Содержание к диссертации
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 5
ВВЕДЕНИЕ 6
Глава 1. АКТУАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ ИЗУЧЕНИЯ ТРАНСМИССИВНЫХ КЛЕЩЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ В РФ И ВОПРОСЫ ПРОФИЛАКТИКИ (ОБЗОР
ЛИТЕРАТУРЫ) 17
1.1. Клещевой энцефалит: современная эпидемиологическая обстановка и
вопросы профилактики 17
1.2. Проблема иксодовых клещевых боррелиозов в
России 30
1.3. Клещевой риккетсиоз: современная эпидемиологическая ситуация
45
Моноцитарный эрлихиоз и гранулоцитарный анаплазмоз человека -новые для РФ инфекции 53
Микстинфекции, передающиеся иксодовыми клещами: актуальные аспекты изучения и профилактики 59
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 69
Материалы 69
Методы исследования 71
Эпидемиологический анализ 71
Лабораторные методы исследования 72
Методы статистической обработки материала 84
Глава 3. СОВРЕМЕННАЯ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ОБСТАНОВКА И
ПРОФИЛАКТИКА ТРАНСМИССИВНЫХ КЛЕЩЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ
(НА ПРИМЕРЕ ИРКУТСКОЙ ОБЛАСТИ И
Г.ИРКУТСКА) 86
Глава 4. ОРГАНИЗАЦИЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕСС-
ДИАГНОСТИКИ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА И КЛЕЩЕВОГО
БОРРЕЛИОЗА В Г. ИРКУТСКЕ. ТАКТИКА ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ
МЕРОПРИЯТИЙ В ОТНОШЕНИИ ЛИЦ, ПОСТРАДАВШИХ ОТ УКУСА
КЛЕЩЕЙ, ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ КЛЕЩЕВОГО
ЭНЦЕФАЛИТА И БОРРЕЛИЯМИ 118
Глава 5. КРИТЕРИИ РИСКА ИНФИЦИРОВАНИЯ ЛИЦ, ПОКУСАННЫХ
КЛЕЩАМИ И ОБОСНОВАНИЕ ПОДХОДОВ К ЭКСТРЕННОЙ
ПРОФИЛАКТИКЕ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА И БОРРЕЛИОЗА,
ОСНОВАННОЙ НА РЕЗУЛЬТАТАХ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ВОЗБУДИТЕЛЕЙ 130
Глава 6. ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭКСТРЕННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ
КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА И ИКСОДОВОГО КЛЕЩЕВОГО
БОРРЕЛИОЗА ПО РЕЗУЛЬТАТАМ ЭКСПРЕСС-ИССЛЕДОВАНИЯ
КЛЕЩЕЙ, СНЯТЫХ С ЛЮДЕЙ 155
Глава 7. ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ РИККЕТСИЙ И БОРРЕЛИЙ, ЦИРКУЛИРУЮЩИХ НА ТЕРРИТОРИИ
ИРКУТСКОЙ ОБЛАСТИ 173
7Л. Изучение генетического разнообразия риккетсий, циркулирующих
на территории Прибайкалья 173
7.2. Генетическая вариабельность боррелий, циркулирующих на
территории Иркутской области 193
Глава 8. РЕЗУЛЬТАТЫ РЕКОГНОСЦИРОВОЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
ПО ОЦЕНКЕ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ ПО
МОНОЦИТАРНОМУ ЭРЛИХИОЗУ И ГРАНУЛОЦИТАРНОМУ
АНАПЛАЗМОЗУ В ПРИБАЙКАЛЬЕ И ВОПРОСЫ
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ И
ПРОФИЛАКТИКИ ПРИРОДНО-ОЧАГОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ
ИНФЕКЦИЙ 205
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 223
ВЫВОДЫ 244
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 246
ПРИЛОЖЕНИЯ 294
СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АКБ АПЛ АСК
ГАЧ ДНК ИФА ИКБ
мгнк
н.о. (п.о.)
