Введение к работе
Актуальность темы. Методыкультуры тканей широко используются в селекции болезнеустойчивых сельскохозяйственных растении. Применение этих методов позволяет индуцировать генетическую изменчивость и ускоренно отобрать Формы с необходимыми свойствами, сохраняя при этом генотишческую основу сорта. Выявление таких Форм обеспечивается использованием селективного Фактора, правильный выбор которого требует предварительного изучения механизмов взаимодействия патоген-хозяин. Это особенно важно в случае необли-гатных патогенов, к которым относится возбудитель ранней сухой
ПЯТНИСТОСТИ ТОМаТОВ Alt^rnaria aolanl (Ell. et Hart.) Sor. У НЄГО
не обнаружено хозяино-спешФичных токсинов, на Фоне которых можно было бы проводить отбор устойчивых Форм. Кулътуральные Фильтраты этого гриба, как и других патогенов, способных к сапрофитному способу существования, содержат большое количество метаболитов, но связанных с процессом патогенеза. Все это указывает на актуальность изучения физиолого-биохимических особенностей патогенеза . и разработки на их основе методов отбора Форм томата, устойчивых к
ВОЗбуДИТеЛЯМ ГрИбНЫХ ЗабОЛвВаНИЙ, И, В ЧаСТНОСТИ, К A.soiani.
Цель и задачи исследовании. Цель работы состояла в изучении
бИОХИМИЧеСКИХ ОСОбвННОСТей БЗаИМОДвйСТВИЯ ТОМаТОВ С A.soiani И
проведению! селекции in vitro на устойчивость к альтерпариозу. Для осуществления этой цели предстояло решить следующие задачи: 1) дать сравнительную характеристику коллекционных иггаммов и изо-
ЛЯТОВ A.eolani ПО КуЛЬТурЭЛЬНЫМ, бИОХИМИЧвСКИМ И ФИТОПЭТОЛОГИЧе-
ским признакам» 2) изучить биохимические особенности взаимодействия томата и A.soianiі 3) разработать способ восстановления агрессивности КОЛЛОКЦИОННЫХ ШТаММОВ A.soiani П0СЛ9 ИХ ДЛИТвЛЬНОГО КУЛЬ-
тавирования на искусственных питательных средах; 4) получить Фактор отбора в культуре in vitro, обладающий высокой степенью фитотоксичности и специфичности действия на ткани растений томата; 5) проверить действие селективного Фактора на известных сортах с разной степенью восприимчивости к д.зоіапі» 6) разработать метод отбора регенерантов томата, устойчивых к эльтернариозу; 7) провести ОТбОр В Культуре In vitro форм ТОМЭТ0В, УСТОЙЧИВЫХ К A.eolani;
8) получить семенное потомство 'растениа-регенерантов и провести оценку по устойчивости к использованному селективному Фактору in vitro; 9) оценить семенное потомство регенерантов по' устойчивости к патогену общепринятыми Фитопатологичоскими методами. .
Научная новизна работы заключается в использовании комплекса методов, в том числе культуры in vitro для изучения биохимических особенностей взаимодействия томатов с A.soiani. Впервые предложен метод культивирования A.soiani в стандартных условиях на каллуснои ткани томата, приводящий к значительному усилению синтеза грибом фитотоксичных поликетидных пигментов и существенному повышению агрессивности патогена, которую он постепенно утрачивал при росте на искусственных питательных средах. Благодаря высокой изменчивости свойственной этому грибу выращивание на каляуснои ткани томата позволило на основе одного коллекционного штамма получить 7 изоля-' тов, по своим свойствам соответствующих различным группам, составляющим природную популяцию патогена. На основании проведенных исследовании разработана схема отбора и последующей оценки в культуре in vitro ФОрМ ТОМаТа, УСТОЙЧИВЫХ К A.soiani. СвЛвКЦИЮ ПРОВОДИЛИ
на фоне автоклавирсванного гомогената мицелия гриба с остатками каллусноя ткани, на которой он выращивался. Специфичность действия этого Фактора в культуре in vitro проверена на известных сортах томата с различной степенью восприимчивости к A.eoiani. В результате селекции на основе восприимчивого сорта Талалихин-188 получены Формы томата, устойчивые к действию комплекса метаболитов патогена, участвующих в процессе патогенеза. Показано сохранение этой устойчивости в 1-м и 2-м семенном потомстве от самоопыления расте-ниа-регонерантов. В результате оценки в( и кг на устойчивость к A.soiani стандартными Фитопатологическими методами отобраны отно-' сительно устойчивые к этому патогену семьк. Впервые в результате
ИЗУЧеПИЯ бИОХіїМИЧеСКИХ ОСОбеННОСТей Процесса Патогенеза A.soiani
на томатах установлена корреляция уровня индукции грибом активности растительной /?-глюкозидазы со степенью восприимчивости сорта, Ота закономерность сохранилась и у семенного потомства полученных растении-реі'енерантов.
Практиктическая значимгсть. На основании результатов исследований разработана схема отбора и предварительной оценки в культуре -in vitro Форм томата, устойчивых к A.soiani. Предлагается биохимическиа тест для оценки устойчивости сортов томата к A.soiani по уровню активности /J-глюкозидазы, индуцируемой в тканях листьев при инокуляции патогеном. Разработан метод поддержания и быстрого восстановления агрессивности изолятов и коллекционных штаммов A.soiani путем выращивания их на каллусноя ткани томата.
Апробация работы. Результаты работа были представлены на Конференции аспирантов и молодых научных сотрудников ВИР им. Н.И.Ва-
вилова (1092. 1093), Годичном общем собрании Отделения защиты растения РАСХН 17.02.93; и Российском симпозиуме "Новые методы биотехнологии растений" (Путино, 1993) и її Международной конференции "Биология к: тьтивируемых клеток растений и биотехнология" (Алма-Ата, 1993).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ, Б работ находятся в печати.
Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 14,9 страницах машинописного текста и состоит из введения, шести глав, выводов, рекомендация и списка литературы. Работа иллюстрирована 22 рисунками и 25 таблицами. Библиография включает 200 источников, БО из них на русском языке.
