Содержание к диссертации
Введение
1 Обзор литературы 13
1.1 Распространенность и коррекция нарушений обмена веществ у высокопродуктивных животных 13
1.2 Нарушения иммунного статуса и иммунокоррекция у глубокостельных коров и полученных от них телят 18
1.3 Биологические свойства янтарной кислоты и перспективы ее применения при метаболических и иммунных нарушениях у животных 30
1.4 Биологические свойства и применение в ветеринарии антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции 40
1.5 Биологические свойства формальдегида 44
1.6 Биологическая роль микроэлементов 46
1.7 Иммуномодулирующие свойства препаратов на основе нуклеиновых кислот 51
1.8 Иммуномодулирующие свойства левамизола и эффективность его применения в ветеринарии 54
2 Собственные исследования 59
2.1 Материалы и методы исследований 59
3 Результаты собственных исследований 62
3.1 Теоретическое и экспериментальное обоснование применения янтарной кислоты для потенцирования биологической активности иммуномодулято ров 62
3.1.1 Обоснование состава и способ получения иммунометаболической композиции на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции 63
3.1.2 Доклинические испытания иммунометаболической композиции на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции на лабораторных животных з
3.1.3 Клинические испытания иммунометаболической композиции на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции на продуктивных животных 80
3.1.3.1 Оценка влияния иммунометаболической композиции на метаболический статус глубокостельных коров и полученных от них телят 80
3.1.3.2 Оценка влияния иммунометаболической композиции на иммунный статус глубокостельных коров и полученных от них телят 94
3.1.3.3 Оценка влияния иммунометаболической композиции на оксидантно - антиоксидантный статус глубокостельных коров и полученных от нихтелят 101
3.1.3.4 Оценка влияния иммунометаболической композиции на рост и развитие телят 107
3.1.4 Результаты применения иммунометаболической композиции на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции при клинически выраженных заболеваниях 111
3.1.4.1 Эффективность применения иммунометаболической композиции при нарушениях обмена веществ у глубокостельных коров 111
3.1.4.2 Эффективность применения иммунометаболической композиции при заболеваниях телят с диарейным синдромом 116
3.1.4.3 Результаты применения иммунометаболической композиции при респираторных заболеваниях телят 133
3.1.5 Применение иммунометаболической композиции для создания благоприятного иммунобиохимического фона при вакцинации 145
3.2 Теоретическое и экспериментальное обоснование включения формалина в иммунометаболическую композицию на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции 156
3.2.1 Обоснование состава и способ получения иммунометаболической композиции с включением формалина 156
3.2.2 Доклинические испытания иммунометаболической композиции с включением формалина на лабораторных животных 160
3.2.3 Клинические испытания иммунометаболической композиции с включением формалина на продуктивных животных 163
3.2.3.1 Оценка эффективности применения иммунометаболической композиции с включением формалина при маститах и послеродовых эндометритах у коров 163
3.2.3.2 Оценка эффективности применения иммунометаболической композиции с включением формалина при вирусных заболеваниях 172
3.3 Теоретическое и экспериментальное обоснование включения микроэлементов в иммунометаболическую композицию на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции 176
3.3.1 Обоснование состава и способ получения иммунометаболической композиции с включением микроэлементов 179
3.3.2 Эффективность применения иммунометаболической композиции с включением микроэлементов для коррекции метаболического статуса животных 179
3.4 Теоретическое и экспериментальное обоснование применения янтарной кислоты для потенцирования биологической активности солей нуклеиновых кислот 184
3.4.1 Обоснование состава и способ получения иммунометаболической композиции с янтарной кислотой и солями нуклеиновых кислот 184
3.4.2 Доклинические испытания иммунометаболической композиции с янтарной кислотой и солями нуклеиновых кислот на лабораторных животных 186
3.4.3 Оценка эффективности иммунометаболической композиции с нуклеи-натом натрия при гипотрофии телят 194
3.5 Теоретическое и экспериментальное обоснование включения в состав иммунометаболической композиции с солями нуклеиновых кислот микроэлементов 196
3.5.1 Результаты применения иммунометаболической композиции с солями нуклеиновых кислот и микроэлементами при гепатозе коров 198
