Введение к работе
Актуальность проОлеиа
В деятельности иммунной системы участвуют различные регуляторные процессы, в которые вовлекаются клетки и структурные компонента различны,; органов и тканей. Печень - комплесныя орган с очень пироким функционально метаболическим проі. ілем - также связана с неспецифическими биологичес-ими и специфическими икмунными защитными реакциями организма. Это вытекает из следующих положений.
1. В пренатальном и раннем постнатальном онтогенезе печень
выполняет гемопоэтические функции, что позволяет ..редполохить
сохранение некоторых из них у взрослого организма и их взаимосвязь
р процессами иммуногенеза, такими, как, внетимусная дифферениировка
Т-клеток (Metcalf D., Moore М.A.S., 1971; Miltner I. et al., 1986);
2. В состав печени, помимо гепатоцитов, входят макрофаги, или
купферовские клетки, способные выполнять антигенпрезенткрующую
Функцию и продуцировать ряд иммунорегуляторных цитокинов и
медиаторов lLotz М. et al., 1969); 3, Структурные элементы печени -
гепатоциты - способны про-уцировать медиаторы воспаления и
иммунитета, участвующие в регуляции адгезии лимфоцитов, неятросмлов
и моноцитов на эндотелии и их трансэндотелиальноя миграции в
лимфоидные органы и очаги воспаления; 4. Под влиянием медиаторов
воспаления и иммунитета (ИЛ-1, ИЛ-б, опухолевый некротический
Фактор - ОНФ и др.) гепатоциты продуцируют белки острой фазы
воспаления (ОФБ), которые является факторами высококомплексноя
гоыеостатическоя реакции организма, направленноп на его защиту от
патогенных агентов и различных чужеродных компонентов (Garapathl
И.К. et al,, 1968); 5. При- различных заболеваниях печени, а также в
условиях экспериментальных воздействия на орган (искусственная
ишемия, частичная гепатэктомия, отравление гепатотропными ядами)
наблюдаются скоординированные изменения иммунного статуса организма
(Carella G. et al., 1988); б. Аллотрансплантация печени редко
приводит^ к. острому отторжению органа, а при слабых различиях по МНС
часто наблюдается индукция специфической толерантности (Катаба N.,
1985); 7. В 1968 году' Н.Г.Арцимович и Н.Н.Настоящей выявлена
возможность индукции специфической толерантности, при введении
экспериментальным животным водно-солевых экстрактов и частично
очищенных антигенов печени (Н.Г.Арцимович и др., 1969;
Н.Г.Арцимович и др., 1992). Этот ЭФфект может быть связан с
продукцией в печени ряда иммуносупрессорных медиаторов.
ыли могут быть как уже известные кммуносупрессорные медиаторы, такие как паратмыозин-ct» аргиназа и IGF p. tHaritos A.A. et al.» 1965; Wang S.R. et al., 1990:, Kingsley D-.M.. 1994) так и не идентифицированные ране? иммунорегуляторные шлекуды Ш.Ни Настоящая* и др., 1976; Л-Б. Казанский и др., 1994; Kazansky &. et al.» 1992>
Таким образом. целью настоящего исследования является выделение, изучение биологической активности к идентификация конкретных биологически активных молекул; печени» играоши.4 роль о иммунорегуляции.
Основные задачи исследованиях
1. Изучение биологической активности комплекса водорастгворишх
иммунорегуляторных факторов печени в иммунологических тестах 1
уровня. Выявление адекватных методов -тестирования биологической
активности.
2. Получение, определение молекулярной массы, и комплексное
изучение биологической активности фракция, содержащих эндогенные
иммунорегуляторные факторы печени.
3. Очистка и физико-химическая. характеристика нових
иммунорегуляторных биологически активных молекул: лечен». Получение
к ним поликлональных антител.
Научная новизна
впервые установлено, что иымуносупрессорные факторы печен», подавляющие развитие локальной РТПХ у шаеа» локализуются do Фракциях с молекулярной массой 70 и 10 кДа.
Впервые установлено, что иммунорегуляторные факторы печени с молекулярной массой 70 кДа стимулируют антителообразованиа ia vivo, стимулирует дифференцировку пре-Т клеток костного мозга io vitro; регулирует пролиферацию, созревание, ыигр-чию tt гибель внутритимусных Т-лимфоцитов; подавляют реакцию Т-клетоа на митогены; индуцируют кратковременное (в течение 2-6 часов) перераспределение форменных элементов крови, выражающееся в снижении числа Thy 1~ лимфоцитов и в увеличении числа неитрофшаэв; а также вызывают гибель клеток тимомы EL-4 1п vitro.
