Введение к работе
Актуальность проблемы. В посладнее десятилетие Епачятэяьно возрос интерес исследователей к регуляторним пептиден. Регуляторы пептидной природы являются не только наиболее многочисленной группой физиологически активных веществ, по и обладают плейотропньм действием, а также полифункциональкы. Обнаружение традиционных гормонов желудочно-кишечного тракта в нервной системе, по-видимому, свидетельствует о существовании в организме единой по химической природе системы передачи информации. Одни и те же, либо подобные по структуре пептиды могут реализовать передачу соответствующей информации несколькими путями: эндокринным ( циркуляция в крови ), паракринным ( влияние на соседние близко расположенные клетки ), иайроэндокркнкш и нервным. Данные пептиды оказались непременными участниками передачи сигнала в синапсе, его модуляции и дистантной регуляции вне синапса. Не исключено, что спектр кх активности еще вире.
Холециетокинин и гастрин, обнаруживаемые ка* в нервных окончаниях, так и в телах нейронов ( Reofeld ,1979) обладают рядом свойств, указывающих на их нейроуедкаторку» и квйромодуля-торную роль. Показано также, что холециетокинин взаимодействует с другими медиаторкыми системами н обладав? возбуждаяцим влиянием на периферическую и центральную кэрвную систему 4 Но Н Brodie,i987). Однако конкретные механизмы действия зеодэцистокя-вина в нервной ткани остаются невыясненными. В связи с втим значительный интерес вызывает изучение специфических рецепторов холепистокиника. Показано, что холецистокикяношэ рецепторы гетерогенны в пределах двух классов - А и Б. Рецепторы А класса ( периферический тип ) локализована в клетках поджелудочной железы, слизистой желудка, желчном пузыре, некоторых типах гладких мышц (Diyk at.al.,1983, ЗгеоеяКа at.al., 19Є9 ) Эти рецепторы высокоаффикны для холецистокинкиа н обладают вязкой аффинностью к гастрину н С-кокцевым фрагментам хояецкетоки-нина. Среди этих рецепторов набяэдаетоя гатерогвкяоеть по отношению к связываний агонистов.
Для нервной еиетэмы характерен А-ияаео рецепторов. Они высоко аффинны для холепиотокиикна й его акалогоэ. HewRosf авторадиа-графии выявлены участкк высокоаффинного связывли&ч холэциотова-кина в коре больших полушарий, обонятельной яувовита.
ретику.яркон ядре таламуса. Предполагается поетеинаптическая локализация холвцвзтокшвшовш рецвптореэ. Однако одна лишь аио-раджографяческая визуализация на позволяв? относить все евязы-эавайэ участки к иєїинно рядапторнш бэлкау, бэа учета их свойств к структуры.
Низкая концентрация рецепторних белков в клетке, их лабильность и способность х агрегации создают дополнительные трудности при очистке рецептора. Вместе с теп получение препарата рецепторних белков чрезвычайно важно для уточнения структурных характеристик родалторпо?, ыолекула, изучения структуры <зв»зива-кцзго центра, получаіщя аиїитоз. Прізчзи получение последних позволяет провести сравнительный анализ їЕйцукслогичееких свойств рецзпгора, охарактеризовать его иолшгеятадиыЕ состав, то есть белковш продукгы тшо энспреесш, оірнять ого количественные характеристики.
Изучение взаимодействия хояздвзстояининя и его рецзпгора с дофаминовой ие?ешй,, играющей 5 роя» в патогенезе шизофрения; епоеобнести модулировать вюагобеждеияв FAMK, а также взаниодэйв-твяя с спиатігдои екгтзраки при tfoлозой кодуляции кезет бить по-«ввзннм в бїйснзїши м-зхаялзыов возникновения патогенетических иарузєіий цэнгргакоЯ п перзфретеезой цзрззмй системы.
Цаль ка^оздчй трабогц эшаэчазаеь s идентификации к харакга-рисїяко г^їрий/хсдауіСтогяШїа-ввязнвгїщил балков головного нэз-ы человека и разлшньч видов кивотнш. При выполнййии данной работы били поставлены следующие задачи:
-
Очист:ггь гастри}і/холзцнсто»іМіаї-СЕЯ.вивзап,и8 белки головного цозга се;;шї и яриз к пояучгкть спэцйфичоеккг антисывороткн к Кем.'