ОТ-ПЦР
ПДРФ
РНИФ
РНК (RNA) -
рРНК
СПЭВ
СТАВ
УОБАО
nested-ПЦР
OspA
OspB
OspC
rrf(5S)-rrl(23S)
16S, 23S
аргасовые клещевые боррелиозы астраханская пятнистая лихорадка антитела к антигенам слюны клещей высокая степень инфицированности боррелиями гранулоцитарный анаплазмоз человека дезоксирибонуклеиновая кислота иммуноферментный анализ иксодовые клещевые боррелиозы группа клещевой пятнистой лихорадки
клещевой риккетсиоз
клещевой энцефалит
молекулярная гибридизация нуклеиновых кислот
моноцитарный эрлихиоз человека
нуклеотидные основания (количество пар оснований)
обратная транскрипция полимеразной цепной реакции
полиморфизм длин рестриктных фрагментов
полимеразная цепная реакция
реакция непрямой иммунофлюоресценции
рибонуклеиновая кислота
рибосомальная РНК
культура клеток почки эмбриона свиньи
средняя степень инфицированности боррелиями
сыпной тиф
цетилтриметилбромид аммония
Усть-Ордынский Бурятский автономный округ
килодальтон (единицы измерения молекулярной массы)
двухраундовая ПЦР
поверхностный мембранный белок А
поверхностный мембранный белок В
поверхностный мембранный белок С
белок боррелий флагеллин с молекулярной массой 41 kDa
белок мембранной основы с молекулярной массой 66 kDa
межгенный спейсерный регион боррелий
- коэффициенты седиментации
Введение к работе
Природно-очаговые трансмиссивные клещевые инфекции имеют широкое распространение в мире и отличаются большим разнообразием природы (вирусы, риккетсии, бактерии, простейшие) и видового состава возбудителей. Последние 15 лет в России и, особенно, в Сибири характеризуются беспрецедентным ростом заболеваемости населения клещевым энцефалитом (КЭ), иксодовыми клещевыми боррелиозами (ИКБ), а также клещевым риккетсиозом (КР) [15, 19, 20, 44, 61, 66-71, 81, 90, 113, 115, 122, 162, 170, 203, 214, 215, 230, 253]. Регистрируются перманентный рост численности клещей в пригородных лесах, стремительное появление новых антропургических очагов и даже появление клещей в городах. Количество лиц, прежде всего горожан, пострадавших от укусов клещей ежегодно возрастает.
Несмотря на то, что исследованиями освещены многие аспекты проблемы клещевых трансмиссивных заболеваний, остаются нерешенными принципиальные вопросы, связанные с новой эпидемиологической ситуацией, возникшей в конце XX века, требующей на современном этапе пересмотра стратегии и тактики борьбы с этими природно-очаговыми инфекциями.
В последние годы существенно изменились представления о распространении, таксономии и экологии риккетсии группы клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ). В различных регионах мира обнаружен целый ряд новых риккетсии группы КПЛ, многие из которых могут обрести статус самостоятельного вида [296, 299, 304, 352, 353, 363, 364]. На эндемичных по клещевому риккетсиозу и сопредельных с ними территориях юга Сибири, Северного Казахстана, Дальнего Востока в последние годы выявлен и охарактеризован ряд риккетсии группы КПЛ, существенно отличающихся от возбудителя клещевого риккетсиоза - R. sibirica [31, 33, 40, 181, 182, 194, 205, 213,
7 256, 269, 279, 283, 307, 347]. У многих риккетсий новых генотипов патогенность для человека не установлена. Эти данные свидетельствуют о высокой актуальности исследований по изучению генетического разнообразия риккетсий, циркулирующих на территории Иркутской области и необходимости уточнения вопроса о роли риккетсий новых генотипов в региональной инфекционной патологии.
