Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. АНАЛИЗ МЕТОДОВ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ ПРОДОВОЛЬСТВЕННОГО ЗЕРНА И ПРОДУКТОВ ЕГО ПЕРЕРАБОТКИ С ЦЕЛЬЮ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ РАЗВИТИЯ СПОРОВЫХ БАКТЕРИЙ И ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ 9
1.1. Возбудители плесневения и картофельной болезни хлеба 9
1.2. Существующие методы предупреждения развитая споровых бактерий и фиопатогенных грибов 17
ГЛАВА 2. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ ПРОДУКТОВ ПЕРЕРАБОТКИ ЗЕРНА ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫМ ПОЛЕМ СВЧ 33
2.1. Обоснование и выбор параметров СВЧ-обеззараживания продуктов переработки зерна
2.2. Планирование эксперимента обеззараживания продуктов переработки зерна СВЧ-полем ог
2.3. Методика проведения лабораторно-производственных исследований по обеззараживанию продуктов переработки зерна СВЧ-полем ^
ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЯ ВЛИЯНИЯ СВЧ-ЭНЕРГИИ НА МИКРОФЛОРУ И БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ ЗЕРНОВОВЫХ ПРОДУКТОВ 51
3.1. Влияние СВЧ-энергии на микрофлору и биохимический состав дробленого зерна 53
3.2. Влияние СВЧ-энергии на микрофлору и биохимический состав муки 71
3.3. Влияние СВЧ-энергии на микрофлору пищевых отрубей , 102
ГЛАВА 4. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ ПРОДУКТОВ ПЕРЕРАБОТКИ ЗЕРНА ЭНЕРГИЕЙ СВЧ-ПОЛЯ 112
4.1. Расчет капиталовложений и эксплуатационных расходов на СВЧ-обеззаражи-вание зерна 114
4.2. Расчет показателей экономической эффективности обеззараживания зерна пшеницы 118
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ 121
ЛИТЕРАТУРА 123
- Существующие методы предупреждения развитая споровых бактерий и фиопатогенных грибов
- Обоснование и выбор параметров СВЧ-обеззараживания продуктов переработки зерна
- Влияние СВЧ-энергии на микрофлору и биохимический состав дробленого зерна
Введение к работе
Проблема получения хлебопекарной продукции с низкими показателями микробиологической обсемененности в последние годы встречается повсеместно. Заболевание хлеба картофельной болезнью и плесневение - распространенный вид микробиологической порчи хлебобулочных изделий. Хлеб, оставаясь основным продуктом питания различных групп населения, нередко является источником фитотоксинов, продуцентами которых являются патогенные микроорганизмы, заселяющие зерно а период вегетации, уборки и хранения. Современное ухудшающееся состояние сельского хозяйства требует кардинального решения проблемы стабилизации растениеводства, улучшения фитосанитарного состояния сельскохозяйственных угодий и стабилизации общей экологической обстановки. В последние годы значительно увеличилось число товарных партий зерна пшеницы и других культур, пораженных споровой бактериальной и грибной инфекциями [72, 73, 74, 94]_ Наряду с традиционными вредоносными заболеваниями (головневые, корневые гнили, ржавчина, мучнистая роса) усилилось эпифитотийное значение фузариоза колоса. Это обуславливет значительные потери зерна до 3-4 млн тонн ежегодно и снижение биологической ценности и безопасности зерно-продуктов. Пораженный различными болезнями хлеб с изменениями биохимического состава становится не пригодным к употреблению и является опасным источником токсичной инфекции.
Заболевание хлеба картофельной (тягучей) болезнью вызвано развитием в хлебе спорововых бактерий рода Bacillus. Подобные случаи поражения хлеба, которые ранее отмечались только в южных районах, в настоящее время встречаются практически во всех регионах. Пораженный хлеб не пригоден в пищу и подлежит уничтожению.
Проблема предупреждения заболевания хлеба картофельной болезнью и плесневения хлеба состоит из следующих аспектов. Расширение сети малых предприятий, а также уменьшение технологических затрат на предприятиях большой мощности приводит к сокращению технологического периода брожения полуфабрикатов, при котором кислотность хлеба уменьшается, что способствует
повышению возможности заболевания его тягучей болезнью. В производстве хлеба для диетического питания с высоким содержанием отрубей или зерна при одновременном снижении кислотности вероятность заболевания также возрастает.
