Введение к работе
Актуальность темы. В патогенезе многих заболеваний важное место принадлежит нарушениям конфигурации эритроцитов (Баренбойм, Маленков, 1986; Новицкий, 2008Карчинская, 2008). В условиях непосредственного контакта в периферическом русле токсины могут оказывать различное влияние на биохимические системы, ответственные за сохранение целостности мембран эритроцитов. Модель биологической мембраны эритроцита можно использовать для изучения патологических процессов. При многих патологиях за счёт повреждения цитоскелета эритроциты превращаются в эхиноциты. Вследствие деформации и агрегации эритроцитов нарушаются микроциркуляция и реологические свойства крови (Полещук и др., 2008; Kikuchietal., 1994; van-Gelderetal., 1996; Parthasarathi, Lipowsky, 1999).He исключено и влияние на структуру эритроцитов таких эндотоксинов, как молекулы средней массы (МСМ). Интерес к исследованию молекул средней массыопределяется прежде всего тем, что они получили известность как важные универсальные маркеры интоксикации.Эхиноцитоз и накопление продуктов гидролиза белка в виде молекул средней массы можно рассматривать как универсальные биохимические и морфологические изменения в составе крови при эндо- и экзо- генных интоксикациях. Немаловажно, что эти маркеры не только являются последствием действия токсинов, но и сами порождают цепи патологических реакций. Учитывая этот факт, актуальным становится вопрос поиска оптимальных методов и средств, способных осуществлять обшуюдетоксикацию и, в том числе, устранять эхиноцитоз и действие биологически активных молекул средней массы. Абдоминальная декомпрессия -новое направление в ветеринарной медицине, осуществляемое путем воздействия отрицательного избыточного давления на локальные зоны тела. Механизм лечебного воздействия абдоминальной декомпрессии связан с приливом крови к органам брюшной полости во время разрежения, рефлекторным снижением тонуса периферических сосудов, уменьшением внутрибрюшного давления, улучшением циркуляции крови и ее реологических свойств (Длигач, Иоффе, 1982; Аванесов, 2001; Скопичев и др., 2003; 2006; 2007; Скопичев, Жичкина, 2010). Использование локального отрицательного давления (ЛОД) способствует более быстрому очищению организма от токсинов различного происхождения.
Таким образом, актуальность темы диссертации определятся рассмотрением вопросов мало изученной проблемы деформации эритроцитов при интоксикациях различного генеза, а также исследованием нового направления ветеринарной физиотерапии - детоксикации с использованием локального отрицательного давления. Подобные работы необходимы в ходе разработке диагностических и лечебных мероприятий при заболеваниях, сопровождающихся развитием интоксикационного синдрома.
Цели и задачи исследования.Основной целью исследования явилось определение изменений рельефа поверхности эритроцитов в ответ на действие фосфорорганических ингибиторов ацетилхолинэстеразы (ФОИ), молекул средней массы, при эндогенных интоксикациях на примере хронической почечной недостаточности (ХПН) и при детоксикации с использованием абдоминальной декомпрессии.
Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:
Определить процентную долю эхиноцитов, содержание молекул средней массы и молекулярно-массовое распределение веществ пептидной природы в крови крыс после отравления фосфорорганическими соединениями: фосфаколом и карбофосом
Изучить методом сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) изменения рельефа поверхности эритроцитов в результате повреждающего действия фосфорорганических ингибиторов ацетилхолинэстеразы (фосфакола и карбофоса)
Определить процентную долю эхиноцитов, содержание молекул средней массы и молекулярно-массовое распределение веществ пептидной природы в крови кошек, больных хронической почечной недостаточности
Определитьпроцентную долю эхиноцитов, содержание молекул средней массы в крови крыс при отравлении фосфорорганическими соединениями и кошек с диагнозом хроническая почечная недостаточность после детоксикации с применением абдоминальной декомпрессии
Выяснить изменение содержания эхиноцитов в кровеносном русле паренхимы селезёнки и печени крыс, отравленных фосфаколом, после детоксикации с использованием абдоминальной декомпрессии
Установить invitro изменения формы эритроцитов при воздействии на кровь здоровых кошек надосадочной жидкости, полученной из сыворотки крови кошек, больных хронической почечной недостаточностью, и содержащей молекулы средней массы в повышенной концентрации
Выявить корреляционную связь между процентной долей эхиноцитов и содержанием молекул средней массы после отравления крыс фосфаколом и сеансов абдоминальной декомпрессии
Научная новизна и практическая значимость работы. В диссертационном исследовании зарегистрированы изменения рельефа поверхности эритроцитов с образованием эхиноцитовпод влиянием фосфорорганических ингибиторов ацетилхолинэстеразы (карбофоса, фосфакола) invivo, при эндогенных интоксикациях на примере хронической почечной недостаточности кошек invivo, а также при воздействии молекул средней Maccbiinvitro. На основании экспериментального материала и анализа литературных данныхвпервые предположена и установлена способность молекул средней массыоказывать непосредственное влияние на деформацию нормоцитовс образованиемзхиноцитовіпуііго.
Показано, что применение сеансов абдоминальной декомпрессии при лечении
эндо- и экзо- генных интоксикаций способствует значительному снижению в крови
универсальных маркеров интоксикации: уровня молекул средней массы и процентной
доли эхиноцитов. Следовательно, подтверждена эффективность этого метода
детоксикации (на примере хронической почечной недостаточности кошек и
отравления крысфосфорорганическими ингибиторамиацетилхолинэстеразы).
Установлена продолжительность сохранения эффекта снижения
процентнойдолиэхиноцитов и содержаниеммолекул средней массы после проведения сеансов абдоминальной декомпрессии: по данным проведённого эксперимента она составляет 1 сутки. Показано, что воздействие абдоминальной декомпрессии способствует «утилизации»эхиноцитов в паренхиме селезёнки и печени.
Впервые получены данные о наличии сильной положительной корреляции между долей эхиноцитов и содержаниеммолекул средней массы после отравления крыс фосфаколом и сеансов абдоминальной декомпрессии. Ранее в литературе имелись лишь отрывочные сведения по данному вопросу.
Рассмотренные маркеры интоксикации могут быть исследованы в дальнейшем для оценки тяжести патологического состояния в клинической практике. Выявленная способность фракции, содержащеймолекулы средней массы, вызывать деформацию эритроцитов с образованием эхиноцитов может быть использована для дальнейшего подробного изучения изменения формы эритроцитовв ответ на действие различных повреждающих агентов.
Внедрение использования отрицательного давления на локальные зоны тела животных является перспективным направлением в комплексной профилактике и лечении ряда болезней, сопровождающихся развитием интоксикационного синдрома.
Материалы диссертации используются:
При разработке и усовершенствовании аппаратуры для локальной абдоминальной декомпрессии научно-промышленной компанией ООО «Фирма АКЦ». Полученные в ходе диссертационного исследования результаты реализованы 000 «Фирма АКЦ» в ходе разработки и усовершенствования комплекта изделий абдоминальной декомпрессии КАД-01-АКЦ, что подтверждается представленным актом реализации научных результатов
При лечении болезней, сопровождающихся развитием интоксикации, с использованием абдоминальной декомпрессии в составе комплексной терапии
При проведении лекционных и лабораторно-практических занятий со студентами и ветеринарными врачами Санкт-Петербургской Государственной Академии Ветеринарной медицины
