Введение к работе
Актуальность проблемы
Гнойно-воспалительные заболевания, вызванные условно-патогенными микроорганизмами, за последние 20-30 лет приобрели большое значение в клинической медицине..Во многих стационарах эти заболевания приняли характер внутрпбольничных эпидемий (В.Д. Беляков с соавт., 1976; А.М.Смирнова с соавт.; 1977; Ы.И. Кузин с соавт., 1982; С.М.Навяпшн, И.П.У/ошна, 1982; К.П. Каш-кин, З.О.Караев, 1984; Л.Е.Бриан, 1984). Условно-патогенные микроорганизмы обладают устойчивостью к большинству применяемых в клиниках антибиотиков и отличаются высокой степенью выаизаемос-ти во внешней среде даже при очень неблагоприятных условиях (С.Д.Воропаева, 1977; Scioli et al., 1987). С этим связана обсеменность больничных помещений, медицинского инструментария, перевязочных и шовных материалов данными микроорганизмами, что в свою очередь способствует длительной циркуляции в стационарных госпитальных штаммов условно-патогенных бактерий.
Полиэтиологичность и разнообразная локализация гнойно-воспалительных процессов затрудняют регистрацию и учет заболеваний, вызванных условно-патогенными бактериями. Этиологическая диагностика гнойно-воспалительных заболеваний в значительной степени затруднена тем, что большинство возбудителей относится к нормальной микрофлоре человеческого тела, и дий-еренциадил истинных возбудителей инфекционного процесса от конташнантной флоры представляет существенные трудности. Кроме того, в клинической практике не всегда используются адекватные метода взятия материала для бактериологического исследования, позволяющие избегать' или свести к минимуму риск контаминации исследуе-
мнх образцов сопутствующей нормальной микрофлорой человеческого тела. Идентификация выделенных бактерий проводится старыми трудоемким методами. Все это ставит на повестку дня необходимость существенных изменении процедуры микробиологического исследования, внося усовершенствования на различных етапах, начиная с методов взятия материала для исследования и кончая учетом полученных результатов и их интерпретации. В современной клинической практике результаты микробиологического исследования далеко не всегда сопоставляются с исследованием иммунологического статуса больного, изменение которого слунит необходимой предпосылкой развития инфекционного процесса, вызванного условно-патогенными бактериями. Для прогнозирования течения и исхода такого инфекционного заболевания необходима оценка комплекса показателей клеточных и гуморальных факторов неспецифического иммунитета.
В условиях полирезистенстности возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний к большинству применяемые химиотерапев-тических препаратов,все большее применение в клинической практике находят физико-биологические методы лечения (лазер, ультразвук, др.). В большинстве.случаев патогенетические основы такого лечения (иногда в комбинации с лекарственными средствами) изучены недостаточно. Это диктует необходимость дальнейшего изучения в эксперименте и на клиническом материале мехашіз- : мов деаствия лазерного излучения, ультразвуковой кавитации и других физических факторов на бактериальные клетки и на иммунологические показатели организма больного.
Таким образом, усовершенствование методов диагностики гнойно-воспалительных заболеваний (методов взятия материала от больного, идентификации возбудителей), изучение иммунологи-
чесного статуса больного (клеточных и гуморальных фактороз и -специфической защиты) и патогенетическое обоснование некоторых новых физико-биологических методов лечения гнойно-воспалительных процессов, вызванных условно-патогенными бактериями, явля -ется одной из актуальных задач современной клинической медицини.
ЦЕЛЬ Исрл9Д.рваддя
Повышение эффективности диагностики, прогнозирования, лечения и профилактики гнойно-воспалительных процессов различной локализации посредством усовершенствования методов микробиологической диагностики,-изучения динамики иммунологических покс-зателей и научного обоснования целесообразности физико-биологических методов воздействия на очаг воспаления.
5адачи_ исследования I. Усовершенствовать методы взятия и исследования ыатери-їла для бактериологического изучения от о'олышх с легочной и 'рологической патологией с целью уменьшения вероятности кска-;ения результатов бактериологического, анализа за счет контамп-антной микрофлоры.
2. Модернизировать методику идентификации эн теробактеріїіі
пеферментирующих грам отрицательных бактерии.
3. Исследовать рядовой и видовой состав возбудителей гной-
о-воспалительннх заболеваний различной локализации и изучить
х биологические свойства.
4. Изучить діша-ішсу некоторых показателзй клеточного
фагоцитоз) и гуморального (концентрация иммуноглобулинов)
;спец::фического иммунитета у больных с гнойно-веспалптбльпы-
і процессами разлілшой локализации к обосновать зозмо;шостъ
:пэльзеваш:я их для проі'нозпроваши течения болезни :: к.^тро-
.-4-
ля эффективности проводимого лечения.
