Введение к работе
Актуальность проблемы. Антитела, циркулирующие в крови здорового человека и продуцируемые в отсутствие явной антигенной стимуляции, называются естественными антителами (EAT). Они отличаются от адаптивных антител, а их продукцию осуществляет особая популяция CD5 В-клеток. Предполагают, что EAT являются компонентом врождённого иммунитета и служат первой линией защиты против патогенов. Предполагаются и другие их функции, в частности, регуляторные. При определённых условиях EAT участвуют в развитии аутоиммунных заболеваний. Значительная часть EAT направлена к гликанам - компонентам гликолипидов, гликопротеинов и полисахаридов. Необходимость изучения анти-гликановых EAT диктуется их несомненной важностью для трансфузиологии и трансплантационной медицины. Тем не менее, репертуар изученных анти-гликановых антител ограничивается EAT против антигенов групп крови (в основном, системы АВО), ксено- и опухолеассоциированных антигенов, а эпитопная специфичность остается малоизученной. Систематическое изучение репертуара и специфичности анти-гликановых антител, а также выявление их функциональных мишеней, несомненно, являются актуальными задачами. Наконец, знание истинной специфичности EAT в норме необходимо для изучения патологических процессов человека, таких как аутоиммунные реакции и онкотрансформация.
Цель и задачи исследования. Целью данной работы являлось детальное исследование анти-гликановых, в первую очередь, естественных антител человека в норме (то есть у здоровых доноров). Предполагалось решить следующие задачи:
максимально подробно изучить репертуар анти-гликановых антител;
выделить антитела с помощью гаптен-специфической аффинной хроматографии и картировать их эпитопную специфичность;
объяснить эффект толерантности ауто-антител к ауто-антигенам, в частности, антигенам групп крови системы АВО.
Научная новизна. Систематически изучен репертуар специфичности анти-гликановых EAT крови здоровых доноров. Показано сходство профилей
специфичности EAT разных индивидуумов. Выявлены антитела с неизвестными ранее специфичностями, в том числе направленные к коровым участкам гликанов. Показано, что уровень антител к ксеноантигену Galocl-3Gaip на порядок ниже, чем считалось раньше. Дано экспериментальное объяснение факту сосуществования гистоантигена группы крови А, с одной стороны, и аутологичных анти-А EAT, с другой стороны.
Практическая значимость. Естественные антитела, направленные к дисахариду Le , специфичность которых охарактеризована в данной работе, способны избирательно связываться с клетками опухоли молочной железы; полученные данные могут быть использованы в диагностических целях. Установлено, что для полного удаления группоспецифических анти-А и анти-В антител (это необходимо при несовместимых трансплантациях и трансфузиях) адсорбенты могут быть сконструированы с использованием соответствующих трисахаридных лигандов. Найдены оптимальные условия элюции анти-гликановых антител с аффинного адсорбента, что может быть востребовано при масштабированном выделении терапевтических и диагностических антител.
Публикации и апробация работы. По теме диссертации опубликовано 5 статей в рецензируемых журналах. Основные материалы диссертации были представлены на следующих международных конференциях: XVI зимняя молодёжная научная школа (Москва, 2004), VII Чтения, посвященные памяти академика Ю.А. Овчинникова (Москва, 2004), The Joint meeting of the Society for glycobiology and the Japanese society for carbohydrate research (Гонолулу, 2004), The 4 International congress on Autoimmunity (Будапешт, 2004), The 2n ISN Special Neurochemistry Conference on Neural Glycoproteins and Glycolipids (Антигуа, 2006), 2-я Московская международная конференция «Иммунофизиология: аутоиммунитет в норме и патологии» (Москва, 2008), XXII зимняя молодёжная научная школа (Москва, 2010), The 7 International Congress on Autoimmunity (Любляна, 2010).
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 179 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, результатов и их обсуждения, выводов, заключения и списка цитируемой литературы, включающего 290 ссылок. Диссертация содержит 51 рисунок, 11 таблиц и 4 приложения.
![Гистофизиология стекловидного тела глаза человека в норме и при патологии [Электронный ресурс]](/i/i/5434/191951.png "Гистофизиология стекловидного тела глаза человека в норме и при патологии [Электронный ресурс] Бабич Максим Евгеньевич")
