Введение к работе
Актуальность работы. По литературным данным, нейроинфекции составляют около трети всей патологии нервной системы. Значительное место в структуре заболеваемости нейроинфекциями занимает клещевой:энцефалит и сходное с ним по ряду синдромов заболевание - клещевой боррелиоз (Ю.В. Лобзин и соавт., 2000; А.П. Иерусалимский, 2001; Л.П. Ананьева, 2003).
Между тем эпидемиологическая ситуация с клещевым энцефалитом - в Российской Федерации продолжает ухудшаться: в 1980 году заболеваемость была в среднем 1,5, то к 1990 году она достигала уже 3,7, а в 1999 году составила 6,6 на 100 тысяч населения. За 20 лет отмечается более чем четырехкратный рост заболеваемости (А.П. Иерусалимский, 2001). Неблагополучная обстановка по клещевому энцефалиту и клещевому боррелиозу отмечена и в Удмуртской Республике. По данным Государственного доклада о здоровье населения Удмуртской Республики в 2002 году, уровень заболеваемости клещевым энцефалитом за последние пять лет остается стабильно высоким. В 2002 году заболеваемость клещевым энцефалитом была 18,3, а заболеваемость клещевым бор-релиозом - 24,4 на 100 тысяч населения (С.Г. Шадрин и соавт., 2003).
Диагностика клещевого энцефалита и клещевого боррелиоза в настоящее время затруднена в связи с наличием микст-инфекции и отсутствием типичной клиники при клещевом боррелиозе. Сохраняющаяся высокая летальность при клещевом энцефалите (от 3% до 18,6% по различным регионам страны), высокая частота остаточных явлений, риск развития хронического процесса заставляют искать новые методы раннего прогнозирования развития клинической формы и исхода заболевания при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе (АП. Иерусалимский, 2001; Л.П. Ананьева, 2003).
Вместе с тем при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе, как и при многих других патологических процессах, в ответ на проникновение чужеродного агента (вирус, бактерия) или повреждение ткани быстро развивается системная острофазовая реакция организма, сопровождающаяся рядом метаболических, гематологических и иммунологических сдвигов. Одним из наиболее характерных признаков острофазового ответа является изменение состава про-
«йіЗ
POG НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА СПетср«; ОЭ ТОО,
теинов сыворотки крови, названных белками острой фазы воспаления (Р. Laurent, 1981; М. Ollivier et ait 1986). Большинство белков острой фазы по структуре являются гликопротеинами (Л.И. Новикова, В.А. Апешкин, 1991).
В доступной литературе практически отсутствуют данные по определению суммарных гликопротеинов в сыворотке крови и спинномозговой жидкости (далее СМЖ), а также разделению их по углевод-белковым компонентам при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе.
Цель работы. Изучение показателей обмена гликопротеинов в сыворотке крови и СМЖ при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе для совершенствования их диагностики.
Задачи исследования. 1. Выделить суммарные препараты гликопротеинов сыворотки крови и СМЖ у практически здоровых лиц и больных клещевым л энцефалитом и клещевым боррелиозом.
Изучить изменения количественного и качественного состава гликопротеинов сыворотки крови у практически здоровых лиц и больных клещевым-, энцефалитом и клещевым боррелиозом в зависимости от формы, степени тяжести и периода заболевания.
Исследовать активность сиалидазы и фукозидазы в сыворотке крови и СМЖ в различные периоды заболевания у больных клещевым энцефалитом и клещевым боррелиозом.
Изучить корреляцию между уровнем содержания гликопротеинов в сыворотке крови и СМЖ у больных клещевым энцефалитом и клещевым боррелиозом.
Научная новизна. Впервые получены данные об изменениях общего содержания сывороточных гликопротеинов и соотношении в них углеводных компонентов у практически здоровых лиц и больных клещевым энцефалитом и клещевым боррелиозом. Новыми являются данные об изменениях компонентов молекул серомукоидов в сыворотке крови и спинномозговой жидкости при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе.
Впервые получены данные об активности сиалидазы и фукозидазы в сыворотке крови при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе. Новыми являются данные об активности сиалидазы в СМЖ при данной патологии.
Впервые разработан экспресс-метод количественного определения белков в сыворотке крови и в СМЖ, связывающихся с лектином конканавалином А. Данный метод был использован при обследовании больных клещевым энцефалитом и клещевым боррелиозом. При этом получены новые данные об изменениях содержания гликопротеинов и соотношении в них углеводных компонентов.
Представлены результаты корреляционного анализа лабораторных и биохимических данных, использованных в работе.
Практическая ценность. Проведенные исследования расширяют имеющиеся представления о молекулярных механизмах развития клещевого энцефалита и клещевого боррелиоза. Данные исследования позволяют выявить особенности в развитии этих заболеваний на уровне показателей обмена гликопротеинов в сыворотке крови и спинномозговой жидкости.
Показатели обмена гликопротеинов являются маркерами нарастания тяжести патологического процесса при клещевом энцефалите и клещевом боррелиозе.
Обосновано комплексное исследование гликопротеинов в сыворотке крови и спинномозговой жидкости у больных клещевым энцефалитом и клещевым боррелиозом с использованием экспресс-метода на основе применения лектина конканавалина А.
Основные положения, выносимые на защиту. 1. В сыворотке крови и спинномозговой жидкости больных клещевым энцефалитом и клещевым боррелиозом выявлены количественные и качественные изменения сиало- и фуко-зосодержащих гликопротеинов, что проявляется изменением содержания и соотношения отдельных компонентов этих соединений с преимущественным ростом содержания продуктов катаболизма, а также увеличением активности сиа-
лидазы и фукозидазы в сыворотке крови и сиалидазы в спинномозговой жидкости больных при данной патологии.
Несмотря на выявленную положительную корреляцию с отдельными гематологическими показателями (скорость оседания эритроцитов, количество лейкоцитов) и с изменениями в спинномозговой жидкости (уровень белка, ци-тоз), показатели обмена гликопротеинов обладают собственной диагностической и прогностической значимостью.
Имеет место зависимость между изменением в обмене сиало- и фуко-зосодержащих гликопротеинов и клинической формой, а также периодом клещевого энцефалита и клещевого боррелиоза.
Апробация диссертационного материала.. Основные положения диссертационной работы доложены на научно-практической конференции «Молодые ученые на рубеже веков (Ижевск, 2000), конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири (Ижевск, 2001), на научно-практической конференции «Национальные дни лабораторной медицины России» (Москва, 2000, 2001,2002,2003).
Работа обсуждена на межкафедральном заседании Ижевской государственной медицинской академии (Ижевск, 2004).
Внедрение в практику. В лечебно-профилактических учреждениях г. Ижевска (ГУЗ РКБ № 1, МУЗ МСЧ № 3) внедрены рекомендации информационных писем «Методы исследования показателей обмена сиаловых кислот в биологических жидкостях» и «Методы исследования показателей обмена фуко-зогликопротеинов в биологических жидкостях».
Модифицированные лабораторные методы исследования гликопротеинов используются в качестве дополнительного теста в оценке состояния больных, а также в учебном процессе на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики ФПК и ПП ГОУ ВПО «Ижевская Государственная медицинская академия» МЗ РФ.
В лечебно-профилактических учреждениях Удмуртской Республики рекомендовано к внедрению рационализаторское предложение «Экспресс-метод определения гликопротеинов сыворотки крови» (2002, №09.02).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 141 отечественных и 88 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 30-ю таблицами, 7-ю рисунками.