В последние годы в клещах тех же видов, с которыми связана передача вируса КЭ и боррелий, обнаружены Ehrlichia muris и Anaplasma phagocytophilum и описаны эрлихиозные заболевания - моноцитарный эрлихиоз человека (МЭЧ) и гранулоцитарный анаплазмоз человека (ГАЧ) [259, 261, 262, 268, 275, 284, 290, 298, 305, 306, 309, 310-316, 320, 321, 323, 358]. Громадный ареал таежного клеща позволяет предполагать, что природные очаги МЭЧ и ГАЧ, по всей видимости, широко распространены на территории страны. Циркуляция этого возбудителя и его роль в патологии человека доказана в Пермской, Ленинградской, Томской, Новосибирской областях и Алтайском крае [29, 35, 45, 75, 77, 88, 93, ПО, 159, 183, 245, 246, 286]. На территории Иркутской области сложились все биоценотические предпосылки для существования очагов МЭЧ и ГАЧ. Это наличие соответствующих переносчиков (клещей I. persulcatus), резервуарных хозяев, общего механизма передачи с уже известными в Восточной Сибири патогенами, передаваемыми через укус клещей. В пользу этого же предположения можно отнести и тот факт, что 14,6% случаев сезонных лихорадок у больных, находящихся на лечении в Иркутской городской инфекционной больнице после укуса клещей, остаются нерасшифрованными. Все это свидетельствует о необходимости проведения поисковых исследований на наличие очагов МЭЧ и ГАЧ на территории области.
Таким образом, современная эпидемиологическая ситуация характеризуется, с одной стороны, ростом известных клещевых инфекций, с другой - появлением
8 новых, в ряде случаев еще не открытых на тех или иных территориях. Чрезвычайно важным новым аспектом эпидобстановки является то, что очаги разных клещевых инфекций накладываются друг на друга, т.е. речь идет о совмещенных очагах вирусных, бактериальных и риккетсиозных инфекций. Ситуация осложняется еще и тем, что в Прибайкалье циркулирует не менее 3 генотипов вируса КЭ (генотип 1 -восточный, генотип 2 - западный, генотип 3 - урало-сибирский) [17, 145, 146], не менее двух патогенных для человека геновидов боррелий (В. garinii, В. afzelii) [43, 237, 238] и не менее двух генотипов риккетсий (R. sibirica, R. digas&belicov) [13]. Возможность одновременного присутствия в организме клеща нескольких патогенов приводит к возникновению микстформ заболевания, которые являются важной практической проблемой, требующей всестороннего изучения, а также комплексного подхода к их диагностике и профилактике.
В условиях существования сочетанных очагов клещевых инфекций и роста числа людей, пострадавших от укусов клещей, одно из ведущих мест в борьбе с природно-очаговыми заболеваниями приобретает экстренная лабораторная диагностика и дифференцированная профилактика этих заболеваний. Достижение высокой эффективности этих мероприятий требует научного обоснования организации экстренной диагностики и профилактики, использования определенных методов и тест-систем, средств экстренной профилактики (иммунопрепаратов, антибиотиков и т.д.). Подобные исследования имеют большое значение для практического здравоохранения и могут помочь делу предупреждения и сокращения заболеваемости клещевыми инфекциями в Восточной Сибири.
9 Цель работы:
научно обосновать и разработать комплекс мер дифференциальной диагностики и экстренной специфической профилактики клещевого энцефалита и других трансмиссивных клещевых инфекций в условиях существования совмещенных природных очагов.
Задачи исследования:
провести сравнительный анализ современной эпидемиологической ситуации по клещевому энцефалиту и другим трансмиссивным клещевым инфекциям в Иркутской области и г. Иркутске;
обосновать организационные принципы, методическую базу экспресс-диагностики возбудителей клещевых инфекций и разработать схемы исследования материала;
оценить уровень зараженности клещей, снятых с людей, возбудителями КЭ и ИКБ и определить риск инфицирования пострадавших лиц;
разработать и внедрить в практическую работу тактику экстренной профилактики КЭ и ИКБ, основанную на скрининге лиц, пострадавших от укусов инфицированных данными патогенами переносчиков, дать оценку эффективности такого подхода к профилактике;
с помощью современных молекулярно-биологических методов изучить видовое разнообразие боррелий и риккетсий, циркулирующих на территории Прибайкалья;
провести рекогносцировочные исследования по оценке эпидемиологической ситуации в отношении МЭЧ и ГАЧ в Прибайкалье;
разработать алгоритм комплексной лабораторной экспресс-диагностики и экстренной профилактики инфекций, переносимых иксодовыми клещами в условиях юга Восточной Сибири.
