Введение к работе
Актуальность проблемы
Множественная миелома (ММ) человека считается некурабельным заболеванием. На ее" долю приходится 1% всех злокачественных заболеваний и приблизительно 10% гематологических опухолей. Причина ММ до конца неизвестна.
Хотя представление о ММ как опухолевом заболевании В-лим-фоцитов сформировалось давно, происхождение злокачественных клеток до последнего времени оставалось тайной. По современным представлениям они возникают из клеток фолликулярных центров, которые, пройдя дифференцировочные мутации, созревают и накапливаются в костном мозге.
Начальная экспансия миеломных клеток в костном мозге скорее всего обеспечивается интерлейкином-6 (ИЛ-6). По мере прогрессии заболевания к стимуляции миеломных клеток подключаются и другие ци-токины [Berenson, 2000], секретируемые стромальными и костными элементами в условиях прилипания к ним миеломных клеток. Кроме того, часть цитокинов может продуцироваться самими миеломными клетками.
Несмотря на выраженные изменения гемопоэза, патогенез этих нарушений при ММ изучен слабо. Ранее отмечаемое недостаточное поступление в костный мозг солей железа в контрольных исследованиях не подтвердилось. Предполагаемое участие дефицита эритропоэтина в патогенезе анемии при ММ оказалось применимым к небольшому числу больных. При этом было показано, что количество эритроидных предшественников в костном мозге, а также их пролиферативный потенциал при ММ снижаются. Отсюда возникло представление, что в основе развития анемии при ММ может быть укорочение длительности жизни эритроцитов, недостаточно компенсируемое ответной реакцией костного мозга. По-видимому, близкий к этому сценарий имеет место также и в гранулоцитопоэзе больных MM [Wunder et al., 1995]. В то же время данные о нарушениях мегакариоцитопоэза при ММ практически отсутствуют.
В последнее время важный вклад в прояснение биологии костномозговых элементов при ММ внесли исследования дифференциально окрашенных серебром ядрышек, которые позволяют оценить уровень транскрипции и созревания прерибосомной РНК (пре-рРНК) в каждой анализируемой клетке [Ro-Choi, 1997]. В результате этих исследований была всесторонне изучена белоксинтезирующая способность самих миеломных клеток и показана большая прогностическая значимость этих параметров [Pich et al, 1994]. В то же время количественная характери-
етика всего гемопоэза с использованием такого подхода до сих пор не проводилась.
Цель исследования
Изучить белоксинтезирующую способность кроветворных клеток костного мозга при ММ и уточнить патогенетические механизмы нарушения гемопоэза при этом заболевании.
Задачи исследования:
Оценить транскрипцию и созревание пре-рРНК в основных классах кроветворных элементов костного мозга больных с различными им-мунохимическими вариантами и клиническим течением множественной миеломы с помощью метода избирательного серебрения ядрышек.
Провести сопоставление полученных данных по серебрению ядрышек кроветворных элементов с основными клиническими й лабораторными параметрами больных множественной миеломой.
Уточнить место нарушений биологической активности миеломных клеток, эритроидных, гранулоцитарных и мегакариоцитарных элементов в патогенезе множественной миеломы.
Положения, выносимые на защиту:
-
Использованный в работе метод количественной оценки гемопоэза с помощью избирательного серебрения ядрышковых организаторов кроветворных элементов помогает оценить вклад изменения функциональной активности эритроидных, гранулоцитарных и мегакариоцитарных элементов в патогенез нарушений гемопоэза при множественной миеломе.
-
Однонаправленные зависимости изучаемых показателей активности рибосомных цистронов миеломных клеток и костномозговых лимфоцитов с таковыми эритроидных, гранулоцитарных и мегакариоцитарных элементов больных множественной миеломой указывают на тесную функциональную связь лимфоцитов с миеломными клетками и, отсюда, на их важную роль в патогенезе этого заболевания.
-
Реакция эритроидных, гранулоцитарных и мегакариоцитарных элементов на присутствие в костном мозге биологически активных миеломных клеток и лимфоцитов носит разнонаправленный характер, и может быть частично объяснена возмущающими воздействиями продуцируемых опухолевыми элементами цитокинов на протеинкиназу С-альфа.
-
По сравнению с контролем активность рибосомных цистронов в эритроидных предшественниках больных ММ повышена, что может быть одной из причин депрессии длительно активируемого эритропоэза.
Научная новизна
- Впервые проведена количественная оценка функционального
состояния всех основных видов кроветворных элементов костного мозга
больных множественной миеломой методом дифферециального сереб
рения ядрышек.
На основании анализа многочисленных корреляционных зависимостей показано, что миеломные клетки и лимфоциты костного мозга больных ММ в функциональном отношении представляют единое целое.
Отмечены важные отличия в реакции зритроидных, гракулоци-тарных и мегакариоцитарных элементов костного мозга больных ММ на инфильтрацию костного мозга миеломными клетками и лимфоцитами.
Практическая ценность
Предложенный в работе метод изучения активности рибосомных цистронов кроветворных элементов костного мозга больных ММ с помощью нитрата серебра прост и технически доступен любой цитологической лаборатории. Он может быть с успехом использован для количественной оценки гемопоэза при многих заболеваниях крови, в том числе на фоне проводимой лекарственной терапии и миелотрансплантации.
Внедрение результатов работы
Метод количественной оценки гемопоэза, разработанный в диссертационной работе, внедрен в практику гематологических отделений Дорожной клинической больницы г. Санкт-Петербурга и Центральной районной клинической больницы г. Сургута при обследовании больных множественной миеломой. Результаты исследования используются в учебном процессе для студентов медицинского факультета СурГУ.
Апробация работы
Полученные данные были представлены на Всероссийской научно-практической конференции «Медико-биологические и экологические проблемы здоровья человека на Севере» (Сургут, 2000), Окружной научно-практической онкологической конференции (Сургут, 2001), Международном рабочем совещании по множественной миеломе (Стокгольм, 1999), 13-м Международном симпозиуме по молекулярной патологии гемопоэза (Нью-Йорк, 2000) и на 25-м Юбилейном Конгрессе Европейского общества медицинских онкологов (Гамбург, 2000).
По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 137 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4 глав, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 18 таблицами и 16 рисунками. Библиография включает 54 отечественных и 188 зарубежных источников.
