Введение к работе
Актуальность темы. Одной из важных проблем фармацевтической науки и практики является разработка новых и совершенствование существующих методов контроля качества лекарственных средств.
Воспалительные и дегенеративные заболевания суставов и позвоночника, артриты, артрозы и переартриты различных локализаций находятся на четвертом месте по распространенности после болезней кровообращения, дыхания и пищеварения. В Российской Федерации, согласно официальным статистическим данным, ежегодно в лечебно-профилактические учреждения обращается около 11 млн человек с заболеваниями опорно-двигательного аппарата.
Объектами настоящего исследования выбраны нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, производные фенилуксусной и фенилпропионовой кислоты (натрия диклофенак, ибупрофен, кетопрофен), нитробензола (нимесулид), а также двухкомпонентные сочетания, содержащие ибупрофен, парацетамол и кодеин.
Критический анализ данных литературы и нормативной документации показал, что методы количественного анализа исследуемой группы препаратов несовершенны и не позволяют объективно оценить их качество. Так, количественное определение лекарственных веществ проводится титриметрическими методами: кислотно-основное титрование в среде ледяной уксусной кислоты, алкалиметрия в среде этанола и ацетона. Эти методы являются длительными, трудоемкими, токсичными, в некоторых случаях определение ведется по фармакологически неактивной части молекулы. Анализ лекарственных форм ряда препаратов исследуемой группы проводится спектрофотометрическим методом, отличающимся доступностью, простотой методик анализа, экспрессностью, высокой чувствительностью, воспроизводимостью, низкой токсичностью. Более широкому использованию данного метода для анализа субстанций препятствует отсутствие образцов сравнения. В связи с этим оптимизация спектрофотометрического определения объектов исследования с использованием внешних образцов сравнения является актуальной проблемой.
Важное место в фармацевтическом анализе занимает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Особенно актуально применение этого метода в анализе двухкомпонентных лекарственных форм ибупрофен-парацетамол, ибупрофен-кодеин. Методики, предложенные нормативными документами, требуют импортного дорогостоящего оборудования, недоступного для многих лабораторий, и большой ассортимент сорбентов, растворителей, элюентов. Поэтому исследования в этом направлении в настоящее время являются перспективными.
Целью настоящего исследования явилось совершенствование методов анализа нестероидных противовоспалительных лекарственных средств, производных фенилуксусной, фенилпропионовой кислоты и нитробензола, а также создание унифицированной методики анализа двухкомпонентных лекарственных форм «Ибуклин» и «Нурофен плюс».
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Провести изучение спектральных характеристик лекарственных средств исследуемой группы препаратов для оптимизации их спектрофотометрического определения с использованием внешних образцов сравнения.
2. Методами оптической спектроскопии исследовать спектральные характеристики внешних образцов сравнения; разработать унифицированные методики анализа исследуемой группы препаратов в субстанциях и лекарственных формах методом УФ-спектроскопии с использованием внешних образцов сравнения.
3. Разработать методики определения теста «растворение» и однородности дозирования твердых дозированных лекарственных форм исследуемой группы препаратов методом одноволновой спектрофотометрии с использованием внешних образцов сравнения.
4. Оптимизировать условия и разработать методики количественного определения исследуемой группы препаратов для однокомпонентных лекарственных форм (таблетки, капсулы, раствор для инъекций) методом ВЭЖХ.
5. Провести сравнительную оценку методик количественного определения исследуемой группы препаратов в лекарственных формах методом ВЭЖХ и спектрофотометрическим методом с использованием внешних образцов сравнения.
6. Оптимизировать условия и разработать унифицированные методики количественного определения многокомпонентных таблеток «Ибуклин» и «Нурофен плюс» методами спектрофотометрии и ВЭЖХ.
Научная новизна и теоретическая значимость работы:
На основании исследования УФ - спектров поглощения и физико-химических свойств нестероидных противовоспалительных лекарственных веществ установлены оптимальные условия спектрофотометрического анализа (оптимальные значения рН, оптимальный растворитель, аналитическая длина волны, уравнение градуировочного графика) натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида, обеспечивающие максимальную правильность и воспроизводимость получаемых результатов.
Обоснован выбор внешних образцов сравнения калия феррицианида, никеля хлорида, калия хромата, калия дихромата для спектрофотометрического анализа исследуемых лекарственных средств.
Впервые разработаны унифицированные методики спектрофотометрического определения нестероидных противовоспалительных лекарственных средств с использованием внешних образцов сравнения. В результате проведенной валидационной оценки методик установлено наличие высокой воспроизводимости, точности, отсутствие систематической ошибки.
Оптимизированы условия ВЭЖХ анализа натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида в лекарственных формах.
Обоснована методика спектрофотометрического определения парацетамола в таблетках «Ибуклин» модифицированным методом Фирордта.
Оптимизированы условия разделения компонентов таблеток «Ибуклин» и «Нурофен плюс» методом ВЭЖХ.
Практическая значимость работы:
Разработаны методики количественного определения натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида в субстанциях и лекарственных формах, методики определения однородности дозирования капсул кетопрофена, теста растворения таблеток ибупрофена, нимесулида, натрия диклофенака, кетопрофена и капсул кетопрофена спектрофотометрическим методом с использованием внешних образцов сравнения; разработаны методики количественного определения таблеток натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида, раствора для инъекций натрия диклофенака, капсул и раствора для инъекций кетопрофена методом ВЭЖХ, методика количественного спектрофотометрического определения парацетамола модифицированным методом Фирордта, методики количественного определения ибупрофена, парацетамола, кодеина в таблетках «Ибуклин», «Нурофен плюс» методом ВЭЖХ. Разработанные методики апробированы и внедрены в ОКК ОАО «Усолье - Сибирский химфармкомбинат» (г. Усолье-Сибирское), ОАО «Фармасинтез» (г. Иркутск), Центре сертификации и контроля качества лекарственных средств МЗ Республики Бурятия (г. Улан-Удэ), судебно-химическом отделении Иркутского областного бюро судебно-медицинской экспертизы (г. Иркутск), учебный процесс кафедры фармацевтической и токсикологической химии ИГМУ. Получен 31 акт о внедрении и использовании результатов данной работы. Разработанные методики защищены патентно-лицензионными документами: получено 4 Патента РФ на изобретение № 2333490, № 2333483, № 2333488, № 2333489.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы обсуждались на VIII Международной школе-семинаре «Люминесценция и лазерная физика» (Иркутск, 2003 г.); 58-й, 60-й, 61-й, 62-й, 63-й межрегиональной конференции по фармации и фармакологии «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2003, 2005, 2006, 2007, 2008 г.г.); научной конференции «Естествознание и гуманизм» (2004, 2005, 2007, 2008 г.г.); межрегиональной научной конференции «Актуальные проблемы фармации» (Рязань, 2006 г.); международной конференции «Прикладная оптика-2006» (Санкт - Петербург, 2006 г.); международной конференции «Оптика-2007» (Санкт - Петербург, 2007 г.); научно-практической конференции (Ярославль, 2007 г.); юбилейной научно-практической конференции «Фармацевтической службе Республики Бурятия - 80 лет» (Улан-Удэ, 2004 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 24 работы, в том числе 5 статей в периодических изданиях, рекомендованных ВАК МО и науки РФ, и 4 патента РФ на изобретение.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ИГМУ по проблеме «Контроль качества лекарственных средств с использованием современных методов анализа» (номер Госрегистрации 01.91.0008620) и соответствует направлению проблемной комиссии по фармации и фармакологии.
Основные положения, выносимые на защиту
выбор внешних образцов сравнения для спектрофотометрического анализа натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида;
результаты оптимизации условий и методики спектрофотометрического анализа с использованием внешних образцов сравнения натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида в субстанциях и лекарственных формах, их валидационная оценка;
оптимизация условий и методики ВЭЖХ натрия диклофенака, ибупрофена, кетопрофена, нимесулида в готовых однокомпонентных и многокомпонентных лекарственных формах, их валидационная оценка;
сравнительная оценка методик количественного определения исследуемой группы препаратов в лекарственных формах методом ВЭЖХ и спектрофотометрическим методом с использованием внешних образцов сравнения.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 185 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, 5 глав экспериментальной части, общих выводов, 82 таблиц, 50 рисунков, списка литературы, включающего 223 источника, из них 74 на иностранных языках. В приложении представлены материалы по апробации и внедрению разработанных методик.