3.6 Теоретическое и экспериментальное обоснование применения янтарной кислоты для потенцирования биологической активности и снижения токсического действия левамизола 202
3.6.1 Доклинические испытания левамизола в сочетании с янтарной кислотой на лабораторных животных 203
3.6.2 Клинические испытания левамизола в сочетании с янтарной кислотой на продуктивных животных 206
3.6.2.1 Оценка иммуностимулирующей и метаболической активности левамизола в сочетании с янтарной кислотой 206
3.6.2.2 Оценка влияния левамизола в сочетании с янтарной кислотой на функциональное состояние печени укоров 208
3.6.2.3 Оценка влияния левамизола в сочетании с янтарной кислотой на ок-сидантно- антиоксидантный статус телят 211
3.6.2.4 Оценка антигельминтной активности левамизола в сочетании с янтарной кислотой 213
Обсуждение резуьтатов исследований 215
Выводы 232
Рекомендации по использованию научных выводов 236
Список сокращений и обозначений 238
Список литературы 239
- Биологические свойства янтарной кислоты и перспективы ее применения при метаболических и иммунных нарушениях у животных
- Биологические свойства формальдегида
- Клинические испытания иммунометаболической композиции на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции на продуктивных животных
- Обоснование состава и способ получения иммунометаболической композиции с включением микроэлементов
Биологические свойства янтарной кислоты и перспективы ее применения при метаболических и иммунных нарушениях у животных
Постоянный интерес исследователей и практических специалистов вызывает проблема иммунодефицитов у животных, поскольку они сопровождают различные патологические процессы, в том числе инфекционные заболевания, вызванные вирусами, бактериями, грибами и простейшими.
Высокопродуктивные коровы с интенсивным обменом веществ и более чувствительной неирогуморальнои регулирующей системой восприимчивы даже к незначительным нарушениям условий содержания и реагируют на это выраженным нарушением обмена веществ, затрагивающим их иммунобиологический статус (Мищенко В.А., 2008).
Иммунодефицит (иммунодефицитное состояние, иммунологическая недостаточность) обусловлен выпадением одного или нескольких специфических компонентов иммунного ответа или взаимодействующих с ним неспецифических факторов защиты (фагоцитоз, система комплемента и др.).
Вид и степень проявления иммунодефицита зависит от того, какое звено иммунной системы нарушено и на какой ступени онтогенетического развития оно произошло (Федоров Ю.Н., 2006; Шевырев Н.С., 1999; Egberink Н., 1992; Flaming К. etal, 1993).
Различают- первичный, в большинстве случаев генетически детерминированный иммунодефицит, проявляющийся в раннем постнатальном периоде и-вторичный иммунодефицит, возникающий в результате действия (иммунодепрес-сии) на организм неблагоприятных факторов внешней среды. Вторичные иммунодефициты в патогенетическом отношении имеют сложный механизм развития, как общие закономерности, так и определенные особенности, существенно влияют на патогенез заболеваний и их саногенез (Жаров А.В., 2003). Механизмы формирования иммунодефицитных состояний разнообразны и во многом зависят от иммундепрессантов. Различают инфекционные (вирусные и бактериальные), инвазионные, микотические, метаболические, цитотоксические, радиационные, экологические, связанные с загрязнением окружающей среды и накоплением в организме ксенобиотиков (солей свинца, кадмия и других тяжелых металлов) и другие в зависимости от природы физического, химического или биологического факторов (Анатенко С.А. , 1992; Барышников П.И., 1995; Бойко Т.В., 2008; Буянов А.А., 2000; Самохин В.Т., 2003; Шахов А.Г. с соавт., 2006;. Egli С.Р, 1998).
Для вторичных иммунодефицитов характерны изменения (понижение) естественной резистентности и иммунобиологической реактивности, нарушение функций лимфоцитов и фагоцитов, других клеточных и гуморальных факторов защиты, акцидентальная трансформация тимуса, атрофия селезенки, лимфоузлов, костного мозга, диффузной лимфоидной ткани, повышенный апоптоз, лимфоци-то-, лейкоцито- и моноцитопения, анемия и, наконец, истощение. При этом нарушения возникают как в клеточных, так и в гуморальных звеньях иммунной системы, а также в системе естественной неспецифической резистентности, т.е. они носят комбинированный характер (Шахов А.Г. с соавт., 2006). Хронические, рецидивирующие, вялотекущие, трудно поддающиеся традиционному лечению ин-фекционно-воспалительные процессы различных локализаций у взрослых животных следует рассматривать как проявление иммунодефицитного состояния. (Федоров Ю.Н., 2006).
