Содержание к диссертации
Введение
Глава I. Обзор литературы 8
1.1. Механизмы сопріжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах кровеносных сосудов 8
1.1.1. Структурно-функциональные основы сопряжения возбуждения и сокращения 8
1.1.2. Роль потенциалов действия и деполяризации клеточной мембраны в активации сокра-
щениягладких мышц сосудов 12
1.1.3. Механизмы фармакомеханичеекого сопряжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах сосудов 18
1.1.4. Пути поступления в гладкомышечные клетки ионов кальция, участвующих в активации сокращения 23
1.1.5. Механизмы понижения внутриклеточной концентрации ионов кальция в гладких
мышцах 28
1.2. Механизмы активации сокращения и расслабления гладких мышц мозговых артерий 31
1.2.1. Структура стенки и иннервация крупных мозговых артерий 32
1.2.2. Эффекты трансмуральной стимуляции нервных волокон в стенке мозговых артерий... 35
1.2.3. Возбуждающие и тормозящие влияния медиаторов и физиологически активных веществ 37
CLASS Глава 2. Методика 5 CLASS 0
2.1. Объект исследования 50
2.2. Регистрация электрических и сократительных реакций 51
2.3. Растворы 54
CLASS Глава 3. Результаты экспериментов 5 CLASS 5
3.1. Исследование электромеханического сопряжения в гладких мышцах мозговых артерий 55
3.1.1. Электрические и сократительные реакции гладкомышечных клеток, вызванные действием поляризующего тока. 56
3.1.2. Действие бескальциевого раствора и бло-каторов кальциевых каналов на реакции гладкомышечных клеток, вызванные поляризующим током 64
3.1.3. Исследование связи между мембранным потенциалом и сокращением мышечных клеток при повышении наружной концентрации ионов К4" 70
3.1.4. Влияние бескальциевого раствора, ионов Мп2+ и верапамила на фазную и тоническую компоненты калиевого сокращения 78
3.2. Исследование действия аденозина и атф на базальный тонус и сократительную активность гладких мышц мозговых артерий 85
3.2.1. Действие аденозина и АТФ на напряжение и мембранный потенциал гладкомышечных клеток. 85
3.2.2. Влияние аденозина и АТФ на электрические и сократительные реакции гладкомышечных клеток, вызванные поляризующим током и гиперкалиевым раствором 89
3.2.3. Действие бескальциевого раствора, ионов Мп2+ и верапамила на реакции, вызванные
АТФ и аденозином 95
Глав 4. Обсуждение результатов исследования 103
Выводы 118
Список литературы 120
- Механизмы сопріжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах кровеносных сосудов
- Механизмы фармакомеханичеекого сопряжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах сосудов
- Регистрация электрических и сократительных реакций
- Исследование электромеханического сопряжения в гладких мышцах мозговых артерий
Введение к работе
Исследование механизмов сопряжения возбуждения и сокращения является одной из важнейших задач физиологии гладких мышц. Согласно современным представлениям, ведущая роль в процессе сопряжения принадлежит ионам Са : именно увеличение их концентрации в миоплазме гладкомышечных клеток (ГМК) приводит к развитию мышечного сокращения.
В настоящее время установлено, что в поперечно-полосатом мышечном волокне ионы Са поступают в миоплазму из терминальных
цистерн саркоплазматического ретикулюма во время деполяризации мембраны Т-трубочек. Гладкие же мышцы характеризуются отсутствием Т-системы и слабым развитием саркоплазматического ретикулюма.
При снижении концентрации ионов Са в наружной среде или действии блокаторов кальциевого тока сократительная активность гладких мышц значительно угнетается. Поэтому считается, что сокращение ГМК активируется преимущественно ионами Са , поступающими в клетки из внеклеточной среды.
Роль ионов Са в сопряжении возбуждения и сокращения в гладких мышцах кровеносных сосудов интенсивно исследовалась в последние годы. В результате электрофизиологических исследований было обнаружено два типа сопряжения: электромеханическое и фармакоме-ханическое, что предполагает и различные пути трансмембранного входа ионов Са2+ в ГШ. Показано также неодинаковое участие электро- и фармакомеханического сопряжения в реализации действия медиаторов и физиологически активных веществ на ГМК различных сосудов.