5. Изучить в экспериментальных и клинических условиях действие низкочастотного ультразвука на бактерии (ил вктро и ин ькво) и* на активность фагоцитарной реакции ыакроорганпзыа.
6". Обосновать целесообразность применения физико-биологических методов лечения (НЧУЗ, электросилуляция, лазер, адсорбент) гнойно-воспалительных процессов, вызванных условно-патогенными бактериями.
Раучная, крвизна
I. Разработан комплекс мероприятий по оптимизации этиологической диагностики гнойно-воспалителышх заболеваниіі, вызванных условно-патогенными бактериями, включающий модернизированные методы взятия материала для микробиологического исследования, методику дезинфекциии бронхофиброскопов, идентификации выделенных возбудителей. .
Доказано, что селективное взятие мочи из правого а левого мочеточника до и после введения диуретика позволяет уточнить локализацию и этиологию воспалительного процесса мочевыводящих путей, тогда как исследование одной только пузырной гл очи -монет призести к диагностическим ошибкам.
Изготовленные и испытанные нами щетки-катетеры с 'защитным тефлоновыы футляром для взятия материала' пз воспалительного очага в легких через брснхсц.цброскоп позволяет избегать контаминации образца нормальной ідпкрсфлорой верхних дыхательных нутеп.
Разработан- метод определения неспецдоїчзской ш.глуподогк-ческой активности одной из ваінеййілх групп фагоцитарных, клеток -пэлплсрфко-ядеркых лекоцлтоз (ШДші) периферической крози (Авторское свидетельство Л II74855), позваляздїи существенно доисл-
нить объем информации, которую мо;хет дать клиническая лаборатория лечащему врачу для оценки функционального состояния ШіЛ, в частности, их миграционной и адгезивной активности.
Доказана возможность использования показателей неси цкфи-ческих факторов защиты м. кроорганпзма для прогнозирования течения и исхода заболевания, а также для контроля эффективности проводимого лечения. И основу такого прогнозирования положено наличие корреляции динамики уровня фагоцитарной активности ШИЛ и макрофагов, а также концентрации различных классов иммуноглс-буллинов в сыворотке крови больных с их клшшчесдш состоянием.
В опытах ин витро и ин виво на экспериментальных моделях и на клиническом материале показано действие ультразвуковой кави-тгщии на взаимоотношения микроорганизмов и клеток иакрооргашз-ма при гнойно-воспалительном процессе.
Показано, что после отработки НЧУБ клеточные популяции грашоломите'лы-шх ( S.aureus) и грамотрицателышх (е.coll) бактериіі утрачивают некоторые факторы вирулентности (ферменты аггрессии, пили).
Лабораторными экспериментами и клиническими наблюдениями доказано, что низкочастотная ультразвуковая обработка элиминирует адгезированные к тканям бактерии из воспалительного очага, увеличивает количество макрофагов в эксудате, повышает фагоцитарную активность макрофагов и полиморфно-ядерных лейкоцитов іеркферичєскоіі крози.
В опытах на лабораторных животных и клиническом материале юказано, что сочеганное воздействие па гнойную рану гелиА-не-шового лазера и ферментной мази "Ируксол" сокращают сроки эли-іинацші бактерій из рены и приводит у быстрому прекращении ик->екционного процесса и заявлению раны.
Практическая значимость
Для ускорения и облегчения чтения результатов исследований по биохимической идентификации энтеробактерий впервые предлоке-!ш "ключи", т.е. последовательность учета результатов отдельных биохимических тестов. 3 соавторстве, с сотрудниками горькозского 1С1ПЭ1.1 и ПІСК шлени Л.А.Тарасевича "ключи" модернизированы, адаптированы к наборам систем индикаторных бумажных (СІШ), Еыдуска-ешх в промышленном масштабе, и включены в методические рекомендации но применению СИБ, изданные Минздравом СССР в 1938г.
Методы идентификации энтеробактерий по предлоненной нами методике, включенные а методические рекомендации Минздрава СССР 1908 года, используются в курсе преподавания микробиологии в I Московском, Донецком, Крымском, Минском, Ивановском мединститутах, Мордовском государственном университете, Украинском ПІДУВе (город Харьков). Эту методику успешно применяют а бактериологических лабораториях СЗС городов Симферополя, Донецка, Горького.
Предлолены биохимические пробили отечественных питательных сред (с использованием СИБ) для идентификации энтеробактерий и неферментирующих грамотрицательшх бактерий (включая p.aeruginosa), результаты которых счптываются с помощью стандартных пятизначных кодов.