Вторичные иммунодефициты представляют особый интерес для клинической ветеринарной иммунологии (Буянов А.А., 2000; Шахов А.Г. с соавт., 2006).
Патологические изменения в обмене веществ, морфофункциональном состоянии органов и систем в организме беременных животных являются одной из основных причин изменений в обмене, структуре и функции всех органов и сие 20 тем плода в процессе внутриутробного развития, в результате этого рождается молодняк с низким уровнем естественной резистентности и иммунобиологической реактивности. В связи с этим новорожденные не могут адекватно адаптироваться к воздействию различных факторов внешней среды (Горбов Ю.К., 1989; Самохин В.Т. с соавт., 2002). При этом снижаются упитанность, продуктивность, воспроизводительная способность, неспецифическая резистентность, появляются врожденные аномалии развития приплода (Маннапова Р.Г. с соавт., 2004; Попова О.М., 2005).
Состояние иммунодефицита, снижение адаптационных способностей организма приводит к повышению восприимчивости к инфекционным заболеваниям (Аксененко С.А., 2005; Джупина СИ., 2002; Масьянов Ю.Н., 2009; Петрянкин Ф.П., 2008).
Шахов А.Г. (2005) при разработке эффективных мер профилактики болезней телят биологический комплекс «мать-плод-новорожденный» рекомендует рассматривать как единую систему, так как установлена прямая взаимосвязь между уровнем обмена веществ и неспецифической резистентностью организма коров и внутриутробным развитием плода, состоянием здоровья и сохранностью новорожденных.
Наиболее распространенной формой вторичной иммунологической недостаточности у животных являются нарушения в передаче материнских антител потомству, обуславливающие высокую заболеваемость и смертность новорожденного молодняка (Кармолиев Р.Х., 1993).
Наибольшее распространение иммунодефициты у новорожденных телят отмечается в первые дни, что объясняется отсутствием или низким содержанием иммуноглобулинов в сыворотке крови у более 75% телят молозивного возраста (Шахов А.Г., 2003; Hammer C.J., 2004).
Как известно, у новорожденных отмечается физиологическая гипогаммаг-лобулинемия. Иммунные глобулины и фагоциты они получают с молозивом матери (Жаров А.В., 2003). Напряженность колострального иммунитета во многом зависит от иммунного и метаболического статуса матерей (Петрянкин Ф.П., 2003; Редкий М.И. с соавт., 2005; Шахов А.Г., 2005).
Несвоевременное и неадекватное поучение молозива новорожденными телятами является основной предрасполагающей причиной, которая приводит к высокой заболеваемости и смертности молодняка в ранний постнатальный период (Godden S.M. etal.,2003).
На 2-3 неделе жизни у молодняка может развиваться второй возрастной иммунодефицит, обусловленный повышенным расходованием колостральных защитных факторов и недостаточностью собственного иммунопоэза (Сидоров М.А. с соавт., 2006). При хороших условиях кормления и содержания этот дефицит слабо выражен и сдвинут на более позднее время (Анатенко С.А., 1992; Ког-honen Н. et al, 2000).
Третий возрастной иммунодефицит возникает в период отъема при резком переводе молодняка на растительный корм. Вследствие кормового стресса истощаются механизмы защиты и нарушается образование иммуноглобулина А.
Нарушение и несовершенство адаптационных процессов в первые дни жизни, проявляются, чаще всего, в развитии желудочно-кишечных, респираторных заболеваний, в том числе инфекционной этиологии (Ваизов В.Х. с соавт., 2003; Исмагилов Э.И., 2007; Самохин В.Т. с соавт., 2002).
