Введение к работе
Актуальность проблемы. В последние годы все большее внимание уделяется изучению центральных механизмов регуляции иммуни-тета и системы свертывания крови. В аспекте данной проблемы, исследование механизмов участия гипофиза в поддержании иммуно-логического и коагуляционного гомеостаза .приобретает важное значение. Это объясняется анатомическими, гистологическими и функциональными особенностями гипофиза (Девойно Л.В., 1977; Альперина Е.Л., 1985; Абрамов В.В., 1991).
Известно, что удаление гипофиза приводит к инволютивным изменениям в тимусе (Корнева Е.А., 1993). В то же время информации о взаимосвязи гипофиза и сумки Фабрициуса,'являющейся органом дифференцировки В-лимфоцитов у птиц, нам в доступной литературе найти не удалось.
Вместе с тем, эти взаимосвязи представляются нам наиболее важными для понимания роли гипофиза в реакциях гуморального иммунитета, так как именно в фолликулах бурсы В-клетками приобретается гетерогенность по их антигенной специфичности, что и обеспечивает разнообразие образующихся антител (Болотников И.А., Соловьев Ю.В., 1980; Болотников И.А., 1982). Бурсэктомия не сопровождается значительными нарушениями клеточного иммунитета. Вот почему куры служат идеальной моделью для изучения защитных реакций, связанных с гуморальным иммунным ответом. Необходимо также напомнить, что сумка Фабрициуса является эндокринным органом. Клетками бурсы выделяются гуморальные факторы, оказывающие влияние на созревание В-лимфоцитов и приобретение ими специфических свойств (Степанов А.В., 1988).
Если рассматривать бурсу как железу внутренней секреции, то можно с определенной долей вероятности предполагать наличие взаимосвязей между сумкой Фабрициуса и гипофизом. Системы иммунитета и гемостаза находятся в тесных взаимоотношениях, поэтому проводимая нами работа по выявлению новых механизмов регуляции иммунологических процессов и реакций гемостаза весьма актуальна в плане разработки новых методов лечения заболеваний,'* сопровождающихся иммунодефицитами и явлениями гиперкоагуляции. Цели и задачи исследования. Основной целью наших исследований явилось выяснение взаимосвязи между гипофизом, тимусом и бурсой в регуляции иммунитета и гемостаза.
Перед нами стояли следующие задачи:
1.Изучить, какие изменения в иммунитете и системе сверты-зания крови возникают у гипофиз-, тим - и бурсэктомирбванных дыплят.
2.Выделить из перёдней'и задней долей гипофиза полипептидные фракции и изучить их влияние на системы иммунитета и гемостаза.
3.Выяснить, возможна ли коррекция иммунологических и коа-гуологических сдвигов у кур с удаленным гипофизом, тимусом и бурсой под влиянием полипептидов, выделенных из гипофиза.
4.Определить, как изменяется состав и биологическая активность полипептидов, f выделенных из тимуса и бурсы гипофизэктомированных цыплят.
Научная новизна. Установлено, что существует связь между
гипофизом, тимусом и сумкой Фабрициуса. В результате
удаления гипофиза, тимуса и бурсы или совместной тим- и
бурсэктомии ликвидируется одно или оба звена этой связи, что,
в конечном итоге, приводит к развитию иммунодефицита и
гиперкоагуляции. '
После удаления гипофиза склерозируется строма, наблюдается гиперплазия лимфоидной части и массивные скопления малых лимфоцитов в паренхиме и в строме сумки Фабрициуса.
Установлено, что пептиды передней и задней долей гипофиза, тимуса и бурсы обладают различными биологическими эффектами. Наиболее значительное действие на состояние гуморального иммунитета оказывают пептиды задней доли гипофиза и бурсилин, а на клеточный иммунитет - пептиды передней доли гипофиза и тимуса. В то же время действие пептидов гипофиза выражено сильнее, чем тимуса и бурсы. При совместном применении пептидов передней и задней долей гипофиза отмечается полная нормализация как со стороны клеточного, так и гуморального иммунитета у гипофизэктомированных цыплят.