Научная новизна работы:
Впервые дана комплексная характеристика эпидемиологической ситуации по КЭ, ИКБ, КР и оценка эффективности осуществляемых в
10 Иркутской области и г. Иркутске мер профилактики данных инфекций. Проведено сравнительное изучение эпидемиологических особенностей этих инфекций и установлено, что основные закономерности развития эпидемического процесса КЭ и ИКБ на данной территории совпадают. В эпидемиологии клещевых инфекций (КЭ, ИКБ с одной стороны и КР - с другой) имеются как общие черты (тенденция к неуклонному росту заболеваемости, расширение ареала, увеличение числа случаев нападений клещей в городской черте), так и существенные различия (несовпадение основных переносчиков инфекции, территориальная приуроченность, сезонность и структура заболеваемости).
Показано, что для объективной оценки индивидуального риска заражения и развития КЭ и других клещевых инфекций у лиц, пострадавших от присасывания клеща, необходимо экспресс-определение возбудителей в переносчике.
Впервые доказана эпидемиологическая и экономическая эффективность экстренной профилактики клещевых инфекций, основанной на результатах экспресс-исследования снятых с людей переносчиков. Показано, что скрининг лиц, покусанных инфицированными клещами, позволяет отказаться от огульного подхода к экстренной профилактике КЭ и осуществлять адресную профилактику только в отношении пациентов с высокой степенью риска заболевания. Предложенный дифференцированный подход к профилактике позволяет не только значительно снизить социальный и экономический ущерб, наносимый КЭ и ИКБ, но и избежать необоснованного расхода дорогостоящего препарата каким является специфический иммуноглобулин.
В результате проведенных исследований существенно дополнены представления о структуре популяций риккетсий в очагах клещевого риккетсиоза Иркутской области. Показано, что наряду с R. sibirica на данной территории циркулируют риккетсий новых генотипов, в том числе, с неустановленной патогенностью для человека {R. sp. DnS14, R. sp. DnS28,
11 R. raoultii, «Candidatus R. tarasevichiae»).
Впервые на территории Прибайкалья установлено существование природных очагов МЭЧ и ГАЧ с циркуляцией в них Е. muris, A. phagocytophilum и «Candidatus Neoehrlichia mikurensis». Доказано участие эрлихий и анаплазм в формировании региональной инфекционной патологии.
С использованием ПЦР получена достоверная информация о генетической вариабельности возбудителей ИКБ, которая позволяет подтвердить роль В. garinii и В. afzelii в развитии ИКБ у больных в Иркутской области.
Впервые дано научное обоснование комплексу методов для диагностики и профилактики вирусных, бактериальных и риккетсиозных трансмиссивных инфекций в совмещенных природных очагах. Показано, что перспективным путем повышения эффективности и качества лабораторной диагностики трансмиссивных клещевых инфекций является использование современных молекулярно-генетических методов, в частности ПЦР.
Теоретическая значимость работы:
Научно обоснован и разработан новый комплексный подход к экстренной профилактике трансмиссивных клещевых инфекций в условиях совмещенных природных очагов, основанный на результатах экспресс-определения возбудителей в снятых с пациентов членистоногих и скрининге лиц с высокой степенью вероятности заражения.
Разработаны методические основы оценки индивидуального риска заражения людей возбудителями клещевых инфекций, которые базируются на результатах экспресс-исследования присосавшегося переносчика.
Разработана методология повышения качества лабораторной диагностики трансмиссивных клещевых инфекций за счет внедрения современных молекулярно-генетических тестов и расширения спектра определяемых патогенов.