К патогенам, которые оказывают влияние на иммунную систему крупного рогатого скота, следует отнести вирус диареи болезни слизистых, который оказывает иммуносупрессивное действие, проявляющееся лимфопенией, разрушением Т- и В- клеток в лимфатических узлах, селезенке, тимусе, пейеровых бляшках. Кроме того, вирус угнетает такие функции нейтрофилов, как дегрануляция, анти-телозависимая клеточная цитотоксичность, фагоцитоз. Проникая через плаценту, вирус может вызывать иммунологическую толерантность у новорожденных телят (Андреев Е.В., 1984; Верховская А.Е., 2009; Глотов А.Г., 2002; Гоппе В.А., 2005; Жидков С.А., 1994).
Биологические свойства формальдегида
Фоновые биохимические показатели у подопытных и контрольных животных находились в пределах нормы. На 30 сутки отмечалось увеличение содержания общего белка, не выходящее за пределы физиологической нормы, в первой опытной группе на 7,2% и во второй опытной группе на 5,3% . По остальным показателям существенных изменений не отмечено.
Опыт 2. Было сформировано 3 опытные группы собак, по 4 особи в каждой. Собаки беспородные, массой 20±3,2 кг. Собакам первой опытной группы метаболический состав вводили внутримышечно, в дозе 5 мл, собакам второй группы - внутривенно, в дозе 50 мл, ежедневно, в течение 10 дней. Собакам контрольной группы вводился физиологический раствор, внутривенно, в дозе 10 мл. Наблюдение за животными вели на протяжении 3 месяцев, за весь период наблюдений признаков токсикоза выявлено не было.
Таким образом, длительное применение испытуемой композиции не оказывает отрицательного влияния на организм, т.к. не вызывает изменений общего клинического состояния животных, отклонений поведения, аппетита и др. параметров, не сопровождается летальностью даже при превышении средней терапевтической дозы в 10 раз.
Изучение раздражающего действия композиции ЯК с АСД-2Ф проводили на 6 кроликах с массой тела 2,2-2,4 кг путем аппликации на кожные покровы.
Было сформировано две группы животных, опытная и контрольная, по три животных в каждой. Предварительно, за два дня до эксперимента животным выстригали шерсть на спине, избегая механических повреждений кожных покровов. Испытуемую композицию наносили в чистом виде. Площадь нанесения составля-ла 10 см . Состав равномерно распределяли по поверхности участка кожи в дозах от 0, 1 до 1,0 мл на см . Экспозиция составляла 4 часа, после чего кожу аккуратно протирали ватным тампоном, смоченным дистиллированной водой.
Реакцию кожи на воздействие препарата оценили через 1 и 24 часа после однократного нанесения. Согласно полученным данным, однократная аппликация на кожные покровы кроликам при плотности нанесения от 0,1 до 1,0 мл/ см испытуемая композиция не вызывает видимого раздражения кожи.
В следующем эксперименте провели оценку влияния композиции на слизистые оболочки. Для этого инстиллир овали 2-3 капли на конъюнктиву глаз двух кроликов. Оценку раздражающего действия провели визуально, оценивая выраженность гиперемии, слезотечения, отека век.
При визуальной оценке состояния конъюнктивы, роговицы и век глаз кроликов установлено, что испытуемая композиция не оказывает раздражающего действия на конъюнктиву глаз. Таким образом, на основании проведенных исследований установлено, что композиция ЯК с АСД-2Ф не обладает выраженным раздражающим действием при наружном применении. Оценка протективной активности иммунометаболической композиции 1 опыт. Моделирование генерализованной формы сальмонеллезной инфекции. Опыты были проведены на 40 белых мышах, весом 18-20 г. Было сформировано три опытные и одна контрольная группа животных, по 10 особей в каждой. Мышам первой опытной группы внутрибрюшинно, в дозе 0,2 мл, ввели испытуемую композицию. Животным второй и третьей опытных групп, внутрибрюшинно, в той же дозе, ввели 1 % р-р сукцината натрия и 4% р-р АСД-2Ф , соответственно. Мышам контрольной группы вводился физиологический раствор, в том же объеме.
Спустя сутки провели заражение мышей смывом суточной культуры Salmonella spp. в смеси с голодным агаром в соотношении 1:4, в дозе 0,5 мл при концентрации 100000 тыс. микробных тел в 1 мл (по стандарту мутности).