Введение тималина приводит к более выраженным сдвигам показателей гемостаза у неонатально тимэктомированных цыплят, чем при использовании пептидов передней доли гипофиза, хотя полной нормализации системы гемостаза и фибринолиза при этом не отмечается. Последнее наблюдается лишь при совместном применении пептидов передней и задней долей гипофиза.
Установлено, что пептиды задней доли гипофиза, также как и бурсы , в большей степени,' чем передней, нормализуют состояние иммунитета и гемокоагуляции у неонатально бурсэктомированных цыплят. Совместное применение пептидов передней и задней долей гипофиза полностью коррегирует нарушения иммунитета и гемостаза, возникающие при бурсэктомии.
Применение пептидов гипофиза при каловом перитоните оказывает положительный эффект, на систему иммунитета,
гемостаза и фибринолиза. По механизму действия пептиды передней доли гипофиза напоминают пептиды тимуса, а задней - бурсы.
Удаление гипофиза также приводит к изменению свойств цито-мединов, полученных из тимуса и бурсы. Наряду с этим происходят качественные и количественные сдвиги в пептидном составе, что выражается в потере ими иммуностимулирующего эффекта как в опы-как in vivo, так и in vitro. Приведенные факты являются доказательством наличия прямой или опосредованной связи между гипофизом, тимусом и сумкой Фабрициуса ( или ее аналогом у млекопитающих).
Практическая ценность работы. Нами выявлен один из механизмов центральной регуляции иммунитета и гемостаза. Это позволяет расширить представления о регуляции иммуногенеза и системы свертывания крови, а также о механизме коагулопатий и иммунодефицитных состояний, связанных с дисфункциями гипофиза и других эндокринных желез. Получены новые полипептидные вещества из передней и задней долей гипофиза, применение которых возможно в клинике с целью коррекции нарушений иммунитета и гемостаза, возникающих при большинстве заболеваний.
Полученные факты внедрены в учебный процесс кафедр нормальной и патологической физиологии Читинского медицинского института.
Положения, выносимые на защиту.
1. Гипофизэктомия сопровождается значительными сдвигами
в системах клеточного и гуморального иммунитета, а также
развитием гиперкоагуляции. Удаление гипофиза приводит к
атрофии тимуса и склерозированию бурсы и, следовательно, к
нарушению их функции.
2. Полипептиды гипофиза при введении гипофизэк-
томированным животным полностью нивелируют отрицательные
последствия, возникающие в результате удаления гипофиза.
3. Полипептиды гипофиза способствуют нормализации показателей иммунитета и гемостаза у тим- и бурсэктомированных птиц, и при каловом перитоните у крыс.
-
Экстирпация гипофиза приводит к значительному снижению способности полипептидов из тимуса и бурсы коррегировать иммунодефицитные и гиперкоа'гуляционные нарушения у животных с экспериментальным иммунодефицитом и стимулировать экспрессию рецепторов, свойственных Т- и В-лимфоцитам.
-
Хроматографический анализ полипептидов из тимуса и бурсы гипофизэктомированных птиц свидетельствует о структурных и количественных изменениях в их составе.
Апробация работы. Материалы исследований были доложены на X, XI межвузовских конференциях молодых ученых по проблеме "Физиология и патология иммуногенеза и гемостаза" (Чита, 1988), на регионарной научной конференции "Экспериментальная и клиническая иммунология на Востоке страны" (Красноярск, 1988), на Всесоюзной конференции "Стресс и иммунитет" (Ростов н/Д, 1989), на межвузовской конференции "Регуляторные пептиды в норме и патологии /цитомедины/" (Чита, 1991), на симпозиуме "Пептидные биорегуляторы-цитомедины" (Санкт-Петербург, 1992).
Основные данные работы отражены в 6 публикациях.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 174 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, четырех глав собственных результатов, обсуждения полученных данных, выводов, указателя литературы. Работа иллюстрирована' таблицами'и рисунками.