Заболевание хлеба картофельной болезнью и плесневение - стали самыми распространенными видами микробиологической порчи хлебобулочных изделий. Любая зерновая масса содержит от нескольких тысяч до десятков миллионов микроорганизмов на один грамм зерна. Поэтому зерно в первую очередь является источником заболевания хлеба. В муку бактерии попадают при размоле зерна. Заражение зерна микроорганизмами происходит через внешнюю среду, изолировать от которой зерно невозможно. Вот почему при хранении и переработке зерна необходимо создать такие условия, которые препятствовали бы росту и размножению микроорганизмов, а также накоплению их метаболитов.
Хлеб, поражённый картофельной болезнью, не пригоден к употреблению. Он является опасным источником инфекций, вызывает тяжелые расстройства организма человека и животных. Это связано с образованием токсина, вырабатываемого бактериями. Заражение хлеба картофельной болезнью приводит к целому ряду нежелательных последствий, среди которых выделим наиболее существенные: предприятия мукомольной и хлебопекарной промышленности несут крупные финансовые убытки из-за непригодности муки и хлеба к употреблению; клиенты отказываются от последующих закупок; значительный ущерб наносится репутации предприятий и они несут дополнительные затраты на осуществление мер по комплексной очистке оборудования, влекущих за собой остановку производственного процесса на продолжительное время»
В таких случаях технологией предусмотрено применение улучшителей, содержащих ингибиторы и подкисляющие вещества, органические кислоты и их соли, пищевые добавки.
В целях сохранения свежести хлеба и предотвращения его микробиологической порчи в хлебопекарной промышленности применяются также различные подкислители. Перспективным и широко применяемым является биологический способ, основанный на культивировании в мучных средах микроорганизмов с об-
5 разованием органических кислот, антибиотиков и других протекторов» Однако для малых предприятий этот способ практически не возможен, потому что требует непрерывного технологического режима производства, дополнительных затрат на приобретение и обслуживание технологического процесса.
Существенный вред представляет также плесневение хлеба, возбудителем, которого выступают сапрофитные грибы; большая часть из них продуцирует метаболиты, токсичные для человека и животных и ухудшающие хлебопекарные свойства зерна.
В основном микрофлора трибов представлена грибами родов РепісіШшп и Mucor. Установлена линейная зависимость между количеством спор грибов в муке и активностью их в процессе хранения в хлебе. По данным Ф.М Кветного, Р.Д. Поландовой, количество спор грибов в муке находится от 200 до 1500 КОЕ/г, что вызывает плесневение хлеба на третьи сутки после выпечки.
Применение пищевых добавок, консервантов и других химических препаратов не позволяет получить экологически чистый хлеб надлежащего качества. Поэтому поиск и применение дешёвых и экологически безопасных способов, продлевающих срок хранения и сохранность его первоначального качества и вкуса, наиболее актуальный вопрос в хлебопекарной отрасли. Одним из методов обеззараживания продовольственного зерна и продуктов его переработки является обработка энергией электромагнитного поля сверхвысокой частоты (ЭМП СВЧ) При использовании данного метода возможно создание экологически чистых, энергосберегающих технологий переработки зерна и получения качественных продуктов питания.
Цель работы:
Определение биологической эффективности обеззараживания зерновых продуктов электромагнитным полем СВЧ для улучшения их качества и обеспечения безопасного потребления человеком.
Основные задачи: Провести анализ видового разнообразия и вредоносности споровой бактериальной и грибной микрофлоры, заселяющей продукты из зерна, и методов предупреждения ее развития.
Разработать методики проведения лабораторных, лабораторно-производственных исследований по обеззараживанию муки, дробленого зерна и пищевых отрубей в ЭМП СВЧ.
Определить особенности влияния ЭМП СВЧ на микрофлору муки.
Определить особенности влияния ЭМП СВЧ на микрофлору дробленого зерна для производства зернового хлеба и пищевых отрубей.
Установить особенности влияния ЭМП СВЧ на хлебопекарные качества муки и дробленого зерна.