Следует отметить, что до настоящего времени механизмы сопряжения возбуждения и сокращения исследовались в основном на ГМК крупных кровеносных сосудов: легочной артерии, воротной вены, сонной артерии и аорты. В значительно меньшей степени изучены свойства гладких мышц таких жизненно важных сосудов, как коронарные, почечные, мозговые. Так, до сих пор не проводились исследования с одновременной регистрацией электрической и сократительной активностей ГМК мозговых артерий. В литературе имеются лишь немногие сведения об изменении мембранного потенциала (МП) мышечных клеток этих сосудов при действии медиаторов и физиологически активных веществ. Поэтому механизмы сопряжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах мозговых артерий остаются практически неизученными.
Исследование механизмов активации сокращения гладких мышц кровеносных сосудов имеет большое значение и для понимания природы базального тонуса - одного из важнейших и наименее изученных вопросов физиологии сердечно-сосудистой системы. В мозговых артериях базальный тонус составляет основную часть общего сосудистого тонуса, так как возбуждающие нервные влияния на эти сосуды выражены слабо. Известно, что базальный тонус мозговых артерий понижается при удалении ионов Са + из наружной среды. Однако до настоящего времени специальные исследования, направленные на выяснение путей поступления в ШК ионов Са , участвующих в активации базального тонуса этих сосудов, не проводились. Вместе с тем такие исследования являются важными для решения ряда вопросов физиологии и патологии мозгового кровообращения.
Механизмы сопріжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах кровеносных сосудов
В настоящее время установлено, что центральным звеном в процессе сопряжения возбуждения и сокращения любых мышц является увеличение в миоплазме мышечных клеток концентрации ионов 2+ Са , которые в свою очередь активируют регуляторные системы, управляющие взаимодействием сократительных белков. Система регуляции взаимодействия актина и миозина наиболее полно изучена в поперечнополосатых и сердечной мышцах. В последних она состоит из тропомиозина и комплекса белков: тропонина Т, I и С. При концентрации ионов Са в миоплазме ниже 10 моль/л М6-АТФ азная активность миозина тормозится тропонин-тропомиозиновым 2+ комплексом. Повышение внутриклеточной концентрации ионов Са сопровождается их присоединением к тропонину С и устранением тропониновой депрессии. В результате происходит активация актином Mg-АТФ-азной активности миозина и образование поперечных мостиков между актином и миозином /Меерсон, Капелько, 1978; Ebashi, 1976; Endo, 1977 /.
Смесь очищенных сократительных белков актина и миозина гладких мышц, в отличие от скелетных, не обнаруживает АТФ-азной акрі тивности в присутствии АТФ и ионов Са /Driska, Hartshorne,
1975/. Показано, что для активации АТФ-азной активности миозина гладких мышц необходимо фосфорилирование легкой цепочки миозина. Фосфатным донором является АТФ, а перенос фосфатной группы катализируется субстрат-специфическим ферментом - киназой легкой цепочки миозина. Активность этого фермента зависит в свою очередь от концентрации комплекса Са-кальмодулин в миоплазме клеток. Дефосфорилирование осуществляется другим специфическим ферментом - фосфатазой, переводящей миозин в форму, которая не может быть активирована актином /Adelstein, Klee, 1980; Adelstein et al., 1982; Hartshorne, Mrwa, 1982 /.
Фосфорилирование миозина, по-видимому, является только одним из возможных механизмов регуляции взаимодействия сократительных белков в гладких мышцах. Установлено, что фосфорилирование легкой цепочки миозина предшествует или совпадает по времени с увеличением напряжения гладких мышц при их стимуляции / Aksoy et al., 1982 /. Однако, тоническое напряжение мышцы может поддерживаться длительное время, тогда как уровень фосфори-лирования миозина, достигнув максимального значения в начале стимуляции, затем уменьшается почти до исходного. Эти наблюдения привели к заключению о существовании другого кальций-зависимого регуляторного механизма. Предполагается, что во время длительного поддержания тонического сокращения гладких мышц образуются нециклирующие "запирательные" поперечные мостики / Chatterjee,
Murphy, 1983 /. Второй механизм имеет более высокую чувствитель 2+ ность к ионам Са , чем система, включающая фосфорилирование миозина, и начинает функционировать только после фосфорилирования миозина и взаимодействия его с актином / Gerthoffer et al. ,1984/. С функциональной точки зрения процесс сопряжения возбуждения и сокращения в поперечнополосатом мышечном волокне включает следующие этапы: I. Возникновение ІЩ в сарколемме и проведение его внутрь волокна по Т-системе. 2. Деполяризация мембран Т-системы, приводящая к высвобождению ионов Са из цистерн саркоплазмати 2+ ческого ретикулюма. 3. Устранение ионами Са депрессивного действия тропонина на образование поперечных мостиков, сопровождающееся взаимодействием сократительных белков /Меерсон, Капелько, 1978; Ebashi, 1976; Endo, 1977 /. Таким образом, структурной основой сопряжения возбуждения и сокращения в скелетных мышцах является система поперечных трубочек и цистерн саркоплазматичес-кого ретикулюма, функциональной - деполяризация сарколеммы в виде ДЦ, приводящая к деполяризации Т-системы и высвобождению ио 2+ нов Са из внутриклеточного депо.