Впервые выделены и охарактеризованы два имыунорегуляторш&а Фактора печени - ИСФ-70 и ИСФад. Оба фактора отлйчавхса- ахахи ст
Яруга по органяоя локализации. термосібильности,
хроматографическим характеристикам и антигенным эпитопам. По структуре - это полипептидные гетеродимеры, отличающиеся от описанных воспалительных и ингибитсрнмх цитокикоз, хекоаттрактивных медиаторов и ингиОиторных полипе ггмдов печени.
Практическая значимость: Полученные результаты соответствуют концепции о функциональной ьзаимосвязй печени с иммунной системой, а также свидетельстсуот об участии имчунорегулягорннх факторов печени в регуляции пролиферации, созревания, миграции и внутритимусноя селекции Т-лимфоцитов. Выделение и яарактеристика биологических эффектов двух новых форм иммунорегулягорных факторов печени открывает перспективы исследования новых механизмов регуляции адгезионных взаимодействия клеток иммунной системы, а также программированной клеточной гибели трансформиро..анных клонов Т-лимфоцитов. Выделение и возможность иммунохимическои идентификации отде >ных полипептняных цепей обоих Факторов создают прочную основу, для определения N-концевых последовательностей аминокислот, скрининга библиотек кДНК, клонирования генов и получения этих Факторов в форме рекокбикаитных продуктов.
Положения, виноеммке на запитуї
1. В печени мьшеп присутствуют эндогенные водорастворимые
иммунорегуляторные факторы.
2. Иммуносупрессорные Факторы печени, подавляющие локальную РТПХ >
мышея, локализуются во Фракциях с Л 70 и 10 кДа.
3.. Иммунорегуляторные факторы печени мышея с Мг 70 кДа действуют н целылч ряд процессов иммуногенеза, включая антителообразование, дифференцировку . пре-Т-клеток костного мозга; пролиферацию, созревание, миграцию и гибель внутритимусных Т-лимфоцитов; миграция лимфоцитов и неятрофилов, а так-се вызывают апоптот клеток чмолл EL-4.in vitro. 4. Выделены и охарактеризованы два. иммунорегуляторных факторі
печени с Мг 70 кДа - ИСФ-70 и ИСФ-нп. К. ним получены поликлональные антитела. Оба фактора отличаются друг от друга по органноя локализации, термостабильности, хроматографическим хаг-ктеристикам и антигенным эпитопам По своей структуре оба выделенных фактора отличатся от описанных воспалительных и ингибиторных цитокинов, хемоаттрактивных медиаторов и ингибиторных полипептидов печени.
Апробация работы: Материалы работы были доложены и обсуждены на конкурсах работ молодых ученых Института иммунологии U3 СССР (Москва, 1990 и 1991 гг.), 1 Всесоюзном съезде иммунологов (Сочи, 1959 г.), 1 Съезде иммунологов Белоруссии (Минск, 1990 г.), 1 Международном конгрессе неяроиммунологов (Иерусалим, 1991 г.), Всероссийском съезде хирургов (Ростов-на-Дону, 1991 г.), 1 Съезде иммунологов России (Новосибирск, 1992 г.), заседании Ученого совета НИИ канцерогенеза ОНЦ RAHH (Москва, 1994 г.)г заседании секции Ученого совета Института иммунологии МЗ РФ (Москва, 1994 г.>
Публикации: По теме диссертации опубликовано И работ, в том числе 6 -статьи в рецензируемых научных журналах.
Объем к структура диссертация: Диссертация изложена на 204 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы, посвяценноя описание материалов и методов исследования. 4 глав собственных исследования, сопровожденных заключениями, выводов и указателя литературы. Библиография включает 176 источников, в том числе 47 отечественных и 129 зарубежных. Работа содержит 46 таблиц и 14 рисунков.
![Изучение влияния [Г]-D-глутаминил-L-триптофана (Бестима) на дифференцировку и функциональную активность лимфоцитов](/i/i/4503/301534.png "Изучение влияния [Г]-D-глутаминил-L-триптофана (Бестима) на дифференцировку и функциональную активность лимфоцитов Петров Александр Владимирович")