Обосновать экономической эффективности использования экологически чистого метода обеззараживания продуктов переработки зерна энергией СВЧ-поля.
Объект исследования:
Зерновые продукты одной помольной партии: дробленое зерно, мука пшеничная хлебопекарная 1-го сорта, отруби пищевые.
Предмет исследования:
Особенность влияния параметров СВЧ-поля на ответную реакцию микроорганизмов, технологических свойств зернового сырья для хлебопекарной промышленности.
Научная новизна:
Обоснованы теоретические положения СВЧ-обеззараживания зерновых продуктов.
Адаптирована методика обеззараживания муки, дробленого зерна, отрубей от споровой бактериальной и грибной микрофлоры СВЧ-полем.
Установлены причинные и функциональные связи влияния СВЧ-поля на микроорганизмы бактериальной и грибной этиологии в дробленом зерне, муке и пищевых отрубях, а также их физико-химические и хлебопекарные показатели качества.
Практическая значимость:
Проверены эффективные режимы СВЧ-обеззараживания дробленого зерна, отрубей, муки от споровой бактериальной и грибной микрофлоры, позволяющие улучшить их хлебопекарные качества и получить экологически чистый продукт.
Результаты исследований могут быть использованы при разработке и проектировании лабораторного и промышленного образцов СВЧ-установок для обеззараживания зерна от споровой бактериальной и грибной микрофлоры. Используются в учебном процессе, а также при курсовом и дипломном проектировании биологического факультета Челябинского государственного университета.
Методика обеззараживания муки, дробленого зерна, пищевых отрубей от споровой бактериальной и грибной микрофлоры внедрена на ОАО «Первый Хлебокомбинат» (г, Челябинск)»
Защищаемые положения:
Теоретические положения и методика лабораторно-производственного эксперимента доя СВЧ-обеззараживання муки, дробленого зерна, отрубей от споровой бактериальной и грибной микрофлоры,
Результаты исследования влияния ЭМП СВЧ на процесс обеззараживания муки, дробленого зерна, отрубей от споровой бактериальной и грибной микрофлоры.
Результаты влияния СВЧ-энергии на физико-химические показатели и хлебопекарные свойства муки и зерна.
Существующие методы предупреждения развитая споровых бактерий и фиопатогенных грибов
Опыты ВНИИЗ [81] показали, что на зерне в период вегетации и полной зрелости были обнаружены буквально единицы спор бактерий и грибов (3-7 спор на 1 г зерна). Тогда как на зерне после его отделения от растения было обнаружено от 23 до 33 спор на 1 г. По мере прохождения зерном дальнейших этапов его сельскохозяйственной обработки количество спор на 1 г зерна возросло до 300, т.е. увеличилось в 10 раз [27-29,113-114,122,124].
Изучение качественного состава споровой микрофлоры зерна показало, что основную массу споровых бактерий составляют микроорганизмы, близкие к Bacillus mesentericus, по данным - 75-95%,[117,118,120]
Развитие этого микроба находится в тесной связи с самосогреванием зерна, то есть оптимальная температура для развития картофельной палочки совпадает с температурой, часто наблюдаемой в греющемся зерне, когда влажность зерна превышает 20% и температура достигает 40С и более.
Мероприятия по качественной сохранности и улучшению санитарного состояния партий продовольственной пшеницы и муки при хранении предусмотрены «Инструкцией по хранению продовольственного зерна, масла семян, муки и крупы»; «Правилами организации и ведения технологического процесса на элеваторах и хлебоприемных и мукомольных предприятиях» [43,58,59].
Зерно, поступающее на предприятие, подвергают очистке от зерновой и сорной примесей до требований, отвечающих целевому назначению.
В целях обеспечения сохранности зерна проводят его сушку. Зерновые сушилки используют также для оздоровления зерна при повышении температуры или обнаружении зараженности вредителями.