В гладких мышцах система поперечных трубочек - Т-система отсутствует.На поверхности ГМК описаны лишь небольшие впячивания
- кавеолы, которые расположены рядами вдоль оси клеток. Они имеют непосредственную связь с внеклеточной средой: внеклеточные маркеры - ферритин и пероксидаза - свободно проходят в полость ка-веол /Devine et.al.,1972; Somlyo,Somlyo,1968,Ъ. /. Кавеолы вряд ли являются аналогами Т-системы поперечнополосатых мышечных волокон, так как структуры, напоминающие кавеолы, находят и в других типах клеток / Gabella, 1981 /. Только % кавеол имеют пространственную связь с периферически расположенным саркоплазматическим ретикулюмом гладких мышц /Popescu, 1974 /.
Механизмы фармакомеханичеекого сопряжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах сосудов
Данные электрофизиологических исследований свидетельствуют о том, что деполяризация ГМК сосудов наблюдается также при действии медиаторов и физиологически активных веществ. В спонтанно активных ГМК умеренная деполяризация приводит к учащению ЦЦ и сопровождающих их фазных сокращений. В этом случае общая сократительная реакция формируется по типу зубчатого ( при низкой частоте ДЦ) или слитного (при высокой частоте ДЦ) тетануса. При более значительной деполяризации наблюдается угнетение ДЦ и сокращение приобретает тонический характер / Шуба, Тараненко, 1970; Johansson et.al., 1967 /.
Как показали многочисленные исследования, зависимость между деполяризацией ГМК и мышечным сокращением при действии медиаторов и физиологически активных веществ имеет более сложный характер, чем при действии ионов К4". Еще в ранних работах Су и соавторов было показано, что норадреналин в низких концентрациях вызывает сокращение мышечных полосок легочной артерии без измене-ния ШІ ГМК /Su et.al, 1964/. По данным Кастилса и соавторов, нор-адреналин в концентрации 10 -10" моль/л вызвает сокращение легочной артерии кролика, не влияя при этом на ШЇ ГМК, однако в более высоких концентрациях действие норадреналина сопровождается деполяризацией мышечных клеток /Casteels et.al.,1977 /. Норадреналин в концентрациях 10 -3x10 моль/л не оказывает деполяризующего действия на ГМК аорты /Kajiwara, 1982 / и сонной артерии /Mekata, Ній,1972 /, вызывая в то же время сокращение мышечных полосок. В некоторых сосудах при возбуждающем действии медиаторов вообще не наблюдается деполяризации ГМК: норадреналин вызывает сокращение ГМК бедренной артерии кролика /Holman, Surprenant, 1979 / и коронарных артерий свиньи /itoh et.al.,1982 / без изме-нения ПП в концентрации 10 -10 моль/л. Аналогичные данные были получены и при исследовании действия ацетилхолина на коронарные артерии свиньи /itoh et al.,1982 /.
Значение деполяризации в активации сокращения, вызываемого медиаторами, по-видимому, неодинаково в различных сосудах. Так, недавно в исследовании Каивары было показано, что норадреналин в концентрации 10 моль/л приводит к уменьшению ІП ГМК с 57,2 мВ до 46,7 мВ и сокращению мышечных полосок аорты. Деполяризация же ГМК до того же уровня ионами К не сопровождается мышечным сокращением /Kajiwara, 1982 /. Это связано, по-видимому, с тем, что в данном случае деполяризация не достигает порога активации сокращения ГМК этого сосуда. В ГМК мезентериальной артерии крысы норадреналин в концентрации 10 моль/л вызывает деполяризацию и сокращение мышечных полосок. В то же время такая же деполяризация ГМК ионами К4" сопровождается сократительной реакцией, которая составляет только около AQffo реакции, вызываемой норадреналином /Mulvany et al., 1982 /. Вклад сокращения, обусловленного деполяризацией, в общую сократительную реакцию, вызываемую норадреналином, был исследован недавно на легочной артерии кролика. В этих экспериментах реполяризация ГМК, деполяризованных норадреналином, входящим электрическим током до уровня ПП ГМК приводило только к незначительному уменьшению наблюдаемой при этом сократительной реакции - в среднем на 15% / Бурый, Гурковская, 1983/.
