Содержание к диссертации
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 6
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10
1.1. Общая характеристика заболевания и возбудителей оспы овец и оспы коз 10
1.1.1. Таксономическая принадлежность вирусов оспы овец и оспы коз 10
1.1.2. Антигенное родство вирусов оспы овец и оспы коз 12
1.1.3. Устойчивость вирусов оспы овец и оспы коз, их свойства и способы передачи 14
1.1.4. Клинические признаки заболевания и патоморфогенез при оспе овец и оспе коз 15
1.2. Эпизоотическая ситуация по оспе овец и коз в мире, странах СНГ и Российской Федерации 20
1.3. Культивирование вирусов оспы овец и оспы коз 22
1.4. Борьба с оспой мелкого рогатого скота, иммунитет и средства специфической профилактики заболевания 28
1.4.1. Историческая справка о борьбе с оспой овец и оспой коз 28
1.4.2. Иммунитет при оспе овец и оспе коз и методы его изучения 31
1.4.3. Вакцины против оспы овец 33
1.4.4. Вакцины против оспы коз 39
1.4.5. Ассоциированные вакцины против оспы и других инфекций мелкого рогатого скота 42
1.5. Заключение по обзору литературы 45
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 47
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 47
2.1.1. Материалы для исследований 47
2.1.1.1. Вирусы 47
2.1.1.2. Культуры клеток з
2.1.1.3. Питательные среды, сыворотки, растворы 48
2.1.1.4. Реактивы 48
2.1.1.5. Оборудование 49
2.1.1.6. Животные 49 2.1.2. Методы исследований
2.1.2.1. Приготовление тканевой суспензии 49
2.1.2.2. Определение инфекционной активности вируса оспы коз 50
2.1.2.3. Изучение эвтектических свойств защитных сред 50
2.1.2.4. Составление и лиофилизация экспериментальных образцов вирусвакцин 51
2.1.2.5. Определение стерильности, безвредности,
биологической, антигенной и иммуногенной активности вирусвакцин 52
2.1.2.6. Статистическая обработка результатов исследований 54
З.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 55
3.1. Изучение эпизоотической ситуации по оспе овец и коз в Российской Федерации в 1993-2006гг. 55
3.1.1. Эпизоотическая ситуация по оспе мелкого рогатого скота и вакцинация овец и коз против оспы в России в 1993-2006 гг. 55
3.1.2. Анализ вспышки оспы овец и коз в Еврейской автономной области и Приморском крае в 2002 году 57
3.2. Исследование биологических свойств вирулентного штамма «Приморский 2003» вируса оспы коз 62
3.2.1. Выделение вируса и определение титра инфекционной активности 62
3.2.2. Изучение клинических признаков заболевания и оценка патогенных свойств вируса на восприимчивых животных 64
3.2.3. Адаптация вируса к первичным и перевиваемым культурам клеток и изучение культуральных свойств 67
3.3. Изучение культуральных свойств аттенуированного і штамма «ВНИИЗЖ 2003» вируса оспы коз 70
3.4. Оценка свойств различных защитных сред при изготовлении сухой культуральнои вирусвакцины против оспы коз 78
3.5. Изучение иммунобиологических свойств вирусвакцин против оспы при гомологичной и перекрестной иммунизации 84
3.5.1. Исследование реактогенности и безвредности вирусвакцин 84
3.5.2. Оценка эффективности вирусвакцин с использованием метода контрольного заражения животных 84
3.5.3. Изучение поствакцинального гуморального иммунитета 8 8
3.6. Изучение иммунобиологических свойств ассоциированной вирусвакцины против оспы овец и оспы коз 90
3.7. Биологическая активность вирусвакцины против оспы овец из штамма «ВНИИЗЖ» в условиях длительного хранения 92
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 95
5. ВЫВОДЫ 103
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 105
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 106 ПРИЛОЖЕНИЯ 132
Введение к работе
Актуальность темы. Оспа мелких жвачных животных является особо опасной инфекцией. Возбудителем оспы мелкого рогатого скота являются ДНК-содержащие эпителиотропные вирусы, относящиеся к семейству Poxviridae, роду Capripoxvirus. Опасность болезни характеризуется высокой контагиозностью и летальностью, которая при доброкачественном течении составляет 5-10%) и достигает 80-100% в случае осложнений при присоединении секундарных инфекций. Экономический ущерб, наносимый инфекцией слагается из гибели и выбраковки заболевшего поголовья мелкого рогатого скота и больших материальных затрат по отрасли на проведение охранно-карантинных и других мероприятий по ликвидации эпизоотии.
Оспа мелкого рогатого скота остается актуальным в мире заболеванием, (Китай, 2002-2003; Монголия, 2006; Греция, 2007). Появление очагов оспы среди коз в различных странах мира (Турция, 2001; Таджикистан, 2001; Вьетнам, 2005), в том числе в России в 2003 году, а также отдельные сообщения отечественных и зарубежных исследователей о недостаточной эффективности вирусвакцин против оспы овец при профилактике оспы коз свидетельствуют о том, что вирус оспы овец и вирус оспы коз являются самостоятельными таксономическими видами. Поэтому наряду с вирусвакциной против оспы овец необходимо иметь и вирусвакцину против оспы коз для профилактики заболевания этого вида животных. Создание ассоциированной вирусвакцины и ее стандартизация по качеству и сроку годности возможна при научно-обоснованном подборе штаммов вирусов оспы овец и оспы коз в составе препарата с сохранением его иммунобиологической активности в процессе хранения. При правильно подобранных антигенах в составе ассоциированной вирусвакцины организм животного способен отвечать дифференцированно и обеспечивать иммунологическую перестройку в отношении каждого антигена.