Обработка поверхности зерна проводится сухим и мокрым способами; сухой способ предусматривает обработку поверхности зерна в обоечных щеточных, шелушильных машинах; мокрый - в моечных машинах и машинах для мокрого шелушения. Эффективность обработки поверхности зерна характеризуется снижением его зольности при ограничении увеличения количества битых зерен [31]. С этой целью в мукомольном производстве применяется ультразвук, при этом в одной технологической операции объединили операцию очистки и обеззараживания зерна и интенсивное высокоскоростное кондиционирование. Ультразвуковая обработка позволяет получить бактерицидный эффект через озвученную воду в отношении картофельной болезни и плесневых грибов.[ 126,127]
Основным фактором бактерицидного действия является поле давлений акустической кавитации. В течение 5 секунд происходит непосредственный контакт с водой, обработанной ультразвуком, и полное обеззараживание зерна. Данные испытания были главным образом направлены на интенсификацию физико-химических процессов и обеззараживание, а также сокращение технологического цикла производства муки. [ 133,132]
Содержание микроорганизмов в муке зависит от их исходного количества в зерновой массе, способов очистки зерна, выхода и сорта муки. В сухой муке с влажностью не более 10 % микроорганизмы находятся в неактивном состоянии. При длительном хранении муки в нормальных условиях отмечается уменьшение их общей численности за счет отмирания аспарогенных [12].
При необходимости использования муки с выявленной зараженностью картофельной палочкой для выработки хлеба и хлебобулочных изделий используют химические, физические и биологические способы ннгибировання микроорганизмов (рис. 1.1) [70,128,130].
Наиболее традиционными и перспективными являются биологические способы, основанные на культивировании в мучных средах микроорганизмов с образованием органических кислот, антибиотиков и других протекторов. В период, когда условия развития «тягучей» болезни благоприятные, рекомендуется повышать кислотность хлеба на 1-2 градуса в сравнении со стандартной кислотностью, применяя выброженные полуфабрикаты с кислотностью 4-6 градусов в количестве 5-10% к массе муки; мезофильные закваски с кислотностью 18-22 градуса, приготовленные из чистых культур L. fermenti-27, в количестве 4-6 % к массе муки.[131]
Максимально ингибирующим эффектом обладает пропионовокислая закваска, которая полностью угнетает развитие возбудителей родов Penicillium и Bacillus, Концентрированные молочнокислые закваски с кислотностью 16-18 градусов на чистых культурах L. plantarum-ЗО в количестве 4-6 % к массе муки обладают такими же свойствами.
Пропионовокислые бактерии, предложенные К.Е. Бартеневой [17], вызывают лизис клеток Вас. mesentericus. Пропионовокислые бактерии - это грамполо-жительные неподвижные, бесспоровые микроорганизмы, с клетками палочковидной или шаровидной формы. Продуктом их жизнедеятельности является пропио-новая и уксусная кислоты.
Закваску можно получить путем сбраживания заварки в течение 10-12 часов, либо в виде биомассы. Ее готовят из ржаной обдирной муки и чистой культуры бактерий. Готовая биомасса - это густое пластичное тесто с влажностью 42-44 %, кислотностью 16 градусов, содержанием пропионовой кислоты 0,4-0,5 %. Помимо пропионовокислой закваски применяются мезофильные закваски, в которых совместно с молочнокислыми бактериями в биомассе образуются антибиотики. Закваска состоит из осахаренной заварки, муки 2-го сорта и чистых культур молочнокислых бактерий L. fermenti-27. В одном килограмме закваски содержится 14-16% кислот, и при добавлении 4-6 % мезофильной закваски к массе муки угнетается развитие картофельной палочки. Процесс приготовления пропионовокислой, мезофильной и концентрированной молочнокислой закваски (КМКЗ) состоит из двух циклов: разводочного и производственного. Продолжительность разводочного цикла не менее 50 часов и требует соблюдения определенных технологических параметров, соблюдения санитарных норм. Для производственного цикла в зависимости от режима работы предприятия требуется дополнительное оборудование, с соблюдением соответствующего ритма отбора закваски на замес теста. При длительных перерывах в работе предприятия следует сохранять закваски в холодильной камере.
Крупные хлебопекарные предприятия, работающие по непрерывному режиму, для приготовления хлеба применяют жидкие дрожжи по рациональной схеме [70]. Процесс производства жидких дрожжей включает следующие основные стадии:
- приготовление из муки осахаренной заварки;
- заквашивание заварки термофильными молочнокислыми бактериями штаммов Д-76, 30, 30-1, 60,40;
- выращивание дрожжей вида Saccharomyces cerevisiae штаммов «Московская 23», гибриды 5/12, 5, 69.