Медиаторы и физиологически активные вещества могут также вызывать сокращение гладких мышц, деполяризованных гиперкалиевым раствором. Такие данные были впервые получены на деполяризованном миометрии крысы /Evans et.al.,1958 /, а затем на гладких мышцах различных сосудов /Шуба, Тараненко, 1970; Бурый, Гурковская, 1983; Johansson et.al., 1967; Somlyo, Somlyo, 1968,a; Itoh et.al.,1983/.
Приведенные литературные данные свидетельствуют о том, что активация сокращения при возбуждающем действии медиаторов и физиологически активных веществ может осуществляться как во время генерации ГЩ и градуальной деполяризации ГМК,(электромеханическое сопряжение), так и без изменения МП ГМК (фармакомеханическое сопряжение) .
Механизмы фармакомеханического сопряжения возбуждения и сокращения в гладких мышцах остаются еще во многом не выясненными. В фармакомеханическом сопряжении могут участвовать ионы Са , поступающие в ГМК из внеклеточной среды в связи с увеличением кальциевой проницаемости клеточной мембраны при действии медиаторов и физиологически активных веществ. В работе Кастилса и сотрудников было показано, что активация об-адренорецепторов мышечных клеток легочной артерии низкими концентрациями норадреналина сопровождается сокращением без изменения ПП ГМК; при этом сократительные реакции полностью угнетались в бескальциевом растворе /Casteels et.al., 1977 / Катехоламины и ацетилхолин в высоких концентрациях вызывают в гладких мышцах большинства сосудов сократительную реакцию, состоящую из двух компонент: фазной и тонической. Эти две компоненты сокращения проявляют неодинаковую чувствительность р. к уменьшению наружной концентрации ионов Са : в бескальциевом растворе наблюдается только, фазное сокращение гладких мышц /Бурый, Гурковская, 1983; Bevan et.al., 1973; Deth, van Breemen, 1974; Golenhofen, 1976; Yamashita et al., 1977/.
Регистрация электрических и сократительных реакций
Объектом исследований были спиральные мышечные полоски, вырезанные из основной, задних соединительных и средних мозговых артерий крупного рогатого скота. Артерии отпрепаровывали с поверхности мозга животных на мясокомбинате и перевозили в лабораторию в охлажденном до + 8 - + ЮС растворе Кребса.
Перед приготовлением препаратов сосуды тщательно очищали от прилегающей мягкой мозговой оболочки под бинокулярным микроскопом.
Затем каждый сосуд разрезали на небольшие сегменты длиной 0,5 -0,7 см . Для приготовления спиральных мышечных полосок каждый сосудистый сегмент канюлировали плексигласовым стержнем, диаметр которого подбирался соответственно диаметру сосуда. Сегмент разрезали по спирали с помощью бритвенного лезвия. Ширина полученных таким образом мышечных полосок составляла в среднем 0,1 см , длина - 0,6 - 0,8 см . После закрепления шелковых лигатур на обоих концах полосок, их помещали в раствор Кребса / или Рингера-Локка / и выдерживали до начала эксперимента не менее двух часов.
Для одновременной регистрации электрических и сократительных реакций ГМК мозговых артерий была использована методика модифицированного сахарозного мостика, предложенная Артеменко и др. / Ар-теменко и др., 1982 /. Часть экспериментов была проведена методом двойного сахарозного мостика.
Схематическое изображение экспериментальной камеры показано на рис.1,А. Она делится сахарозной перегородкой на три участка : I - тестирующий участок; 2 - сахарозный; 3 - участок с непроточным изотоническим раствором KCI. Под отсеками камеры находится специальное устройство для нагревания раствора перед его подачей в тестирующий участок, состоящее из стеклянной трубочки с намотанной на ней нихромовой спиралью / 12 /. Нагревание спирали при пропускании через нее постоянного электрического тока приводит к нагреванию раствора, протекающего по трубочке. Температура раствора в тест-участке измерялась с помощью термистора / II /. Этот же термистор служил датчиком для системы автоматического регулирования температуры раствора.
