Введение к работе
Актуальность темы. Corynebacterium pseudotuberculosis вызывает у животных хронически протекающую болезнь - казеозный лимфаденит. В последние годы появились факты, свидетельствующие о том, что данный микроорганизм обладает особым циклом развития и отличается от большинства микроорганизмов возможностью приспосабливаться к внутриклеточным условиям паразитирования. Казеозный лимфаденит широко распространен в странах с развитым овцеводством: Австралии, Новой Зеландии, США, Индии, Аргентине, Румынии, России ((H.R. Сагпе (1932); H.R.Carne, С. Cramp (1932); C.V. Dayus, S.M. Hopkirk (1932); K.T. Maddy (1953); К.Ф. Ламихов (1954); M.M. Халимбеков и др. (1961); М.М. Далгат (1962, 1965); Э.А.Шегедевич (1968, 1969); И.Г. Трофимов (1981, 1984, 1988, 1990, 1993, 1994); Н.М.Колычев, И.Г. Трофимов (1993); М.В. Заболотних (1989, 1999), М.В. Заболотных., А.С. Крупко (1999)).
До настоящего времени, несмотря на длительный период изучения данного микроорганизма, нет достаточно надежных прижизненных методов диагностики и мер специфической профилактики казеозного лимфаденита. Это обусловлено тем, что С. pseudotuberculosis отличается широкой вариабельностью фенотипических и генотипических свойств. Известные методы идентификации коринебактерий различных видов весьма трудоемки и при изменчивости возбудителя мало эффективны. Поиск методов диагностики осложняется недостатком знаний об этиологии данной инфекции. В этой связи актуальной является разработка и внедрение в ветеринарную практику новых, более чувствительных методов идентификации коринебактерий, основанных на изучении структурных компонентов микробных клеток, обеспечивающих простоту исследований с высокой информативностью и автоматизацией процесса исследований.
Одним из таких методов является ультрафиолетовая спектрофотометрия ((М. Orchin, Н.Н. Jaffe (1960), Ч. Кантор, П. Шиммел (1984), Л.В. Вилков, Ю.А. Пентин (1987)). Данный метод позволяет исследовать спектры поглощения бактерий в водных растворах, при этом сохраняется целостность клеток.
Тема диссертационной работы вошла самостоятельным разделом в комплексную тему ИВМ ОмГАУ «Разработка методов и средств диагностики, профилактики, меры борьбы с коринебактери-озами сельскохозяйственных животных» и имеет номер государственной регистрации 01.9.90.000196.
Цель її задачи исследования. Целью исследований является
разработка методики идентификации и дифференциации
коринебакгерий методом УФ-спектрофотометрии.
Для решения этой проблемы поставлены следующие задачи:
разработка регламента исследования культур коринебакгерий посредством УФ-спектрофотометрии и дальнейшая обработка результатов посредством регрессионного анализа;
выявление характерных спектров поглощения коринебакгерий для создания банка данных на ЭВМ;
исследование воздействия у-излучения на различные феноти-пические формы (R-, I-, S-) С. pseudotuberculosis, а также поиск оптимальной дозы, необходимой для полной инактивации микроорганизмов этого вида;
нахождение зависимости между спектральными, геногипи-ческими и фенотипическими характеристиками С. pseudotuberculosis;
Научная новизна.
-
Методом УФ-спектрофотометрии впервые исследованы культуры разных видов коринебактерий. Выявлены оптимальные условия применения предлагаемого метода, установлены характерные линии спектров, посредством которых можно производить идентификацию вышеуказанных микроорганизмов.
-
Впервые изучено воздействие у-излучения на различные фенотипические формы (R-, I-, S-) С. pseudotuberculosis, а также выявлена оптимальная доза,'ведущая к их полной инактивации.
-
Установлена зависимость между спектральными, генотипичес-кими и фенотипическими характеристиками С. pseudotuberculosis .
Теоретическая и практическая значимость работы.
-
Установлена возможность применения УФ-спектрофотометрии для идентификации и дифференциации штаммов внутри вида С. pseudotuberculosis.
-
Изучено воздействие у-излучения на различные фенотипические формы (R-, I-, S-) С. pseudotuberculosis.
-
Предложены методические подходы использования УФ-спектрофотометрии для изучения характеристик коринебактерий независимо от их морфологических и функциональных особенностей.
-
Разработаны тесты для индикации возбудителей казеозного лимфаденита в лабораторных условиях.
Апробация полученных результатов. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на юбилейной научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава
и аспирантов ИВМ ОмГАУ (Омск, 1998); межрегиональной научно-практической конференции «Роль инноваций в развитии регионов» в рамках промышленно-инновационного форума «Промтехэкспо-99».(Омск, 1999); международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения члена-корреспондента ВАСХНИИЛ В.Т. Котова «Эколопгческие аспекты эпизоотологии и патологии животных» (Воронеж, 1999); международной научно-практической конференции «Проблемы стабилизации и развития сельскохозяйственного производства Сибири, Монголии и Казахстана в XXI веке (Новосибирск, 1999 г); межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 90-летию со дня рождения Д.Н. Фиалкова и 75-летию ВООП «Природа и природопользование на рубеже XXI века», (Омск, 1999).
Публикация полученных результатов. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 21 рисунком, 37 таблицами. Список литературы включает 192 источника, из них 87 - отечественных, 105 - зарубежных авторов.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Применение УФ-спектрофотометрии для идентификации и дифференциации микроорганизмов рода Corynebacterium.
-
Определение зависимости между спектральными, генотипи-ческими и фенотипическими характеристиками С. pseudotuberculosis.
-
Воздействие у-излучения на различные фенотипические формы С. pseudotuberculosis.
![Гигиеническое обоснование и оценка эффективности применения УФ-излучения в комплексной технологии обеззараживания питьевой воды [Электронный ресурс]](/i/i/4428/178934.png "Гигиеническое обоснование и оценка эффективности применения УФ-излучения в комплексной технологии обеззараживания питьевой воды [Электронный ресурс] Фридман Роман Кириллович")