Культуры имеют свои особенности и используются в зависимости от климатических условий, способа тестоведения и сорта изделий. Процесс приготовления дрожжей включает два цикла: разводочный и производственный Разводочный цикл приготовления заквашенной заварки и дрожжей длится от 3 до 5 суток. Этот метод предупреждения заболевания хлеба хорошо зарекомендовал себя в хлебопекарном производстве, но требует дополнительных затрат на приобретение и обслуживание оборудования. Для предприятий малой мощности он практически не возможен,
Обоснование и выбор параметров СВЧ-обеззараживания продуктов переработки зерна
Исходя из цели работы и для решения поставленных задач, оценка реакции дробленого зерна и муки на сочетание оптимальных режимов проводилась по результатам обеззараживания от спорообразующих бактерий, грибной инфекции и сохранению хлебопекарных свойств. При подготовке зерна к хлебопекарному помолу в первую очередь обращают внимание на количество и качество клейковины, потому что именно этот показатель определяет хлебопекарные свойства муки и качество выпекаемого из нее хлеба.
Для разработки методики влияния энергии СВЧ-поля рассматривались основные факторы биологической эффективности и изменение биохимического состава зерновых продуктов.
Для муки хлебопекарной можно выделить следующие факторы:
- ферментативная активность а - амилазы муки и зерна;
- состояние белкового комплекса муки и зерна по содержанию и качеству клейковины;
- хлебопекарные качества муки: сила муки, формоустойчивость, газо удерживающая способность белкового комплекса, сахаробразующая способность.
В соответствии с целью работы и для решения поставленных задач проведена серия постановочных опытов. Теоретические предпосылки методики работ, методика активного планирования эксперимента, выбор плана, входные и выходные параметры разработаны сотрудниками КрасГАУ при непосредственном участии автора [32, 41, 56, 61-64, 90, 95, 100].
В соответствии с планом эксперимента и теоретическими предпосылками исследования входными параметрами выбраны:
- время обработки (экспозиция, с); - удельная мощность СВЧ (Рул, Вт/дм3). Входные параметры изменялись в трех уровнях;
- минимальном (+);
- среднем (0);
- максимальном (+1).
Изучалось влияние их на изменение микрофлоры и качественные показатели зерна и продуктов его переработки.
Согласно основной идее термического обеззараживания, исследуемый материал необходимо нагреть на допустимую температуру за определенное время. Для этого использовалась микроволновая печь Samsung М 1875 NR,
Для достижения температуры использовали сочетание экспозиции и удельной мощности. В результате температура нагрева исследуемого продукта варьировала от 30 до 100С, удельная мощность электромагнитного поля подбиралась в соответствии с температурой нагрева продукта. Время обработки изменялось в пределах 40-120 секунд. Лимитирующим фактором являлась температура нагрева, поскольку именно этот показатель влияет на состояние клейковины, а его высокие значения разрушают клейковину.
Для достижения обеззараживающего эффекта зерно увлажняли до допустимых пределов путем мокрого шелушения и последующего отволаживания. Затем с технологического потока после первой размольной системы дробленое зерно отбиралось для опыта. Наиболее результативными были варианты по обеззараживанию на уровне влажности, принятой по ходу технологического процесса, равные 16-18%.
Влажность хлебопекарной муки нормируется ГОСТ 26574-85, составляет не более 15%, зависит от уровня влажности исходного сырья и меняется по ходу технологического процесса производства муки.
