Введение к работе
Актуальность темы. Грипп птиц (ГП) - высококонтагиозная особо опасная
зооантропонозная болезнь. Заболевание наносит большой экономический ущерб,
связанный с гибелью и уничтожением птицы, затратами на проведение ветеринарно-
санитарных мероприятий, а также представляет опасность для человека [В.А.
Бакулин, 2006].
В Российской Федерации высокопатогенный грипп птиц (ВПГП) не регистрировали с 1968г. по 2005г., и страна считалась благополучной по этому заболеванию. Низкопатогенные вирусы неоднократно вьивляли в разные годы среди дикой перелётной птицы на территории страны. В 2005г. в РФ впервые зарегистрирован грипп птиц, вызванный вирусом гриппа птиц (ВГП) H5N1[H.A. Власов, 2006].
Вакцинацию в составе комплекса мер борьбы с ВПГП применяют в некоторых странах [I.Capua, 2004; Н. Chen, 2008-2009; I.H. Brown, 2007; L.D. Sims, 2007]. Обычно для этих целей используют инактивированные и/или векторные вакцины, экспрессирующие ген гемагглютинина [Yu. Kangzhen, 2007; Е. Spackman, 2008].
В РФ для предотвращения распространения и проникновения вируса H5N1 в птицеводческие предприятия с 2006г. применяется стратегия вакцинации домашних птиц разных видов в зонах повышенного риска, примыкающих к местам массовых скоплений диких перелетных водоплавающих птиц [Н. А. Власов, 2006].
В 2005г. в ФГУ «ВНИИЗЖ» по заданию Россельхознадзора была разработана вакцина против гриппа птиц инактивированная эмульгированная из штамма ВГП H5N1. Серийное производство препарата было организовано в ОАО «ПЗБ», и в 2006г. создан его необходимый резерв [Д.С. Сурнев, 2007]. Однако до выпуска первой серии вакцины грипп распространился в 8 субъектах РФ. Особенно тревожная ситуация сложилась в Южном Федеральном округе из-за проникновения вируса в промышленные предприятия, где погибло и было уничтожено более 1,5 млн. кур [А.М. Смирнов, 2007].
В ФГУ «ВНИИЗЖ» были проведены испытания антигенной и иммуногенной активности вакцины на курах, и была показана высокая эффективность биопрепарата. Однако изучение продолжительности поствакцинального иммунитета у разных видов домашних птиц на момент осуществления стратегии вакцинации не было проведено. В ходе анализа информации о напряженности иммунитета у домашних птиц в разных регионах РФ были получены противоречивые данные, что, видимо, было связано со сложностью обеспечения качественного и статистически достоверного контроля напряженности иммунитета у привитого поголовья в личных хозяйствах граждан. Поэтому изучение поствакцинального иммунитета к гриппу у разных видов птиц в экспериментальных условиях приобрело актуальность. Кроме того, занос в 2008г. в
4 РФ штамма H5N1 ВГП новой генетической линии (клад 2.3.2) обусловил необходимость изучения протективных свойств вакцин в отношении этого штамма.
Цель и задачи исследований. Цель работы - изучение поствакцинального гуморального иммунитета к гриппу у разных видов домашних птиц.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
- изучить динамику поствакцинального иммунитета к гриппу птиц у кур, уток,
мускусных уток и гусей в зависимости от дозы, способа инъекции и кратности
вакцинации;
- определить возможность использования эритроцитов селезня в реакции
торможения гемагглютинации (РТГА);
изучить трансовариальную передачу поствакцинальных антител к ВГП;
оценить протективные свойства инактивированных вакцин в отношении разных штаммов H5N1 ВГП и установить сроки выделения вируса во внешнюю среду при проведении контрольного заражения;
сравнить протективный потенциал вакцин из гомологичного эпизоотическому (H5N1) и гетерологичного (H5N3) штаммов ВГП;
оценить местные тканевые реакции на вакцину у разных видов домашних птиц. Научная новизна. Впервые изучена динамика поствакцинального иммунитета к
гриппу птиц после иммунизации инактивированной эмульгированной вакциной из штамма H5N1 в зависимости от дозы, способа инъекции и кратности вакцинации у кур, уток, мускусных уток и гусей.
Определены протективные свойства инактивированных вакцин против ВГП подтипа Н5 в отношении штаммов ВГП H5N1, принадлежащих кладам 2.2. и 2.3.2.
Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований разработаны «Рекомендации по вакцинации птиц против гриппа птиц», которые были одобрены Россельхознадзором и разосланы руководителям органов управления ветеринарией субъектов РФ и руководителям территориальных управлений Россельхознадзора в виде циркулярного письма № ФС-АС-2/8881.
Внесены изменения в инструкцию по применению вакцины против гриппа птиц инактивированной эмульгированной.
Одобрены ученым советом и утверждены зам. директора ФГУ «ВНИИЗЖ» «Методические рекомендации по анализу динамики поствакцинального гуморального иммунного ответа у птиц (на примере гриппа, ИЛТ и ИБК)». Основные положения, выносимые на защиту.
1. Динамика поствакцинального иммунитета к гриппу птиц после иммунизации инактивированной эмульгированной вакциной из штамма H5N1 в зависимости от дозы, способа инъекции и кратности вакцинации у кур, уток, мускусных уток и гусей.
5 2. Протективные свойства инактивированных эмульгированных вакцин против ГП подтипа Н5 в отношении штаммов ВГП H5N1, изолированных на территории РФ.
Личный вклад соискателя. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Отдельные этапы выполнены совместно с сотрудниками ФГУ «ВНИИЗЖ» Кулаковым В.Ю., Фроловым СВ., Чвалой И.А., Бабиным Ю.Ю., Андриясовым А.В., Циванюк М.А., Волковым М.С., Пичуевым А.Е., а так же с сотрудниками ГНУ «ВНИИСХ» Фроловой Л.В., Гришиной Д.С., за что автор выражает им искреннюю благодарность.
Апробация результатов работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на III Международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (г. Москва, 2007г.), отчетном собрании ассоциации гусеводов в ГНУ «ВНИИСХ» Россельхозакадемии (г. Суздаль, 2007г.), на заседаниях ученого совета ФГУ «ВНИИЗЖ» в 2007-2010 гг.
Публикация научных исследований. По теме диссертации опубликовано 10 работ, в том числе 7 статей в журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 148 страницах машинописного текста, включает введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложения. Диссертация иллюстрирована 38 таблицами и 23 рисунками. Список литературы включает 200 источников, из них 106 отечественных и 94 зарубежных. В приложениях представлены копии титульных листов документов, подтверждающих достоверность результатов работы, ее научную и практическую значимость. 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы
