулинов класса G из сыворотки крови и устройство для его осуществления".
Структура и объем диссертации.