Результаты изучения защитного действия препаратов представлены в таблице 6. Таблица 6 - Уровень защиты белых мышей при заражении культурой Salmonella spp. Группы Число погибших мышей / % Осталосьживых на 10 день день 3 день 4 день 5 день 6 день 1 опытная - 2/20 - 1/10 - 7/70 % 2 опытная 2/20 2/20 - - - 6/60% 3 опытная 4/40 2/20 1/10 - - 3/30% 4 контрольная 6/60 4/40 - - У зараженных мышей контрольной группы отмечалось быстрое развитие септической формы болезни: повышение температуры тела, вздутие живота, жидкий стул. Гибель животных наступила на 2 -3- сутки после заражения.
У животных первой опытной группы симптомы инфекционного процесса были менее выражены, семь особей выжили, одна мышь пала. У павшей мыши этой группы отмечалось незначительное увеличение продолжительности жизни по сравнению с контролем, гибель наступила на 5 сутки. Показатель выживаемости мышей второй опытной группы составил 60 %. Инфекционный процесс у них протекало намного легче, чем у животных контрольной группы. В третьей опытной группе отмечалось быстрое развитие клинических признаков, и гибель семи животных на 2-4 день.
Данные вскрытия и макроскопического исследования внутренних органов павших мышей характерны для сальмонеллеза: шерсть тусклая, взъерошенная. Видимые слизистые оболочки блестящие, гладкие, бледного цвета. В грудной и брюшной полостях содержится красноватая жидкость, с примесью фибрина. В перикарде - серозный или серозно-фибринозный экссудат. Сердечная мышца дряблая и тусклая на разрезе. В легких воспалительные очаги. Мезентериальные лимфоузлы набухшие, сочные и гиперемированые. В кишечнике отмечается катаральное воспаление. Тонкий отдел кишечника вздут газами, в нём содержится мутная густая слизь. Слизистая оболочка кишечника отёчная, местами гипереми-рована, резче на складках, иногда с точечными кровоизлияниями. Слизистая оболочка толстых кишок разрыхлена. Печень увеличена, ломкая и имеет темно 75 оранжевый цвет. Поверхность печени окрашена неравномерно. Селезёнка увеличена, пульпа малиново-красного цвета.
У выживших мышей, подвергнутых эвтаназии на 14 день эксперимента па-то логоанатомических изменений, характерных для сальмонеллеза не установлено.
Испытуемая композиция обладает выраженным противоинфекционным действием, предохраняя от гибели 70 % мышей, при заражении их смертельной дозой Salmonella spp. Введение 4% АСД-2Ф обеспечило протективную защиту на уровне 60 %. Раствор 1% сукцината натрия предотвратил гибель лишь 30% мышей. Таким образом, противоинфекционная активность испытуемой композиции выше, чем у входящих в ее состав компонентов. 2 опыт. Моделирование острого токсикоза токсином E.coli Опыты были проведены на 40 белых мышах. Было сформировано три опытные и одна контрольная группа животных, по 10 особей в каждой.
Мышам первой опытной группы внутрибрюшинно, в дозе 0,2 мл, ввели испытуемую композицию. Животным второй и третьей опытных групп внутрибрюшинно, в той же дозе, ввели 1 % р-р сукцината натрия и 4% р-р АСД Ф -2, соответственно. Мышам контрольной группы вводился физиологический раствор.
Клинические испытания иммунометаболической композиции на основе янтарной кислоты и антисептика-стимулятора Дорогова второй фракции на продуктивных животных
Первый научно-производственный опыт по оценке влияния испытуемой композиции на обменные процессы и систему иммунитета был проведен на глубокостельных коровах учхоза Курской ГСХА «Знаменское». Молочная продуктивность коров в пределах 5300 - 5500 кг молока.
При клиническом осмотре коров у большинства из них отмечены следующие характерные признаки: волосяной покров тусклый, в области шеи алопеции, слизистые оболочки бледные, жвачка редкая, у многих отсутствует, у большинства животных копыта деформированы. У многих коров регистрируется нарушение воспроизводительной функции.
На основании клинического осмотра животных есть все основания предполагать, что у животных молочного стада имеют место достаточно выраженные нарушения обменных процессов. Для подтверждения этого предположения нами была предложена следующая схема научно-производственного опыта: в хозяйстве было отобрано 20 коров на последнем месяце стельности, из которых по принципу аналогов были сформированы опытная ( п=10) и контрольная ( п=10), группы. Дозы и кратность применения имунометаболического состава нами были отработаны в ходе предварительных опытов.