Разработанная и экспериментально обоснованная методика взятия образцов для микробиологического исследования содержимого ністпх отделов респираторного тракта через бронхофиброскоп, исключающая контаминацию образцов микрофлорой верхних дыхателышх путей (щетки в тефлонсвом телескопическом футляре), внедреш в практику работы Горочкой клинической больницы Ь 61 города Ыос-или.
Разосланная кс:.стсїіміш простого и делового в изготовив-
ний аппарата для холодной жидкостной дезинфекции бронхсфиброско-пов, надежно обеспечивающая в течнии 30 минут обеззараживание бронхофиброскопа после обследованіш нижних отделов респираторного тракта больных с гнойно-воспалительннми заболевяяьями.'легких, внедрена в практику работа ГКБ J5 61 города Москви.
Методика обеззараживания бронхофиброскопов на основе вышеназванного аппарата с различными авдккми дезинфектантамк такке внедрена в практику ІКБ # 61.
Впервые обоснована целесообразность применения способа определения фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крези человека, как метода прогнозирования течения заболевания и контроля эффективности проводимого лечения. Методика внедрена в ишническую практику' ПСБ № 67»
Впервые разработана и Эдййюефиментально обосно%'з:..і методика даределения минимальных стеаёяей бактериурш при взятіга образ-10в мочи катетером, позволяющая установить, этиологический диаг* юз воспалительных заболеваний мочевыводдщих путей в .е:: случа-з, когда рутинный посев мочи не дает'видимого росіа Сдагеркй»
В клиника урологии І ШМ внедрена методика селективного зятия мочи из правого и левого мочеточника катетером до г пос-е введения диуретика, что позволяет уточнить локачпзащго л тиологию воспалительного процесса мочевыводдщих путей.
На основе экспериментальных лабораторных данных и клин: іес-их наблюдений доказана высокая эффективность гелий-нес >в. о азерногі"' облучения малой интенсивности (особенно з сочетании маз. "Ируксол") для лечения гнойно-восп штельшх процессов, ^званных условно-патогенной флорой. Сокращаются сроки элпыпна-;ш бактерий из раны, эгдтелнзашш раны, срокл пребывания Соль-эго в стационаре. Интраоперацконное применение гелшік-неоновог
Лазера для послойного облучения раны позволяет предотвратить гнойно-воспалительные посгоперационіше осложнения. Полученные в эксперименте данше обосновали целесообразность клинического применения гелий-неоновой; лазерной терапии в родильном доме й 9 города Москвы.
Низкочастотный ультразвук и ультразвук в сочетании с электростимуляцией тканей используются при лечении гнойных ран и ос-люшенных форм холецистита в 1KB '& 67 города Москвы.
Совокупность материалов и положений диссертации мокно квалифицировать, как теоретическое обобщение и решение проблемы этиологической диагностики і иммунологического, слежения за состоянием больного и обоснованием целесообразности применения физико-биологических методов лечения гнойно-воспалительных заболеваний, вызванных, условно-патогенными бактериями.
Положения, наносимые на зашиту:
-
лсовершенствованные нами методы взятия материала, выделения и идентификации бактерий повышают достоверность этиологической диагностики гнойно-воспалительных процессов.
-
Новая методика количественной оценки миграционной и адгезивной активности ПМЯЛ дает 'важную информацию о функциональном состоянии клеточного звена иммунитета.
-
динамика показателей фагоцитарной активности ПШ1 и концентраций различных классов'иммуноглобулинов в периферической крови больных коррелирует с клиническим состоянием больных с гнойно-воспалительными заболеваниями,, вызванными усдовно-пато-генныыи бактериями, что позволяет использовать эти показатели, как пргностпческии. признак заболевания и контроль эффективности проведенного лечения.
4. Сочетанное воздействие физико-биологических методов лечения (НЧУЗ,- электростимуляция, лазер, адсорбент) с лекарственной терапией стимулирует элиминацию шшробов из ршш, активизирует клеточные реакции неспецифической защиты и другие репара-тивные процессы в ране.
Апробация работы
Основные положения диссертационной работы, доложены на заседании Туркменского, республиканского общества микробиологов (1980 г.); на 1 Республиканском съезде микробиологов Молдавии (1982 г.); на I Всесоюзной научно-практической конференции по условно-патогенным бактериям (Винница, 1983 г.); на Всесоюзной конференции "Острые гнойные заболевания легких и плевры" (Ленинград, 1983 г. , па I Республиканском съезде микробиологов Туркмении (г.Ашхабад, 1986 г.); на I Всесоюзной конференции по нозокомиальным инфекциям (Минск, 1986 г.); на II Всесоюзной конференции по клинической микробиологии (Барнаул, 1988 г.).
По материалам диссертации опубликовано 37 научных работ. Выдано 2 авторских свидетельства. Опубликованы методические рекомендации ЫЗ СССР (1988 г.).
Структура и объем диссертации