Перед помещением мышечной полоски в экспериментальную камеру -один ее конец затягивался в Г-образную полиэтиленовую трубочку, диаметр которой подбирался соответственно толщине мышечной полоски. Лигатуру, находящуюся на конце полоски, закрепляли на верхнем устье полиэтиленовой трубочки. После этого мышечную полоску / 4 / с трубочкой / 5 / переносили в тестирующий участок экспериментальной камеры. Свободный конец мышечной полоски протягивали через сахарозную перегородку и жестко закрепляли в отсеке 3. Нитка, закрепленная на изгибе полиэтиленовой трубочки, соединялась с рычагом механотрона / б / и устройством для дозированного натяжения препарата / рис. 1,Б /. Длина части мышечной полоски в тестирующем участке камеры - между сахарозной перегородкой и трубочкой -- составляла около 0,1 см . В тестирующем участке полоска омывалась проточным раствором, температура которого поддерживалась на уровне 36,5 - 0,5С. Смена омывающего раствора на тестирующий производилась с помощью специального многоходового крана.
Раздражение мышечных клеток и отведение электрических потенциалов осуществляли с помощью неполяризующихся хлорированных серебряных электродов, которые соединялись с раствором через агаровые мостики, заполненные КСІ / 2,5 моль/л /. Один из раздражающих электродов помещали в тест-участке, а другой соединяли с раствором, заполняющим полиэтиленовую трубочку. С целью уменьшения шунтирующего действия зазора между мышечной полоской и полиэтиленовой трубочкой, устье трубочки смазывали вакуумной смазкой. В наших исследованиях раздражение ГМК производили преямоугольными импульсами электрического тока входящего и выходящего направления различной длительности. Источником тока служил стимулятор ЭСУ-2 и источник питания УИП-2. КСІ, другой - в тестирующий участок. Отводимую электрическую активность подавали на вход катодного повторителя, выход которого соединяли с одним из каналов осциллографа СІ-І8 и автоматического потенциометра КСП-4.
Регистрация сократительной активности мышечных клеток производилась в изометрическом режиме с помощью механотрона 6МХІС. На-грузка на мышцу составляла в среднем 10 Н. Электрические сигналы с механотрона подавались на второй канал осциллографа и КСП. Запись сократительных и электрических реакций производилась на диаграммной ленте КСП и фотопленке с экрана осциллографа при помощи фоторегистратора ФОР-2.
В экспериментах использовался раствор Кребса следующего состава : NaCI - 120,4; КСІ - 5,9; їїаНС03 - 15,5; Ha%F04 х 2Н20 -- 1,2; MgCI2 х 6Н20 - 1,2; глюкоза - 11,5; CaCI2 х 6Н20 - 2,5 ммоль/л. В части опытов применяли бескальциевый раствор Кребса, в который добавляли 12 ммоль/л MgCI2 для стабилизации мембраны ГМК и I - 2 ммоль/л ЭГТА. В опытах по исследованию влияния ионов Мп -4 использовали раствор Рингера-Локка следующего состава : цаС1 - 154; KCI - 5,6; ЯаНСОд - 1,8; глюкоза - 5,6; CaCI2 х 6Н20 - 2,2 ммоль/л Гиперкалиевый раствор готовили путем добавления в раствор Кребса или Рингера-Локка сухой соли КСІ в необходимом количестве. рН всех используемых растворов измерялся перед началом экспериментов и составлял 7,3 - 7,4.
Изотонический раствор сахарозы / концентрация - 318 ммоль/л / готовили путем растворения химически чистой сахарозы в тридистил-лированной воде. Удельное сопротивление раствора сахарозы составляло 200 - 300 кОМ/см3. При проведении экспериментов были использованы следующие ве -8 Ч і щества: аденозин и АТФ в концентрациях 10 -1СГимоль/л, гидрохлорид верапамила - 10-10 моль/л; хлорид тетраэтиламмония - 10 -2х Ю 2моль/л, ЭГТА - Ю 3-2хЮ 3 моль/л.
Исследование электромеханического сопряжения в гладких мышцах мозговых артерий
Анализ литературных данных о механизмах электромеханического -сопряжения в гладких мышцах сосудов показал, что сокращение ГМК может активироваться как во время генерации ПД, так и при медленной деполяризации ГМК. В спонтанноактивных ГМК основная роль в активации сокращения принадлежит ПД. Однако, гладкие мышцы большинства исследованных до настоящего времени сосудов не генерируют ни спонтанные, ни вызванные ПД; в этих мышцах сокращение активируется градуальной деполяризацией ГМК, вызываемой медиаторами или физиологически активными веществами.
Роль мембранного потенциала в активации сокращения и особенности электромеханического сопряжения в ГМК мозговых артерий до настоящего времени остаются практически неизученными, так как на этих сосудах эксперименты с одновременной регистрацией электрической и сократительной активностей ГМК не проводились.
Поскольку наиболее распространенным и простым способом возбуждения мембраны нервных и мышечных клеток в экспериментальных условиях является электростимуляция, в первой серии опытов и были исследованы электрические и сократительные реакции ГМК мозговых артерий при действии поляризующего тока.
Опыты по исследованию электрических реакций ГМК мозговых артерий в ответ на действие поляризующего тока проводили методом двойного и модифицированного одинарного сахарозного мостика. Раздражение мышечных клеток осуществляли прямоугольными импульсами разной направленности и длительностью две секунды.
В нормальном растворе Кребса мышечные клетки мозговых артерий не проявляли спонтанной электрической и сократительной активности. При раздражении же ГЖ импульсами гипер- и деполяризующего тока в них возникали соответственно ан- и катэлектротонические потенциалы. Один из примеров таких ответов приведен на рис.2,А. Амплитуда анэлектротонических потенциалов была прямо пропорциональна силе гиперполяризующего тока при всех его значениях, тогда как для катэлектротонических потенциалов линейная зависимость соблюдалась только при слабых деполяризующих токах ( до 0,3 мкА). При действии более сильных токов прирост катэлектротонических потенциалов был меньше, чем анэлектротонических, а зависимость между амплитудой катэлектротонических потенциалов и силой деполяризующего тока становилась нелинейной. На вольт-амперной характеристике это отражается в отклонении кривой в сторону оси токов (рис. 2,В). Наблюдаемое в наших опытах уменьшение прироста катэлектротонических потенциалов свидетельствует об уменьшении сопротивления мембраны ГМК при деполяризации и обусловлено выраженными выпрямляющими свойствами мембраны ГМК мозговых артерий.
Добавление ТЭА к омывающему раствору Кребса в концентрации 15 ммоль/л приводило к деполяризации мышечных клеток на 3-5 мВ. Регистрируемые в этих условиях ан- и катэлектротонические потенциалы были большими по амплитуде, чем в нормальном растворе Кребса, что указывает на увеличение сопротивления мембраны мышечных клеток ( рис.2,Б). На рис.2,В показана вольт-амперная характеристика, построенная по значениям, полученным в присутствии ТЭА. Отклонение кривой в сторону оси токов в этом случае наблюдается при больших, чем в нормальном растворе Кребса, значениях деполяризующего тока, что свидетельствует о частичном подавлении выпрямляющих свойств мембраны ГМК.
Амплитуда ДЦ значительно увеличивалась при добавлении в омывающий полоски раствор ТЭА. На рис.3 показаны электрические и сократительные реакции мышечной полоски в ответ на деполяризацию электрическим током в нормальном растворе Кребса /А/ и в присутствии ТЭА (15 ммоль/л) /Б/. В данном примере амплитуда ПД возросла почти вдвое: с 17 до 35мВ. В среднем же она увеличивалась на 93± 16%. Сокращение мышечных полосок, сопровождающее ДЦ и катэлектро-тоническую деполяризацию под влиянием ТЭА усиливалось и составляло в среднем 175 15% от реакции, регистрируемой в контроле.
В некоторых препаратах при добавлении в омывающий раствор ТЭА /15 - 20 ммоль/л/ наблюдалось появление спонтанных ДЦ. Они возникали на фоне развивающейся при этом деполяризации ГШ и сопровождались фазными сокращениями мышечных полосок. На рис.4 видно, что при данной частоте ДЦ фазные сокращения суммируются и общая сократительная реакция формируется по типу зубчатого тетануса. При отмывании препаратов раствором Кребса без ТЭА генерация ДЦ прекращалась, что сопровождалось расслаблением мышечной полоски.
В тех мышечных полосках, где ДЦ не возникали даже при действии деполяризующего тока большой силы, их генерацию можно было вызвать добавлением в омывающий раствор ТЭА /10 - 15 ммоль/л /, как, например, в случае, показанном на рис.2,Б.