Коровам опытной группы вводили испытуемую композицию внутримышечно, в дозе 10 мл, четыре раза, за 30, 20 и 10 дней до предполагаемых родов и сразу после отела. Контрольным животным внутримышечно, в дозе 10 мл, в те же сроки вводили физиологический раствор
Кровь для исследования отбиралась за месяц до отела и на 3-5 день после отела. Телятам, полученных от коров опытной группы на 2-3 день после рождения испытуемая композиция вводилась внутримышечно, в дозе 2 мл. Кровь для исследования брали в первый день введения испытуемой композиции и повторно через две недели.
Для оценки состояния белкового обмена определяли содержание общего белка и его фракций в сыворотке (плазме) крови, содержание мочевины и креати-нина. Данные по содержанию общего белка и его фракций в сыворотке крови коров и телят в таблице 11.
При анализе фоновых данных, у коров данного хозяйства в сыворотке крови концентрация общего белка в среднем была немного выше физиологической нормы (88,20±12,62 - 87,90±14,59 г/л). Следует отметить, что у 6 коров из 20 содержание белка было ниже нормы (56,4-59,2 г/л), а у 5 - значительно выше физиологической нормы. Такие показатели свидетельствуют о нарушении белоксинтези-рующей функции печени.
Содержание альбуминов составило 23,50±1,73 - 27,30±2,23 % , что ниже нормы. Содержание а-глобулинов близко к верхней границе физиологической нормы (18,40±1,56 - 22,10±1,62 %), содержание Р-глобулинов несколько превышало норму (26,40±2,84-30,10±2,44 %), а содержание у-глобулинов было ниже нормы(24,30±3,28-27,90±1,73 %) Снижение альбумин-глобулинового коэффициента указывает на глубокое нарушение белкового обмена. Таблица 11 - Динамика содержания общего белка и его фракций в сыворотке крови коров и телят достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы На 3-5 день после отела в контрольной группе отмечалось снижение уровня общего белка на 12,5 г/л (14,1%), а так же уменьшение содержания у - глобулинов до уровня 24,30±3,28 %, (3- глобулинов фракции до уровня26,96±5,27 %. Содержание альбуминов все еще оставалось ниже физиологической нормы.
У животных опытной группы на фоне применения иммунометаболической композиции, произошли выраженные изменения в состоянии белкового обмена. Снижение содержания общего белка в сыворотке крови после отела было меньше, чем в контрольной группе и составило 4,6 г/л (5,23%).
При анализе индивидуальных показателей нами отмечено, что изменения в содержании общего белка наиболее выражены у животных, имеющих отклонения, как в сторону уменьшения, так и в сторону увеличения. После воздействия испытуемой композиции данный показатель у большинства животных (16 голов) не выходил за пределы физиологической нормы.
Соотношение белковых фракций оптимизировалось за счет фракции альбуминов и у-глобулинов. Содержание альбуминов достигло 34,18±2,65%, уровень у- глобулинов повысился до 35,6 ±2,5 % . Наглядно изменения в протеинограм-мах опытных и контрольных животных представлены на рис. 3. В учхозе «Знаменское» содержание общего белка в сыворотке крови телят опытной и контрольной групп, до введения иммунометаболического состава, в возрасте 3 дней, было ниже, чем у коров, и составило в контрольной группе 56,38±9,62 г/л, а в опытной - 59,95±8,64 г/л.
Под влиянием иммунометаболического состава в возрасте 15 дней у телят опытной группы отмечалось повышение концентрации белка на 10,4 г/л (17,3%), против 5,84 г/л (10,36%), в контрольной группе. Различия были статистически достоверны (р 0,05). Протеинограмма опытных телят характеризовалась повышением уровня альбуминов до 27,94±3,15 %, у -глобулинов до 31,48±2,42 %, что достоверно выше, чем в контрольной группе (р 0,05).
В сыворотке крови контрольных телят к 15-дневному возрасту содержание альбуминов все еще было низким - 21,25±3,12 %, а фракция у -глобулинов составила 22,49±1, 84%.