Влияние СВЧ-энергии на микрофлору и биохимический состав дробленого зерна
Опытные данные свидетельствуют, что с помощью высокочастотной обработки можно снизить обсемененность дробленого зерна спорами и бактериями Bacillus. Зависимость режимов СВЧ-обеззараживания на споровые бактерии показана в табл. 3.2. Поскольку зерно, поступающее на первую размольную систему, увлажнялось, это означает, что вегетативные клетки и их споры становятся уязвимы действию СВЧ-поля. Преобладание поверхностной влаги вызывает активизацию спор и бактерий к прорастанию, в этот момент, при воздействии электромагнитным полем СВЧ происходит повышение внутренней энергии не только в продукте, но и в микробиологическом объекте. Резкое повышение температуры поверхностной инфекции приводит к ее разрушению. Контрольный образец дробленого зерна имел уровень обсемененности бактериями рода Bacillus 933 КОЕ/г. Положительные результаты по обеззараживанию от спор картофельной папочки обнаружены при температуре 73...75С, что позволяет снизить количество спор до 100-266 в грамме. При температуре в пределах 58-65С уровень инфекции снижается до 200-366 спор в грамме, то есть уменьшается по сравнению с контролем в 2,5-4,6 раза. При достижении температуры 92-120С инфицированность снизилась на 99%. ГрафївевдЕша иміхтидірйпяивйенвЕрнфис аміМян 3(2ющность Руд 450 Вт/дм3,температура 92-100 при т 120...240 с) снижает инфекцию до предельно допустимого уровня (100 КОЕ/г). Подобный эффект обеззараживания обнаружен на всех периодах контроля при максимальной мощности 600 Вт/дм3. Обеззараживание на среднем интервале мощности 300 Вт/дм , т 120,.,240 с, не избавляет объект полностью от инфекции, а при увеличении экспозиции т 240—360 с даже стимулирует рост спор. При обработке дробленого зерна мощностью Руд 450Вт/дм т 240...360 с при температуре продукта 92-120С инфицированность бактериями рода Bacillus снижается до предельно допустимого уровня.
В вариантах, где Руд составляет 300 Вт/дм3, т 120 с, наличие спор грибов Mucor и Penicillium обнаружено на уровне 8-9 КОЕ/г, при Рул 450 Вт/дм3 -15 КОЕ/г. Нагрев дробленого зерна 39-44С способствует снижению концентрации возбудителей грибов Mucor и Penicillium в 2,2-2,6 раза (Руд 300 Вт/дм3, т 120...240 с), однако продолжительное воздействие СВЧ-поля до 360 с дает полный обеззараживающий эффект (табл. 3,3 и 3.4).
При обработке дробленого зерна режимами Руд300...450 Вт/дм3, т 240...360 с, при достижении температуры 92-120С инфекция снизилась. Наиболее эффективно действует СВЧ-обеззараживание на грибы рода Mucor и Penicillium в этих вариантах, снижение концентрации спор достигает 99%.
В условиях максимальной мощности (600 Вт/дм3, т 120с) обнаружено не более 9 КОЕ/г колоний грибов, а экспозиция 360 с при этой же мощности обеспечивает полное обеззараживание (рис, 3,4 и 3.5).
При изучении влияния СВЧ-обработки на общую численность микроорганизмов в дробленом зерне выявлено, что контрольный образец имеет 6350 КОЕ/г (табл. 3-5). Резкое снижение ОМЧ достигнуто при обработке дробленого зерна мощностью 600 Вт/дм3, экспозиции до 120 с. Мощность в 300,..450 Вт/дм3 при той же экспозиции обеспечивает незначительное снижение ОМЧ зерна. Экспозиция 120...240 с способствует уменьшению количества микроорганизмов до 100 КОЕ/г на всех уровнях входной мощности (рис. 3.3).
Параметрические оценки зависимости показателей эффективности отражены на рисунках (ЗЛ-3,5 и в табл. 3.6). Результаты по обеззараживанию дробленого зерна показывают, что все режимы от минимального до максимального являются эффективными. Минимальный уровень значений Руд300 Вт/дм3 показывает обеззараживающий эффект относительно контроля, при этом по бактериям рода Bacillus отмечается активизация спор питательной среды.
Выявлен максимальный результат обеззараживания на режимах Руд 600 Вт/дм3, т 120..-240 с по всем видам микроорганизмов. Освобождение от спор картофельной палочки происходит при т =80 с до концентрации 100 КОЕ/г, т.е. данное количество микроорганизмов не вызывает заболевания готового хлеба и сохраняется на этом режиме обработки при увеличении времени нагрева.
На среднем режиме обработки Рул450 Вт/дм наблюдается резкое снижение концентрации спор до предельно допустимого уровня, и при увеличении времени обработки прорастание спор не стимулируется.