-
Оырактери^см.ь подулзд-гцдный cow-as гаеїрнн/холециетоки-йна-евнзыва&дих бежлоэ головного моога человека н различных видов животн/гх.
-
Охараэтерясовать пэлнеэпгндннй состав гаетрии/холецивтоаи-ігйк-сгяяквззцкх еЧлтоз в р&вяячккх органах и тканях человека
и крысы.
-
Изучить региональное її клатэпкээ распределении гастр'ин/ холецистоккнш-связывайцше. белков.
-
Изучягь распрэдэлёсйэ и характеристику полипептидного состава гао!фЖ(/х0йэ^ийтояинин-свззывающ1пс белков в различных отделах головного моога кр«й при окспйркшктальнок невроза.
6. Охарактеризовать углеводную спацифичкость гаетрэд/хояешето-кинин-снязывшцих белков головного мозга крыс. 1. Выявить аутоантитела при некоторых патологических забалепя-ниях ( аутоиммунном гастрите типа А, экспериментальном невроза) специфичные к гастрин/хояецкстокинин-связывягацим балкам головного мозга и других тканей и органов человека и крыс.
На.учнал новизна и практическое значетге. Впервые получены данные о полипептидком состава г&стрии/хеязпястокинин-евязываю-щих белков головного мозга свиньи, крыс и человека, счищзннда аффинной хроматографией на тетрагастрии- и холэшстокшин-езфэ-розэ; получены специфические антисиворотки к данкш бзлквм; впервш проанализирован полипептядкый состав гастршіДолепизто-кингш-связывзкцнх белков 8 различии* органах я тканях человека и крыси; изучено региональное и клеточное распределение зтнх белков. Показано, что отдельные полнпепткдвг гастркн/хелевксто-ккнин-свяэывающих белков характерны для определенных клеточных типов ЦНС. Влервыэ изучена глякопротэидная природа гаетрап/холе-цистокинин-с&язывагощих белквв. Впервые изучен по.яипептид5та состав и динамика изменений гастрин/холэписзгокинин-сзязываацих белков при экспериментальном неврозе крыс. Выявлены аутоантите-ла к изучаемым белкам при аутоиммунном гастрите типа.А и пря экспериментальном неврозе ripua.
Полученные специфические аитиеыворотки против гастркн/:этяе-цистокинин-связыввнднх белков, а такко разрабогаапда катедіпги определения аутояктител к гаетрин/ходапй&гоіг»пят~свлс!й;сс!зк!і белкам слизистой оболочки келудка нюзля прикеизние в лаборатории патсморфолотии НИК гастроэнтерологии ( г. Днепропетровск).
Апробация работы. Материала 'диссертация доложени на Воеесвз-ном симпозиуме " Проблема изучения паслвдстявіяостн человека на уровне белковой продуктов РбКноЯ экспрессия" ( №оскваі, I9G9), 1-м Всесоюзном июдунологическом съездз ( Сочи, Г989); FII научной конференции ЩШ Тбилисского ИУВ " Центральная регуляция вегетативных функций" { Тбилиси, 19395; 19-я коррекции %В0; ( Рим, 1989); 20-й конференции ФЕБО { Будапешт, 1530); итогогах научных конференциях ЩУ IS89, IS9Q.
На защиту выносятся еледущиэ полохання:
I. Особенности полипепгадного ееогава гастр!да/хг>«»цйгз?сю»йкм-евязыващих белков головного иозга и других ергвпоз я екаггшИ человека и животных.
-
Иммуногиэтохимическая характеристика гастрин/холециетокя-йкн-свяэыващих балков и их гликопротеидная природа.
-
Особенности регионального распределения и полипептидного состава гастрин/холэцистокинин-свизьшаидих белков при рксперн-кзнтальяом неврозе.
-
Характеристика аутоантител к гаетрин/холецистокинин-свн-зываящин балкам при аутоиммунном гастрите типа А и при экспериментальном невроза.
Структура и объем диссертационной работы. Диссертация состоит из б разделов: I- введение, II- обзор литературы по теме диссертация, III- материалы и методы исследование, ^-экспериментальная часть, У- заключение, УІ- выводы. Работа изложена На 115 страницах машинописного текста, иллюстрирована з таблицами и 27 рисунками. Списох литературы содержит Г?3 наименования ка русском и иностранных языках.
