Введение к работе
Актуальность темы. Задачи по разработке и исследованию оригинальных фитопрепаратов из малоизученного растительного сырья, (к которому относятся и растения рода Hedysarum – копеечник, сем. Fabaceae), в настоящее время не теряют своей актуальности. Из 250 видов растения данного рода сегодня изучено не более 10, при этом химический состав копеечников весьма разнообразен и уникален. Он представлен различными аминокислотами, углеводами, фенольными соединениями (флавоноиды, изофлавоны, ксантоны, дубильные вещества и др.), эфирными маслами и т.д. (А.А.Семенов и соавт., 2004 г.).
В 80-е годы в ВИЛАР (СССР) был рекомендован к производству противовирусный препарат «Алпизарин», в состав которого входит ксантон мангиферин, выделенный из копеечника желтеющего. В настоящее время из некоторых видов копеечника (Н. neglectum, Н. theinum, Н. alpinum и др.) выпускаются биологически активные добавки: капли «Красный корень» (Россия, г.Бийск, «Эвалар»), таблетки «Копеечник – М» (Россия, г.Барнаул, «Алтай-Фарм»,) и др. Данные растения также входят в состав различных фитосборов («Бережник», «Фитопан М», Россия, г. Новосибирск) и др. К сожалению, данные средства выпускаются фирмами-производителями только в качестве биологически активных добавок и зачастую при их разработке не проводится исследование химического состава и фармакологической активности. Производители основываются на уже имеющихся литературных данных. Так как данные растения широко применяются в народной и официнальной медицине, исследования в этой области продолжают оставаться крайне актуальными и своевременными.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлся сравнительный фитохимический анализ ФП растений рода Hedysarum (H. theinum, H. neglectum, H. alpinum).
Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Разработка оригинального метода получения ФП из некоторых видов растений рода копеечников (H. theinum, H. neglectum, H. alpinum).
2. Исследование полученных ФП копеечников химическими и физико-химическими методами анализа.
3. Проведение сравнительного исследования фармакологической активности полученных ФП из растений рода копеечник.
4. Определение наиболее важных групп веществ, ответственных за фармакологическую активность для стандартизации и видовой идентификации копеечников.
Научная новизна исследования.
По оригинальной авторской методике (патент РФ 2402344) получены ФП растений рода копеечник (H. theinum, H. neglectum, H. alpinum). Впервые проведено сравнительное изучение полученных ФП различными хроматографическими методами. Для жидкостной колоночной хроматографии (ЖКХ) впервые наряду с широко используемым в химии природных соединений сефадексом LH-20 изучены хроматографические свойства перешитых сефарозных гелей (сефароза 4B-CL, сефароза 6B-CL) и некоторых азоадсорбентов аффинного типа на основе полисахаридных гелей. Проведено сравнительное изучение ФП копеечников методом газожидкостной хромато – масс – спектрометрией (ГЖХ-МС) и высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), впервые обнаружены и идентифицированы: группа фитостероидов, ряд ароматических и гетероциклических соединений (производные морфинана, пиридазина и др.) и ряд серосодержащих соединений (1,1-диметилтетрадецилгидросульфид и др.). Впервые проведен биохимический и фармакологический анализ данных ФП. Показано различное влияние на картину периферической крови и биохимических показателей крови крыс, а также наличие антиоксидантной активности. Впервые проведено сравнительное изучение антибактериальной и фармакологической активностей.
Практическая значимость. Разработана оптимальная методика получения ФП из растений рода копеечник, которая создает необходимые условия для серийного производства.
Проведенный анализ различными физико-химическими методами позволил выявить подробный химический состав ФП копеечников чайного, забытого и альпийского. Полученные данные могут быть использованы для видовой идентификации копеечников чайного и забытого, что до настоящего времени затруднено из-за отсутствия четких систематических морфологических признаков.
Выявленные биохимические и фармакологические эффекты позволяют дифференцировать данные ФП по действию на организм.
Запатентованный способ получения фитопрепаратов из некоторых видов копеечников (патент РФ 2402344) внедрен в работу лаборатории фитофармакологии Научно-исследовательского института фармакологии со РАМН, г. Томск (Акт внедрения от 13.01.2010г.). Результаты по антибактериальной активности внедрены в научно-исследовательскую работу МЛПУ «Детская городская больница №1», г. Томск (Акт внедрения от 12.01.2010г.). Полученные фитопрепараты из корней копеечников чайного и забытого используются в научной и учебной работе ЦНИЛ и кафедры фармацевтической и токсикологической химии ГОУ ВПО Кемеровской государственной медицинской академии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию при хроматографическом изучении новых эпоксиазоадсорбентов аффинного типа (Акт внедрения от 14.01.2010г.).
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Особенности получения ФП из растений рода копеечник (H. theinum, H. neglectum, H. alpinum).
2. Результаты исследования химическими и физико-химическими методами качественного и количественного состава ФП.
3. Особенности фармакологической активности ФП.
4. Методология стандартизации и видовой идентификации копеечников.
Связь задач исследования с планами научных работ. Диссертационная работа была выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Кемеровской государственной медицинской академии (№ Государственной регистрации 0120.0 506552)
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на всероссийской научно-практической конференции «Современные технологии профилактики, диагностики и лечения основных заболеваний человека» (Ленинск-Кузнецкий, 2009); межрегиональной научно-практической конференции «Фармацевтическая наука, образование и практика: реалии и перспективы развития» (Тюмень, 2009); межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и студентов «Проблемы медицины и биологии» (Кемерово, 2009, 2010); межрегиональной научно-практической конференции «Инновационные образовательные программы – условия повышения качества подготовки современных специалистов в системе СПО» (Томск, 2010); международной научно-практической конференции «Природные и интеллектуальные ресурсы Сибири» (Кемерово, 2010); всероссийской научно-практической конференции «Создание лекарственных средств на основе продуктов природного происхождения» (Пермь, 2010).
Публикации. По результатам исследований опубликовано 18 работ, в том числе в рекомендуемых ВАК журналах - 5 работ, получен патент РФ 2402344.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной объектам и методикам исследований, 3-х глав собственных исследований, выводов, а также списка литературы, включающего 234 наименований, в т.ч. 94 источника иностранных авторов. Работа изложена на 179 страницах машинописного текста, содержит 40 таблиц и 63 рисунка.
