Введение к работе
Актуальность темы
Эффективность селекционного процесса во многой зависит от темпов селекционной работы. Традиционные, классические методы выведения новых сортов большинства культур и. в частности, риса-пропесс. требующий,как правило, т-10 лет.
Стремительное развитие альтернативных, сравнительно молодых направлений селекции сельскохозяйственных злаков:клеточных технологий культивирования in vitro органов, тканей,изолированных протопластов, методов генной инженерии может облегчить и ускорить селекционный процесс, повысив тем самый его эффективность.
Наиболее подходящий объектом для генной и клеточной инженерии являются протопласты (лишенные стенки клетки)-отправная точка многочисленных методик генных манипуляций.
Основное направление применения технологии протопластов для выполнения практических селекционных задач - создание новых, генетически модифицированных растений посредством:
сонатической гибридизации протопластов, позволяющей получать Формы с уникальным сочетанием ядерного и цитоплазмати-ческого геномов;
пряного переноса чужеродных генов (часто в Форне плаз-мид) в протопласт - реципиент.
Генные манипуляции позволяют преодолеть нескрешиваеность сильно дивергированных видов, генетически модифицировать Формы с длинным жизненным циклон, вносить в ренипиентную Форму ряд полезных признаков-цитопяазматическую мужскую стерильность,устойчивость к болезням, сельхозвредителям, гербицидам, они позволяют ускорить селекционный процесс в 2-3 раза, так как не тре-
- 4 -буют долговрененной процедуры насыщающих скрещиваний, обычной для традиционной селекции при создании форм с указанными признаками.
Реальность практического воплощения возможностей технологии протопластов в селекционную практику зависит прежде всего от наличия методик регенерации интактных растений.
Цель и задачи исследования
Цель настоящей работы заключалась в получении растений из протопластов разных Форм риса. Для этого выполнялись следующие задачи:
селекция норфогенных (способных к эмбрио- или органогенезу) , мелкодисперсных суспензионных культур клеток;
оптимизация условий энзимной обработки клеточных культур, предназначенных для выделения протопластов;
подбор оптимальных питательных сред и условий культивирования протопластов;
получение регенерантов из морфогенного каллуса, сформированного протопластами.
Научная новизна работы
Исследования по разработке методик регенерации растений из протопластов злаков и применение их для выполнения селекционных задач является новым направлением экспериментальной биологии в нашей стране.
В результате проведенной работы впервые в России получены регенеранти из протопластов риса.
Разработана методическая схема получения норфогенных суспензионных культур и выработаны критерии оценки пригодности
- 5 -клеточных суспензий в качестве источников протопластов.
Эмпирическим путем подобраны условия эксперимента, позволяющие получать максимальный "урохай" протопластов.
Практическая ценность работы
Полученные в данной работе результаты - базис для проведения дальнейших исследований по генной инженерии риса, и внедрения технологии протопластов в практическую селекцию этой
Разработанная методика получения морфогенных суспензионных клеточных культур может быть, кроме того, использована для экспериментального мутагенеза In vitro, а также изучения сома-клональной изменчивости.
Апробация работы
Результаты исследований докладывались на региональной научно-теоретической конференции "Научно-технический прогресс в сельской хозяйстве Северного Кавказа"(1996г). на заседаниях ученого совета ВНИИ риса.
Публикации
По материалам представленной работы опубликовано 2 печатных работы. 2 статьи находятся в печати.
Структура и обьем диссертации
диссертация состоит из введения, __глав,выводов, предложений к внедрению и списка литературы, который включаетлЙ^наине-
нований, из них JlA зарубежных авторов. Работа изложена на_^Г
страницах машинописного текста и содержит _^__таблиц и .//^.рисунков.
