Введение к работе
Актуальность темы
Характер опухолевого роста во многом зависит от эффективности иммунологических защитных механизмов и от способности трансформированных клеток уходить от иммунологического надзора.
Меланома считается иммуногенной опухолью, экспрессирующей опухолеассоциированные антигены: раково-тестикулярные антигены (MAGE), меланоцитные дифференцирующие антигены (тирозиназа, тирозиназа-связанные белки TRP-1/-2, MelanA/MART-1, gp 100 и gp75). Специфический клеточный иммунный ответ на меланомные антигены происходит путем узнавания чужеродных пептидов рецепторами Т-клеток посредством молекул главного комплекса гистосовместимости (МНС) дендритных клеток.
К белкам, способным регулировать иммунные механизмы и выступать в качестве факторов ухода опухоли от иммунологического контроля, относятся растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы. Каждая из растворимых дифференцировочных молекул или растворимых молекул гистосовместимости может быть представлена несколькими изоформами, образующимися за счет шеддинга с мембраны клетки или альтернативного сплайсинга матричной РНК. В норме растворимые формы мембранных антигенов находятся в равновесном состоянии. Нарушение их равновесного содержания в межклеточном пространстве и биологических жидкостях организма приводит к модуляции межклеточных мембранных взаимодействий и, соответственно, иммунного ответа. Уровень растворимых молекул HLA I класса, антигена CD8 и растворимого комплекса HLA I - CD8 показывает состояние Т-клеточного иммун-ного ответа.
Межклеточная сигнализация в иммунной системе осуществляется также с помощью цитокинов. Это белковые или полипептидные продукты активи-рованных клеток иммунной системы, которые являются медиаторами межклеточных коммуникаций при иммунном ответе, осуществляют взаимосвязь между специфическим иммунитетом и неспецифическими защитными реакциями, действуя в обоих направлениях. Изменение равновесия клеточного Th1 и гуморального Th2 звена приводит к существенным изменениям иммунных реакций у больных меланомой в процессе вакцинотерапии.
В процессе противоопухолевой вакцинотерапии в сыворотке крови больных меланомой могут образовываться антитела против антигенов, которые экспрессируются в клетках, используемых для вакцины. Роль гуморальных антител в противоопухолевой защите неоднозначна. В некоторых работах выявлено их защитное действие, в других – противоопухолевые антитела со-действуют прогрессивному росту опухоли.
В связи с этим является актуальным изучение гуморального иммунного ответа при аллогенной и аутологичной вакцинации у больных диссеминированной меланомой.
Цель исследования
Изучить гуморальное звено противоопухолевого иммунитета в процессе вакцинотерапии больных с диссеминированной меланомой.
Задачи исследования
-
Оценить уровень растворимой формы молекулы HLA I класса в сыворотке крови у больных диссеминированной меланомой как предполагаемый прогностический маркер для контроля над состоянием иммунологической системы организма при вакцинотерапии.
-
Оценить значение содержания уровня растворимого антигена CD8 в сыворотке крови у больных диссеминированной меланомой в процессе вакцинотерапии.
-
Определить уровень растворимого комплекса HLA I -CD8 в сыворотке крови у больных диссеминированной меланомой в процессе вакцинотерапии.
-
Определить уровни цитокинов ИЛ-2, ИЛ-12, ИЛ-4, ИЛ-10 у больных диссеминированной меланомой в процессе вакцинотерапии.
-
Определить появление в сыворотке крови у больных диссеминированной меланомой антител против опухолеассоциированных антигенов в процессе вакцинотерапии.
Научная новизна
Впервые исследованы растворимые молекулы HLA I, растворимый антиген CD8 и растворимый комплекс HLA I-CD8 в сыворотке крови больных диссе-минированной меланомой в процессе вакцинотерапии.
Впервые выявлена прогностическая значимость повышенного уровня растворимых молекул HLA I класса, белка S-100 и интерлейкина-2 (ИЛ-2) у больных диссеминированной меланомой в процессе вакцинотерапии аутологич-ными дендритными клетками.
Впервые выявлено образование противоопухолевых антител в сыворотке крови больных диссеминированной меланомой в процессе вакцинотерапии вакциной Мелавак.
Научно-практическая значимость
Обнаружены новые прогностические маркеры у больных меланомой: уровень растворимых сывороточных антигенов – растворимые молекулы HLA I, растворимый антиген CD8, белок S-100 и ИЛ-2. Полученные данные имеют мониторинговую значимость и могут быть использованы для разработки новых методов оценки эффективности терапии больных.
Целесообразно использовать образование специфических антител в сыворотке крови больных диссеминированной меланомой при оценке иммунологической эффективности противоопухолевой вакцинации.
Апробация работы. Апробация диссертационной работы состоялась 4 августа 2011 г. на совместной научной конференции лаборатории медицинской биотехнологии, лаборатории экспериментальной диагностики и биотерапии опухолей, лаборатории клеточного иммунитета, лаборатории иммунофармако-логии, лаборатории лучевых методов лечения опухолей НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей ФГБУ «РОНЦ им.Н.Н.Блохина» РАМН, а также отделения биотерапии НИИ клинической онкологии ФГБУ «РОНЦ им.Н.Н.Блохина» РАМН.
Материалы, изложенные в диссертационной работе представлены на IX Всероссийской научно-практической конференции «Отечественные противоопухолевые препараты» (Нижний Новгород, 2010), на X Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты» (Москва, 2011), на II Конференции отдела клинической химии ГУП МНКЦ «ИНТЕРМЕДБИОФИЗХИМ» (Москва, 20011).
По материалам диссертации опубликовано 5 работ в рецензируемых ВАК РФ журналах: 3 статьи и 2 тезиса докладов.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов и их обсуждения, заклю-чения, выводов и списка литературы (120 источников). Список литературы содержит 47 отечественных и 73 иностранных источника. Материалы диссертации изложены на 99 страницах машинописного текста и включают 19 рисунков и 10 таблиц.