Фоновый показатель содержания мочевины в сыворотке крови коров в контрольной группе составлял 6,56±0,59 моль/л, а в опытной - 6,68±0,79 моль/л. Повышенный уровень мочевины в крови стельных и отелившихся коров так же свидетельствует о нарушении обмена веществ. Введение иммунометаболического состава привело снижению содержания уровня мочевины в сыворотке крови коров опытной группы на 17,96 %. В контрольной группе содержание мочевины осталось на прежнем уровне.
В сыворотке крови телят опытной группы была отмечена тенденция к уменьшению содержания мочевины, разница между опытной и контрольной группой после опыта составила 0,35 моль/л. Содержание креатинина в сыворотке крови животных подопытных групп было в пределах физиологической нормы. Достоверного изменения содержания креатинина под влиянием испытуемой композиции нами не отмечено.
Таким образом, отличительной и весьма характерной особенностью применения испытуемой композиции являлась нормализация основных показателей белкового обмена. Коррекция содержания общего белка и устранение диспро-теинемии у животных опытных групп объясняется метаболическим действием ЯК, которая стабилизирует структуру и функциональную активность митохондрий, является индуктором синтеза белков. При этом весьма существенным является тот факт, что сниженные показатели увеличивались, а повышенные возвращались в нормальные пределы. Мы объясняем это особенностями действия солей ЯК, которые наибольшее влияние оказывают на патологически измененные или находящиеся в состоянии «возбуждения» клетки.
Из данных таблицы 12 видно, что у большинства глубокостельных коров были снижены показатели резервной щелочности до уровня 35,7±1,61 - 36,2 ±0,61 об. % СОг. Как известно, низкие показатели резервной щелочности являются своеобразным индикатором, указывающим на нарушение всех обменных процессов.
Обоснование состава и способ получения иммунометаболической композиции с включением микроэлементов
Проведенные опытно-экспериментальные исследования свидетельствуют о том, что сочетание ЯК с АСД-2Ф, обеспечивает многократное усиление их про-тективных свойств и позволяет получить высокоэффективный иммунометаболи-ческий состав для профилактики и лечения иммунодефицитов, нарушений обмена веществ, инфекционных заболеваний животных. Учитывая уникальные свойства ЯК, позволяющие усиливать положительные лечебные эффекты различных препаратов, мы поставили своей целью изучить возможность дальнейшего расширения сферы ее применения в сочетании с другими лекарственными препаратами при различной патологии.
За последние десятилетия в инфекционной патологии людей и животных значительно возросла роль условно патогенной микрофлоры как За последние десятилетия в инфекционной патологии людей и животных значительно возросла роль условно патогенной микрофлоры как возбудителей различных инфекционных заболеваний, в том числе септических и гнойно-воспалительных осложнений при травмах и оперативных вмешательствах.
Повсеместное применение антибактериальных препаратов для лечения заболеваний различной этиологии способствует селекции и диссеминации антибио-тикорезистентных микроорганизмов, что приводит к увеличению случаев гнойно-септических заболеваний. Лечить больных с гнойно-септической инфекцией с каждым годом становится все труднее, что связано с приобретенной резистентностью возбудителей к большинству применяемых в клинике химиотерапевтиче-ских препаратов.
При лечении гнойно-септических заболеваний сложность задачи состоит в том, что одновременно необходимо добиться решения ряда вопросов, в частно 157 сти, подавить жизнедеятельность патогенной микрофлоры, нейтрализовать токсические продукты ее жизнедеятельности, восстановить нарушенную трофику тканей в патологическом очаге.Для подавления жизнедеятельности патогенной микрофлоры наиболее широко применяется химио- антибиотикотерапия. Однако быстрое формирование устойчивости микроорганизмов к антибиотикам диктует необходимость поиска новых, альтернативных антимикробных препаратов. Кроме того, применение мощных средств химио-антибиотикотерапии вызывает угнетение иммунной системы. Большое значение имеют вопросы восстановления нарушенных метаболических процессов и механизмов иммунорегуляции в тканях патологического очага. В поврежденных тканях возникает клеточное голодание, усугубляющееся повышением катаболизма вследствие усиления выброса глюко-кортикоидов. Повышение потребности в энергетических ресурсах ведёт к распаду эндогенных белков и жиров, образуется много недоокисленных продуктов, чему способствует также гипоксия тканей вследствие расстройства микроциркуляции. Нарушение периферической гемодинамики и обмена, энергетический голод, чрезмерное образование недоокисленных продуктов приводят к изменению кислотно-основного состояния, в месте повреждения развивается метаболический ацидоз.
Научные исследования по преодолению лекарственной резистентности болезнетворных микроорганизмов ведутся достаточно интенсивно. Проблема современной химо-антибиотикотерапии, связанная с множественной лекарственной резистентностью микроорганизмов, активизировали исследовательскую деятельность по целому ряду научных направлений. Так, в области инфекционной патологии, получены принципиально новые данные о том, что выздоровление при вирусных и бактериальных инфекциях связано не только с удалением из организма возбудителя, но и с восстановлением возникающих в ходе болезни иммунологических дефектов, выключением иммунопатологических процессов, индуцированные патогенным агентом. Следует отметить, что развитие любого инфекционного процесса неизбежно влечет за собой изменения в метаболической системе. Если в системе метаболизма произошли выраженные сбои, то у животных это проявля 158 ется развитием иммунодефицитного состояния. В таких случаях применение иммуностимуляторов и вакцин не дает желаемого результата, а может привести к дальнейшему угнетению иммунной системы. Совершенно очевидно, что эти обстоятельства выдвигают перед исследователями необходимость поиска новых подходов воздействия на инфекционный процесс. Исходя из вышеизложенного, мы поставили перед собой задачу провести направленный поиск по выбору препаратов, сочетание которых обеспечивает одновременно выраженный антимикробный, детоксицирующий и иммуно-трофикостимулирующий эффект.
В ходе исследований мы обратили внимание на формалин. Давно известно, что формалин обладает исключительно высокой бактерицидной активностью. Так, концентрация 1:6000 он прекращает рост большинства микроорганизмов, его широко используют в вакцинном производстве.
Еще в 1968 году, применяя низкие, 0,2-0,3% концентрации формалина при инъекциях А.Б. Терюхановым (1968) впервые был обнаружен эффект снижения активности инфекционного процесса.
По данным В.Н. Ласкового (1997), внутримышечное введение 0,2 % формалина позволяет обеспечит снижение вирулентности возбудителя вирусного трансмиисвного гастроэнтерита и одновременно стимулировать специфическую иммунную защиту.
Эффект дезаллергизации организма при парентераольном введении низких концентраций формалина был установлен в исследованиях А.А. Евглевского (1992) и В.Н. Ласкавого (1997). Возможность применения низких концентраций формалина при локальных гнойно-септических заболеваниях показана в исследованиях А.А. Евглевского с соавт. (2004; 2005; 2006), М.Г. Лебедевой (2004), Н.В. Воробьевой (2006).
В настоящее время установлено, что формальдегид оказывает защитное действие на живые клетки органов и тканей, сдерживает повреждающие процессы ПОЛ, присутствует в нормально функционирующей ткани, т.е. является естественным субстратом живой клетки. Его концентрация в организме снижается при заболевании. Это выдвигает версию о том, что чувствительность к инфекци 159 онным патогенам может определяться концентрацией формалина в организме. Для сохранения всех полученных эффектов и дополнительного усиления антиинфекционной активности мы решили ввести в состав иммунометаболической композиции формалин. Применительно к нашим научно-посковым исследованиям комбинация метаболика ЯК и формалина, ввиду разного механизма их действия, является вполне допустимой.Мы посчитали, что формалин обеспечит антимикробную активность, по крайней мере, при наружном или полостном применении. По нашему мнению формалин обеспечивает не только гибель возбудителей гнойно-септической инфекции в патологическом очаге, но и инактивирует токсичные продукты их жизнедеятельности, что снижает повреждающее действие на здоровые ткани. При этом инактивированные токсины не утрачивают иммуногенных свойств, что обеспечивает ускоренное формирование локального иммунитета. ЯК обеспечивает нормализацию метаболических процессов в тканях патологического очага.Окончательный вариант испытуемого состава получил рабочее название «Формол-янтарный биостимулятор».