12 Практическая значимость работы:
Предложен новый подход к экстренной профилактике трансмиссивных клещевых инфекций, основанный на результатах предварительного исследования присосавшегося переносчика, который позволил конкретизировать показания к назначению этиотропных препаратов и повысить на этой основе эпидемиологическую и экономическую эффективность экстренной профилактики данных инфекций. Экономия денежных средств за счет предотвращенного экономического ущерба, наносимого КЭ и ИКБ и введения иммуноглобулина только при наличии показаний за период с 1995 по 2006 гг. в г. Иркутске составила 84 млн. 825 тысяч рублей.
Для улучшения качества лабораторной диагностики предложено использование современных молекулярно-генетических методов исследования, внедрение которых в практическую работу будет способствовать повышению качества экстренной профилактики клещевых инфекций и, в конечном итоге, реальному изменению ситуации в деле снижения заболеваемости трансмиссивными клещевыми инфекциями в регионе.
Разработан алгоритм лабораторных исследований снятых с людей иксодовых клещей для выявления всего спектра возбудителей трансмиссивных клещевых инфекций, циркулирующих в совмещенных природных очагах Иркутской области и тактика проведения профилактических мероприятий.
Результаты исследований легли в основу информационно-методических документов для органов практического здравоохранения Иркутской области: «Эпидемиология и профилактика болезни Лайма в пригородной зоне г. Иркутска» (1996), «Эпидемиология и профилактика болезни Лайма в пригородной зоне г. Ангарска» (1997), «Эколого-эпидемиологическая характеристика природных очагов трансмиссивных инфекций на территории Иркутской области» (2002), «Методические рекомендации «Иксодовый клещевой боррелиоз: тактика клинико-эпидемиологического, лабораторного обследования и профилактика заболевания» (MP 3.2.002-06, Иркутск, 2006).
Результаты работы внедрены в работу Центра диагностики и профилактики трансмиссивных клещевых инфекций ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН.
Полученные данные используются в учебном процессе Иркутского государственного медицинского университета, на курсах повышения квалификации Иркутского института усовершенствования врачей.
Апробация работы
Основные результаты исследований по теме диссертации были представлены: на Международной научной конференции «Вирусные, риккетсиозные и бактериальные инфекции, переносимые клещами» (Листвянка, Иркутск, 1996), четвертом Российско-японском международном медицинском симпозиуме (Иркутск, 1996), VII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 1997), научной конференции «Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера» (Новосибирск, 1998), Всероссийской научно-практической конференции «Природноочаговые инфекции в России: современная эпидемиология, диагностика, тактика защиты населения» (Омск, 1998), интернациональной конференции «Diversity of the Fauna of North Eurasia» (Новосибирск, 2000), Пятом международном форуме по глобальной вакцинологии (Минск, 2001), межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные аспекты природно-очаговых болезней» (Омск, 2001), научной конференции с международным участием «Инфекции человека в начале XXI века: эволюция, новые проблемы, перспективы контроля», посвященной 90-летию ИЭМ (Иркутск, 2002), на первой Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Клещевые боррелиозы» (Ижевск, 2002), VIII съезде Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2002), Второй научной конференции с международным
14
участием «Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего
Востока и Крайнего Севера» (Новосибирск, 2002), на научно-практической
конференции с международным участием «Актуальные вопросы
инфектологии», посвященной 80-летию организации кафедры инфекционных
болезней ИГМУ (2003), Расширенном Пленуме проблемной комиссии РАМН
«Клещевой и другие вирусные энцефалиты» (Москва, 2003), Первой
Всероссийской конференции по вакцинологии «Медицинские.
иммунобиологические препараты для профилактики, диагностики и лечения актуальных инфекций» (Москва, 2004), Всероссийской научно-практической конференции «Эпидемиология, лабораторная диагностика и профилактика вирусных инфекций» (Санкт-Петербург, 2005), Всероссийской научно-практической конференции «Современная ситуация и перспективы борьбы с клещевыми инфекциями в XXI веке» (Томск, 2006), научно-практической конференции по профилактике вирусного клещевого энцефалита (Пермь, 2007).
Основные положения, выносимые на защиту:
Население Иркутской области подвержено высокому риску заражения возбудителями таких клещевых инфекций, как КЭ, ИКБ, КР, МЭЧ и ГАЧ.
