Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 8
1.1. Открытие авермектинов, установление их строения и активности 8
1.2. Механизм действия авермектинов на нематод и членистоногих 16
1.3. Применение авермектинов в борьбе с комнатными мухами и рыжими тараканами , , 21
1.3.1. Применение авермектинов в борьбе с комнатными мухами 21
1.3.2. Применение авермектинов в борьбе с рыжими тараканами 22
1.4. Резистентность комнатных мух и рыжих тараканов к авермектинам 30
1.4.1. Резистентность комнатных мух к авермектинам 30
1.4.2. Резистентность рыжих тараканов к авермектинам 35
1.5. Установление механизмов резистентности к авермектинам комнатных мух и рыжих тараканов 39
1.5.1. Механизмы резистентности комнатных мух к авермектинам 3 9
1.5.2. Механизмы резистентности рыжих тараканов к авермектинам 42
1.6. Перекрёстная резистентность к инсектицидам из других групп химических соединений у комнатных мух и рыжих тараканов, резистентных к авермектинам 44
Экспериментальная часть 48
ГЛАВА 2. Объекты, материалы и методы исследования 48
2.1. Экспериментальные биологические объекты 48
2.1.1. Биология комнатной мухи 48
2.1.2. Эпидемиологическое значение комнатной мухи 50
2.1.3. Разведение исходной чувствительной и экспериментальных рас М. do-mestica 51
2.1.4. Эпидемиологическое значение рыжего таракана 52
2.1.5. Разведение чувствительной расы В. germanica 52
2.2. Материалы для проведения исследований 52
2.3. Краткая характеристика классов химических соединений, использовавшихся в работе 56
2.4. Методы проведения экспериментов 58
ГЛАВА 3. Изучение инсектицидной активности авермектинов в отношении чувствительных насекомых 64
3.1. Изучение контактной инсектицидной активности авермектинов 64
3.1.1. Контактная инсектицидная активность авермектинов в отношении комнатных мух 64
3.1.2. Контактная инсектицидная активность авермектинов в отношении рыжих тараканов 68
3.1.3. Сравнительная видовая чувствительность к авермектинам комнатных мух и рыжих тараканов при использовании топикального метода 71
3.2. Изучение кишечной инсектицидной активности авермектинов в отношении комнатных мух 73
3.2.1. Определение кишечного действия авермектинов с применением сахарных приманок 74
3.2.2. Изучение образца геля «Фитар» в качестве инсектицидной пищевой приманки для комнатных мух 76
ГЛАВА 4. Селекция комнатных мух чувствительной расы cooper авермектинами и характеристики полученных рас
4.1. Изучение скорости развития резистентности при селекции чувствительных мух расы Cooper авермектинами Aj и Аг и аверсектином С 80
4.1.1. Изучение скорости развития резистентности к авермектину A1 80
4.1.2. Изучение скорости развития резистентности к авермектину А2 83
4.1.3. Изучение скорости развития резистентности к аверсектину С 88
4.2. Установление перекрёстной резистентности экспериментальных раскомнатной мухи к различным инсектицидам 94
4.2.1. Применение экспресс-метода с использованием топикального нанесения диагностических концентраций инсектицидов для выявления доли резистентных особей 94
4.2.2. Установление уровня перекрёстной резистентности к инсектицидам методом топикального нанесения с расчётом показателя резистентности 98
ГЛАВА 5. Изучение влияния селекции авермектинами на биологические параметры селектированных рас 101
5.1. Исследование жизнеспособности личинок и куколок экспериментальных рас комнатной мухи 101
5.2. Изучение внешних морфологических аномалий у экспериментальных рас комнатной мухи 108
Заключение 114
Выводы и практические рекомендации 125
Список литературы
- Применение авермектинов в борьбе с комнатными мухами и рыжими тараканами
- Разведение исходной чувствительной и экспериментальных рас М. do-mestica
- Контактная инсектицидная активность авермектинов в отношении комнатных мух
- Изучение скорости развития резистентности к авермектину A1
Введение к работе
Актуальность темы. Комнатная муха - повсеместно распространённое си-нантропное насекомое, являющееся механическим переносчиком возбудителей ряда инфекционных заболеваний человека, в том числе такого опасного заболевания как холера. Для борьбы с мухами требуются эффективные и безопасные стратегии, основными из которых на сегодняшний день являются проведение санитарно-гигиенических мероприятий и применение инсектицидов. Во всём мире к настоящему моменту отмечается неэффективность для комнатных мух ранее широко применявшихся инсектицидов из группы хло-рорганических и фосфорорганических соединений, производных карбамино-вой кислоты и пиретроидов (Рославцева, 2006). Быстрое формирование резистентности мух к старым инсектицидам вызывает необходимость поиска новых веществ, к которым эти насекомые будут чувствительными. Одной из перспективных групп для внедрения в схему борьбы с комнатными мухами являются авермектины, обладающие широким спектром биологического действия. В настоящее время они применяются для борьбы с другими синан-тропными насекомыми - тараканами и муравьями, а также другими членистоногими, имеющими эпидемиологическое и санитарно-гигиеническое значение (Strong, Brown, 1987; Хрусталёва, Дриняев, 2002). Благодаря своему механизму действия, принципиально отличающемуся от механизмов действия большинства ранее использовавшихся инсектицидов, авермектины могут занять своё место в программе ротации инсектицидов при борьбе с популяциями комнатных мух.
Цель работы. Исследование скорости развития резистентности комнатной мухи к авермектинам А\ и А2 и к авермектиновому комплексу (аверсектину С) в лабораторных условиях и установление возможности их использования в борьбе с этим насекомым.
Задачи исследования. Для достижения цели нами были поставлены следующие задачи:
Определение уровня чувствительности лабораторной расы комнатной мухи к индивидуальным авермектинам и авермектиновому комплексу.
Изучение скорости развития резистентности к авермектинам при селекции чувствительной лабораторной расы комнатной мухи.
Исследование перекрёстной резистентности мух селектированных рас к природным авермектинам и к инсектицидам из других классов химических соединений.
Изучение некоторых биологических характеристик рас комнатной мухи после селекции (жизнеспособность личинок и куколок, наличие видимых морфологических изменений у имаго).
Научная новизна. Впервые определена сравнительная инсектицидность авермектинового комплекса (аверсектина С) и его компонентов для М. domes tica и рассчитаны их диагностические концентрации для использования при оценке доли резистентных мух в популяциях.
Впервые изучена скорость развития резистентности к авермектинам А! и А2 и аверсектину С у комнатной мухи в лабораторных условиях. Впервые показано, что перекрёстная резистентность к инсектицидам из других групп у мух, селектированных авермектинами А\ и А2 и аверсектином С , не возникает даже после длительной селекции.
Впервые рассмотрено влияние длительной селекции авермектинами на некоторые биологические параметры М. domestica. Положения, выносимые на защиту
Авермектины проявляют высокую активность в отношении комнатных мух как при контактном, так и при кишечном действии. При топикаль-ном нанесении наибольшей инсектицидностью обладает авермектино-вый комплекс (аверсектин С).
Резистентность к авермектиновому комплексу (аверсектину С) и авермектинам Ai и А2 у комнатной мухи при длительной селекции в лабораторных условиях развивается крайне медленно. Тем не менее, после
длительной селекции аверсектином С у мух возникает групповая толерантность к авермектинам.
Селекция комнатных мух аверсектином С и авермектинами Ai и А2 не приводит к формированию перекрёстной резистентности к ФОС, производным карбаминовой кислоты, пиретроидам, фенилпиразолам, не-оникотиноидам и спиносинам, но может влиять на жизнеспособность личинок и куколок экспериментальных рас.
Длительная селекция авермектинами не приводит к достоверному повышению частоты появления новых наружных морфологических изменений у комнатных мух, в сравнении с таковой у исходной чувствительной расы.
Апробация работы. Результаты работы докладывались на конференциях, посвященных 70-летию (Московская область, 2003) и 75-летию (Москва, 2008) ФГУН "НИИ дезинфектологии", IX съезде Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2007), на XIII съезде РЭО (Краснодар, 2007), VI международной конференции по городским вредителям ICUP (Будапешт, 2008), на межлабораторных семинарах, заседаниях Методической комиссии по проблемам дезинсекции и дератизации и заседаниях Учёного совета НИИ дезинфектологии (2003-2008 гг.).
Публикации. По материалам диссертации опубликованы десять работ, из них четыре - статьи и шесть — тезисы в сборниках материалов съездов и конференций.
Структура и объём диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы», трёх глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений списка использованной литературы и приложения. Работа включает 19 таблиц и 7 рисунков. Диссертация изложена на 143 листах печатного текста. Список цитированной литературы состоит из 38 отечественных и НО зарубежных источников.
Применение авермектинов в борьбе с комнатными мухами и рыжими тараканами
Литературных данных по применению авермектинов в борьбе с комнатными мухами крайне мало, и все они поступили из США.
Проведена оценка активности ивермектина (МК-933) в отношении личинок комнатных мух. Выявлено, что при ежедневном пероральном поступлении в организм животных капсул, содержащих ивермектин в дозе 5 мкг/кг, в навозе от обработанных животных погибали более 90% развивающихся личинок, в то время как доза, равная 1 мкг/кг, оказалась значительно менее эффективной (Miller et al., 1981). Таким образом, показано, что ивермектин обладает выраженными ларвицидными свойствами в отношении комнатных мух.
Была установлена токсичность абамектина для мух чувствительной расы NAIDM при подсадке в обработанные стеклянные ёмкости объёмом 450 мл (Roush, Wright, 1986). Через 48 ч рассчитанная величина среднесмертель-ной концентрации (СК5о) составила 7,3 мкг/ёмкость.
Также для мух расы NAIDM оценили продолжительность остаточного действия абамектина, нанесённого на фанеру (Geden et al., 1990). Мух на 2 ч подсаживали на обработанную поверхность и учитывали их смертность через 48 ч, затем опыт повторяли через определённые промежутки времени. Было установлено, что при подсадке на неокрашенную фанеру, обработанную аба-мектином в концентрации 0,1%, смертность мух в течение 4 недель превышала 90% и была выше 70% даже спустя 7 недель. При концентрации 0,05% хорошее остаточное действие абамектина сохранялось в течение двух недель, но при более низких концентрациях он становился практически неэффективным уже через три дня после нанесения. При подсадке мух на фанеру, окрашенную в белый цвет, с использованием тех же концентраций абамектина его эффективность была высокой только при концентрации 0,1%. Таким образом, было показано, что абамектин может обладать длительным остаточным действием при нанесении на поверхность.
В той же лаборатории рассмотрели токсичность абамектина, нанесённого на фанеру, для мух другой чувствительной расы - S2R (Geden et al., 1992). Смертность насекомых, как и в предыдущем исследовании, учитывали через 48 ч, но время экспозиции изменилось и составило 90 мин. В концентрациях 0,1% и 0,05% абамектин оказался высокоэффективным и в отношении мух этой расы. Были рассчитаны также величины СК5о и СК95 (концентрация, от которой в опыте погибают 95% особей), которые составили 0,018% и 0,063%, соответственно.
В отношении личинок М. domestica, развивающихся в навозе, оценили также эффективность препарата на основе ивермектина, предназначенного для инъекций КРС (Wardhaugh et al., 1996). Установлено, что за первую неделю, прошедшую после обработки животных, смертность личинок практически не повышалась, а заметное снижение их численности происходило только в течение второй недели.
Итак, из результатов исследований, приведённых в немногих обнаруженных нами литературных источниках, следует, что авермектины обладают выраженной ларвицидной активностью в отношении комнатных мух и длительным остаточным действием на поверхности (фанера). Сведения по использованию авермектинов в качестве приманок для мух в доступной нам литературе отсутствуют. Также нигде не обнаружены сравнительные данные по контактной токсичности авермектинов для этих насекомых при топикаль-ном нанесении.
Самое раннее из обнаруженных нами в литературе исследований, где обсуждался вопрос о применении авермектинов для борьбы с рыжими тараканами, было проведено в США (Wright, Dupree Jr., 1985). Места возможного обитания тараканов в кухнях жилых домов обрабатывали авермектинами в концентрациях 0,02% и 0,1%. В обоих вариантах смертность тараканов при учётах через 2, 4 и 8 недель оставалась очень высокой, и, таким образом, авермектины оказались пригодными для борьбы с тараканами в помещениях.
На чувствительной лабораторной расе было изучено воздействие авер-мектина В[ на репродуктивную функцию тараканов (Cochran, 1985). Установлено, что смертность самок тараканов при предоставлении им корма, обработанного ацетоновым раствором авермектина В і в концентрации 0,00065% и выше, была высокой через 10 дней после начала эксперимента, а выжившие особи становились стерильными. Более низкие концентрации подавляли спаривание и размножение, но не у всех особей, а более высокие приводили к снижению количества потребляемого корма из-за высокой смертности насекомых. Для самцов подобная зависимость не была выявлена. Нимфы младших возрастов оказались более чувствительными к авермектину В], чем нимфы старших возрастов. На основании полученных результатов автор предложил использовать авермектин В і в производстве приманок для борьбы с рыжими тараканами.
Первая из известных приманок для тараканов, в состав которой был введён абамектин, - Avert в виде порошка - была испытана на чувствительных рыжих тараканах расы Orlando normal в лаборатории в опытах без предоставления альтернативного корма (Koehler et al., 1991). Величины ЛТ5о (время, за которое погибают 50% экспериментальных особей) при концентрациях абамектина от 0,0025% до 0,05%» для самцов составили 1,7-4,4 дней, для самок - 2,4-9,0 дней, а для нимф - 1,6-4,4 дней. Величины СК5о через 3 и 6 дней составляли для самцов 0,0110% и 0,0040%, для самок - 0,0240% и 0,0090%, а для нимф - 0,0200% и 0,0080%, соответственно. Добавление в рацион тараканов альтернативного корма не приводило к снижению смертности насекомых: все тараканы погибали спустя 5 дней. В экспериментах с аренами, в которые помещали приманку с содержанием абамектина 0,0550%, смертность смешанной группы тараканов через 9 дней составляла 31-75%.
Разведение исходной чувствительной и экспериментальных рас М. do-mestica
Рыжий таракан, как и комнатная муха, является механическим переносчиком возбудителей различных инфекций. Из-за того, что тараканы много времени уделяют чистке своего тела, так называемому автогрумингу (Bobula Smith, Valentine, 1985), основная масса возбудителей находится в их кишечнике и распространяется через экскременты или при отрыгивании части содержимого зоба. Основными факторами, способствующими распространению возбудителей инфекций рыжими тараканами, являются всеядность этих насекомых (Бей-Биенко, 1950), их высокая миграционная способность (Cornwell, 1968), а также автокопрофагия - вторичное потребление конспе-цифическими особями экскрементов (Жужиков, 2001). Согласно данным, полученным отечественными и зарубежными исследователями (Жужиков, 2005), рыжие тараканы переносят возбудителей различных кишечных инфекций, в том числе холеры, внутрибольничных инфекций, споры патогенных грибов, цисты простейших и яйца гельминтов. Помимо распространения возбудителей инфекций, тараканы являются источником мощных аллергенов и могут механически повреждать кожные покровы людей.
Разведение чувствительной расы В. germanica Чувствительную к инсектицидам расу рыжего таракана (SHHHA), ис пользовавшуюся в наших экспериментах, многие годы разводят в инсектарии ФГУН НИИ дезинфектологии. Тараканов содержали в отдельном помещении в стеклянных банках объёмом около 20 л при температуре 27±2С и относи тельной влажности воздуха около 70%. 2.2. Материалы для проведения исследования В работе были использованы инсектициды из следующих химических классов: 1) авермектины: аверсектин С, абамектин, авермектины Аь А2, В і и В2; 2) фосфорорганические соединения (ФОС): трихлорфон (хлорофос), хлорпирифос, диазинон и фентион (сульфидофос); 3) производные карбаминовой кислоты (карбаматы): метомил и про-поксур; 4) пиретроиды: перметрин, дельтаметрин, циперметрин и альфаципер-метрин; 5) фенилпиразолы: фипронил; 6) неоникотиноиды: тиаметоксам и ацетамиприд; 7) спиносины: спиносад.
Химические названия использованных инсектицидов из групп ФОС, карбаматов и пиретроидов приведены по Н.Н. Мельникову с соавт. (1995), названия абамектина, аверсектина С и инсектицидов из групп фенилпиразо-лов, неоникотиноидов и спиносинов - по СР. Белан с соавт. (2001) и А.Ф. Грапову (2006). После названий приводятся субстанции, использовавшиеся в экспериментах, с указанием их концентрации и производителя (или страны производства).
Аверсектин С: природный комплекс авермектинов, продуцируемый почвенным актиномицетом Streptomyces avermitilis. Содержит (в %) авермек-тины Aia 8-12, А2а 17-23, Bja 40-45, В2а 17-23 (в сумме 90%), Alb, A2b, В1Ь, В2ь (в сумме 10%). В работе использовали 20% высокоочищенный эмульгирующийся концентрат (ЭК) аверсектина С (ООО НБЦ «Фармбиомед», Россия).
Абамектин: смесь 80% авермектина В]а — (10E,14E,16E,22Z)-(lR,4S,5,S,6S,6,S,8R,12S,20R,21R,24S)-6,[O-BTop.6yT -21,24-flHraflpoKCH-541,13,22-тетраметил-2-оксо-3,7,19-триоксатетрацикло-[15.6.1.14 8.020,24]пентакоза-10,14,16,22-тетраен-6-спиро-2 -(5,,6,-дигидро-2,Н-пиран)-12-ил-2,6-дидезокси-4-0-(2,6-дидезокси-3 -О-метил-а-Ь-арабино-гексопиранозил)-3-0-метил-сс-Ь-арабино-гексопиранозида и 20% авермектина Bib - (10E,14E,16E,22Z)-(1RJ4S,5,S,6S,6,R98R,12S,20R,21R,24S)-21,24-дигидрокси-6 -изопропил-5 ,11,13,22-тетраметил-2-оксо-3,7,19 54 триоксатетрацикло-[15.6.1.14 8.020 24]пентакоза-10,14,16,22-тетраен-6-спиро-2 -(5 ,б -дигидро-2 Н-пиран)-12-ил-2,6-дидезокси-4-0-(2,6-дидезокси-3-0-метил-а-Ь-арабино-гексопиранозил)-3-0-метил-а-Ь-арабино-гексопиранозида. 92,4% абамектин (МК-936), использовавшийся в нашей работе, был произведён корпорацией «Сингента».
В работе использовали хроматографически чистые компоненты авер-мектинового комплекса в разных исходных концентрациях: авермектин Aj (1 мг/мл и 3 мг/мл); авермектин Аг (1 мг/мл и 3 мг/мл); авермектин В (5,5 мг/мл, 1 мг/мл и 3 мг/мл); авермектин Щ (6,26 мг/мл, 1 мг/мл и 3 мг/мл). Все индивидуальные авермектины были произведены и предоставлены ООО НБЦ «Фармбиомед» (Россия). Для определения видовой чувствительности насекомых и уровня перекрёстной резистентности комнатных мух использовали ДВ и препараты на их основе из различных классов химических соединений. Фосфорорганические соединения: трихлорфон (хлорофос): (1-гидрокси-2,2,2-трихлорэтил)-0,0 диметилфосфонат - 97% технический продукт (Россия); хлорпирифос: 0-(3,5,6-трихлорпиридил-2)-0,0-диэтилтиофосфат -99% технический продукт (Dursban R; компания «Дау АгроСайенсес»); диазинон: 0-(2-изопропил-6-метилпиримидин-4-ил)-0,0 диэтилтиофосфат -60% ЭК (фирма "Август", Россия); фентион (сульфидофос): 0,0-диметил-0-(3-метил-4 метилтиофенил)тиофосфат - 90% технический продукт (корпорация «Жанг Кемикал Корп.», Китай). Производные карбаминовой кислоты (карбаматы): метомил: 8-метил-г [-(метилкарбамоилокси)тиоацетимидат - 98,2% технический продукт (компания «Шанхай Шенг Агрокемикал Ко Лтд.», Китай); пропоксур: (2-изопропоксифенил)-М-метилкарбамат - 99% технический продукт (фирма «Байер», Германия). Пиретроиды: перметрин: (1 RS)-i}uc, транс-3-(2,2-дихлорвттп)-2,2 диметилциклопропанкарбоновой кислоты 3-феноксибензиловый эфир — 92% технический продукт с соотношением цис- и транс-изомеров 25:75 (фирма «Шарда Интернэшнл», Индия); дельтаметрин: (1К)-г/ис-3-(2,2-дибромвинил)-2,2 диметилциклопропанкарбоновой кислоты (8)-3-фенокси-а-цианбензиловый эфир - 98,1% технический продукт (фирма «Тагрос Кемикалс», Индия); циперметрин: (1К8)-г/ис,трянс-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2 димеилциклопропанкарбоновой кислоты (118)-3-фенокси-а-цианобензиловый эфир - 95% технический продукт (фирма «Шарда Интернэшнл», Индия); альфациперметрин: смесь (1:1) изомеров циперметрина: (S)-a-iraaHO-3 феноксибензилового эфира (И1)-г/иоЗ-(2,2-дихлорвинил)-2,2 диметилциклопропанкарбоновой кислоты и -а-циано-3 феноксибензилового эфира (18)- ис-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2 диметилциклопропанкарбоновой кислоты - 98,0% технический продукт (фирма «Ротам Групп Индия Лтд.», Индия).
Контактная инсектицидная активность авермектинов в отношении комнатных мух
Приманочный метод в настоящее время широко используется в борьбе с комнатными мухами во всём мире. В нашей стране известны приманки для уничтожения мух на основе хлорофоса (МУ № 28-6/3, 1984), метомила («Мускачид», «Метокил» и др.), азаметифоса (таблетки «Альфа-цид»), тиаметоксама («Агита» и «Адамант - приманка от мух»).
Изучение кишечного действия авермектинов на комнатных мух нами проведено с использованием сахарного песка, обработанного ацетоновыми растворами разных концентраций авермектинов. Результаты экспериментов приведены в табл. 6.
На основании полученных данных нами сделан вывод, что авермек-тины обладают высокой кишечной активностью в отношении имаго комнатной мухи, однако их действие замедлено и проявляется лишь спустя 72 ч. Ряд активности этих инсектицидов в порядке убывания показателей СК50 выглядит следующим образом: авермектин А2 абамектин аверсектин С авермектин А] авермектин В! авермектин В2. Кишечная активность авермектина А2 и абамектина практически одинакова и различается недостоверно при уровне вероятности Р 0,05. Также при данном уровне вероятности нет достоверного различия в активности между авермектинами В і и В2, хотя авермектин В і в 1,8 раза активнее авермектина В2, и авермектинами Ai и А2. Абамектин в пять раз активнее авермектина В і и в 9,2 раза активнее авермектина В2, причём это различие статистически достоверно при выбранном уровне вероятности. Активность аверсектина С достоверно не отличалась от активности других авермектинов, за исключением таковой авермектина В2 на уровне СК50.
В порядке убывания показателей СК95 ряд активности изученных авермектинов выглядит следующим образом: авермектин А2 авермектин Ai авермектин В і абамектин авермектин В2. Авермектин А2 был достоверно токсичнее всех авермектинов, за исключением авермектина Aj. Смертность комнатных мух от аверсектина С через 72 ч при максимальной использованной в опыте концентрации составляла менее 95%, поэтому величину данного показателя можно было оценить лишь приблизительно: она находится в промежутке между величиной СК95 для авермектинов В і и В2. Расчёт этого показателя через 96 ч выявил, что его величина совпадает со значением СК95 для абамектина при учёте смертности через 72 ч. Кишечная активность авермектина В і в 1,6 раза выше активности абамектина и в 4,3 раза выше активности авермектина В2, причём эти различия статистически достоверны при уровне вероятности Р 0,05.
Рассчитанные величины tga (табл. 6) свидетельствуют о том, что при кишечном введении мухи расы Cooper оказались наименее гетероген ными по отношению к абамектину. Далее, в порядке уменьшения величины tga, следовали авермектины В2 и А2. Наиболее гетерогенными мухи были по отношению к авермектину А] и аверсектину С.
Таким образом, наиболее активным в отношении имаго комнатной мухи при кишечном пути введения, как показали расчёты величин СК50 и СК95, оказался авермектин А2, а наименее активным - авермектин В2. Согласно величинам тангенсов угла наклона кривых «концентрация-смертность», наиболее гетерогенными мухи были по отношению к авермектину Аь а наименее гетерогенными - к абамектину.
При сравнении контактного и кишечного действия авермектинов на комнатных мух (табл. 1 и 6) становится очевидным, что мухи Cooper менее гетерогенны по отношению к этим инсектицидам при топикальном нанесении, согласно рассчитанным величинам тангенсов угла наклона кривых «концентрация-смертность». Интересно, что к абамектину при обоих путях его поступления в организм мухи оказались почти одинаково наименее гетерогенными, тогда как в отношении высокоочищенного авермектина В і такой зависимости не наблюдали.
Известно, что в России аверсектин С с успехом используют в качестве ДВ в отечественных средствах борьбы с рыжим тараканом - пищевой приманке «Унитар» (Хрусталёва, Рославцева, 1998) и пасте «Фитар» (Хру-сталёва, Дриняев, 2002). Однако для борьбы с комнатными мухами подобных средств на аверсектине С и других авермектинах в настоящее время в мире нет. Мы считаем, что авермектины могут использоваться в качестве кишечных инсектицидов для борьбы не только с тараканами, но и с комнатной мухой. Исходя из экономических соображений, мы предположили, что приманки для борьбы с мухами целесообразно производить на основе авермектинового комплекса (аверсектина С). Это соединение по своей кишечной активности в отношении комнатной мухи лишь в два раза уступает абамектину, но, в отличие от него, производится в России и безопаснее для теплокровных животных. Кроме того, у природных популяций и лабораторных рас комнатной мухи до сих пор не была выявлена резистентность к аверсектину С, тогда как за рубежом в лабораторных условиях получены данные о возникновении резистентности мух к абамектину (Scott et al., 1991).
Для проверки этого предположения нами были проведены исследования по оценке эффективности геля «Фитар» производства ООО НБЦ «Фармбиомед» (Москва), содержащего 0.12% аверсектина С и предназначенного для борьбы с синантропными тараканами и муравьями, в отношении комнатных мух расы Cooper.
Изучение скорости развития резистентности к авермектину Ai
При анализе данных, представленных в табл. 7 и 8, обращает на себя внимание тот факт, что при нанесении на бумагу меньшего количества геля (0,5 г) мухи в первые 96 ч погибали достоверно быстрее, чем при нанесении его большего количества (1,0 г). Наибольшая смертность на четвёртые сутки в первом варианте наблюдалась в садке с пластинкой, на которую наносили только гель. Этот результат достоверно отличался от двух других - при наличии на пластинке силуэта мухи либо при наличии на ней приклеенной мухи. Однако в течение первых двух суток наибольший прирост смертности наблюдался в садке с приклеенной к пластинке мухой: в сравнении с первыми сутками на вторые здесь погибло в три раза больше мух. По прошествии 96 ч смертность мух резко не возрастала. По-видимому, имело место естественное отмирание мух, так как в опыте по определению кишечной активности аверсектина С их гибель наступала именно спустя 96 ч. В целом, можно сказать, что при нанесении на бумагу 0,5 г геля не было обнаружено досто 79 верного различия в предпочтении мухами вариантов с нарисованным силуэтом мухи, с приклеенной мухой или с чистой бумагой.
В опытах с нанесением на бумагу 1,0 г геля в течение 96 ч наблюдалась гораздо меньшая смертность мух, что могло быть связано с репеллентным действием аверсектина С. Тем не менее, в этот период они погибали достоверно быстрее в варианте с наклеенной на бумагу мухой. После 96 ч смертность насекомых становилась приблизительно одинаковой во всех вариантах опыта. Гибель мух при нанесении на бумагу 1,0 г геля происходила значительно позже, чем при нанесении 0,5 г, что, вероятно, также может быть следствием снижения количества поглощённого вещества из-за его отпугивающего или антифидантного эффекта.
Таким образом, установлено, что гель «Фитар» на основе аверсектина С, высокоактивный в отношении рыжих тараканов и синантропных муравьев, проявляет достаточно высокую кишечную активность и в отношении комнатных мух. Сделанное нами предположение о целесообразности использования аверсектина С в борьбе с комнатными мухами получило экспериментальное подтверждение. Однако, с учётом возможного репеллентного или антифидантного эффекта этого геля, следует ввести в его состав привлекающие мух вещества, например, половой феромон цис-9-трикозен и, кроме того, подобрать необходимую концентрацию средства и норму его расхода на единицу поверхности.
В доступной нам литературе данные о развитии резистентности комнатной мухи к авермектинам при селекции лабораторной чувствительной расы отсутствуют. В США в результате лабораторной селекции абамектином была получена высокорезистентная к этому соединению раса AVER (Scott et al., 1991), однако мухи для селекции были собраны на объектах, где регулярно проводили обработки инсектицидами, поэтому чувствительными их назвать нельзя. Кроме того, этих мух селектировали другим методом - путём подсадки на обработанную поверхность.
Изучение скорости развития резистентности к авермектину Ai
Данные по изучению длительного воздействия авермектина Aj на М. domestica отсутствуют как в отечественной, так и в зарубежной литературе. С целью изучения скорости развития резистентности комнатной мухи к авермектину А], нами впервые была проведена селекция чувствительной расы Cooper (исходное поколение обозначено буквой «Р»). Селектируемая раса получила название AVMai. Поколения, в которых проводили селекцию, методы селекции, использованные концентрации и величина смертности экспериментальных насекомых приведены в табл. 9.
Селекцию исходного поколения (Р) и двух последующих поколений (Fi и F2) осуществляли с помощью метода топикального нанесения инсектицида в 0,0002% концентрации. Смертность мух составила соответственно 75, 58 и 34%, то есть устойчивыми в популяции оказались 25, 42 и 66% особей, поэтому мух из следующих четырёх поколений (F3_6) селектировали методом погружения. Мух из поколения F3 селектировали, используя две концентрации - 0,001% (смертность составила 86%) и 0,0005% (смертность составила 74%). Мух из поколений F4 и F5 селектировали, также используя 0,0005% концентрацию — смертность составила соответственно 84 и 97%.