Структура популяций возбудителей клещевых инфекций на территории Прибайкалья неоднородна и представлена: тремя генотипами вируса КЭ (восточный, урало-сибирский, западный); двумя геновидами боррелий (В. afzelii и В. garinii); пятью генотипами риккетсий (R. sibirica, R. sp. DnS14, R. sp. DnS28, R. raoidtii, «Candidatus R. tarasevichiae»; двумя видами эрлихий (E. muris, «Candidatus Neohrlichia mikurensfs») и одним видом анаплазм (A. phagocytophilum).
В условиях высокой заболеваемости клещевыми инфекциями, слабого охвата населения вакцинацией против КЭ и низкого уровня проведения неспецифической профилактики возрастает значение экстренной
15 специфической профилактики, осуществляемой после укуса человека клещом - переносчиком инфекции.
Современный подход к экстренной профилактике в совмещенных природных очагах должен носить комплексный характер (т.е. быть направленным против всех известных патогенов, переносимых клещами) и основываться на скрининге лиц, подвергшихся высокой вероятности инфицирования.
Проведение дифференциальной экспресс-диагностики позволяет конкретизировать показания к назначению этиотропных препаратов и повысить на этой основе эпидемиологическую и экономическую эффективность экстренной профилактики КЭ и других клещевых инфекций.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 118 научных работ, в том числе: 1 коллективная монография и 24 статьи в научных журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов докторских диссертаций.
Материалы диссертации вошли в отчеты по научным и хоздоговорным темам, выполненным в отделе природно-очаговых инфекций Института, эпидемиологии и микробиологии Научного Центра медицинской экологии ВСНЦ СО РАМН: «Ландшафтно-эпидемиологическое районирование и оценка эпидемической опасности в отношении КЭ и КБ (болезни Лайма) пригородной зоны г. Ангарска» (1996), «Эпидемиология и профилактика болезни Лайма в пригородной зоне г. Иркутска» (1997), «Экологические и эпидемиологические особенности совмещенных очагов КЭ, мало изученных арбовирусных инфекций и Лайм-боррелиоза на территории Восточной Сибири» (1998), «Цикл работ по КЭ и КБ» (2000), «Эколого-эпидемиологический мониторинг совмещенных очагов трансмиссивных инфекций и эколого-генетический анализ природных популяций вирусных, бактериальных и риккетсиозных патогенов в Восточной Сибири» (2002), «Комплексная эколого-
16 эпидемиологическая и молекулярно-генетическая характеристика возбудителей трансмиссивных клещевых инфекций Восточной Сибири» (2005).
Личный вклад автора:
Автором сформулирована идея выполнения комплексных научных исследований по проблеме дифференциальной диагностики и экстренной профилактики трансмиссивных клещевых инфекций в условиях сочетанных природных очагов, определены цель и задачи работы, проведена информационная проработка темы исследования, выполнен сбор, анализ и обобщение материалов, сделаны выводы. Доли личного участия автора составляют: в получении и накоплении научной информации - 80%, в обобщении, анализе, интерпретации материалов- 100%.
Структура и объем диссертационной работы:
Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 7 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы. Работа изложена на 307 страницах, иллюстрирована 37 рисунками и 40 таблицами. Библиографический указатель содержит 392 источника, из которых 253 работы отечественных и 139 - зарубежных авторов.
Автор выражает глубокую признательность научному консультанту работы академику РАМН Злобину Владимиру Игоревичу, всем сотрудникам Центра диагностики и профилактики трансмиссивных клещевых инфекций, лаборатории молекулярной эпидемиологии вирусов ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН, научным сотрудникам Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск) В.А. Рар и Я.П. Иголкиной, сотрудникам лаборатории трансмиссивных инфекций ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН к.б.н. М.А. Хаснатинову и С.С. Шулунову, сотрудникам Лимнологического института СО РАН (Иркутск) д.б.н. СИ. Беликову и С.Э. Дигас, работнику ФГУЗ Центра гигиены и эпидемиологии в Иркутской области A.M. Антоновой за помощь, оказанную при выполнении данной работы.
