Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ: Исследования энергетического о&мена и его регуляции при воздействии экстремальных «.акторов показыэа-«т, что стресс является не только стадией процесса адаптации, вызывающей перестройку всего метаболизма клвт-ки[В.В.Дыннпк, Е.Е.Сельков, 1778; П.Н.Кондрашова, Е. И.Ма-евский, 19703, но и привадит к его нарчэенпн в случае чрезмерной активации симпато-адреналовой системы СФ.З.Ме-ерсон, 1981; 1983; 19863.
Так, изучение с этих позиций энергетического обмена в сердечной мышце показывает, что в ней при стрессе снижается концентрация креатин«осфата, адениловых нуклеотидоэ, активируется гликолиз, нарушается окислительное фосфорили— розание, выражающееся в изменении дыхательного контроля АДФ/0, ATO/t на фона нарушений транспорта Са=~ между цито-эолем, саркоплаэматическим ретикулумом, а также митохондриями С В.В.Давыдов, М.Г.Ульяник, В.С.Якушев. 19В2; В.В.Малышев, Ф.3.Меерсон, 1982; В.С.Якушев, В.В.Яеяа, 1983 и др.]. Важным звеном нарушения структуры и функции клеточных органелл является реализация липидной триады СФ.З.Меерсон, 1984], которая выражается в активации парвкисного окисления липидов, «осфолипаз и двтергентного действия жирных кислот.
Значение &олее интенсивного изучения молекулярных механизмов нарушения энаргетичвсхих процессов под влиянием перенесенного стресса возросло в сэязи с последствиями аварии на Чернобыльской АЭС,когда на оомэ радиофо&пи долана увеличиться частота проявления заболеваний сердца, име-юсаих стрессормуга природу.
В связи с этим актуальность проведенного исследования заклинается в том, что изучено воздействие перенесенного стресса на динамику наруиения структуры и функции мем&ран митохондрий и сарколеммы, выделенных из "неишвми-зираваннсгз" отдела левого желудочка сердца, при последующем развитии некроза миокарда. Важность подчеркивается еще и тем, что в этой оїлести биохимии проведаны лишь единичные исследования С В.Э.Давыдов, 19B2j В.С.Яхушээ, В.3.Давы-
- 2 -дов, 19823.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ связана с изучением влияния предварительно перенесенного стресса на состояние окислительно-восстановительных процессов в сердце в сопоставлении с изменениями фосфолипидного состава внутренней мембраны митохондрий (ВММХ) и сарколеммы, а также дчнамикой активности ключевых ферментов этих мембран в "неишемизированном" отделе левого келудочка сердца при последующем развитии некроза миокарда.
Для реализации поставленной цели Ьыли сформулированы следующие ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ;
— изучить интенсивность окисления ацетата до С0= во
взаимосвязи с динамикой изменения спектра неэстерифициро-
ванкых жирных кислот(НЭКЮ крови при некрозе миокарда,
воспроизведенном после предварительно перенесенного стрес-
caj
— изучить фосфолипидмый состав внутренней мембраны
митохондрий и сарколеммы при указаних состояниях;
— исследовать в этих ве условиях активности мем&ра-
носвяэанных ферментов внутренней мембраны митохондрий и
сарколеммы.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА работы определяется следующими основными результатами: установлено, что развитие некроза миокарда после' предварительно перенесенного стресса сопровождается повышением концентрации неэстерифицированных жирных кислот в крови, в основном за счет непредельных жирных кислот, в отличие от традиционно моделируемого некроза миокарда. При атом в раннем остром периоде в крови преобладают Cifc.i, Сю.:, Cso.> кислоты, а к концу недельного срока опыта отмечается повышение содержания Сю.з кислоты.
ОЬнарукено, что при перенесенном стрессе и некрозе миокарда отмечается многократное увеличение отношения oS-шей концентрации НЭЖК к гід5"-"".
Установление, что в состоянии перенесенного стресса нарушения фосфолипидмого состава сарколеммы проявляются в
Большей степени и раньше по сравнения с ВКМХ, вкдэлемиымя из левого желудочка сердца.
Развитие некроза миокарда в "неишеияэированном" отделе сердца сопровождается» в первую очередь, изменениями фосфолипидной организации ВММХ, а не сарколеммы по сраэнв-нига с интахтными животными. Последние подчеркивает специфичность сдвига в составе фосфолмпидоэ ВММХ в отпет на формирование некроза миокарда, а изменения » сарколемма отраяант неспецифическуга природу, оБусловленнуи постстрве-сорными сдвигами.
Впервые показано, что специфический проявлением сдвига фосфолипидного состава, при развитии некроза после предварительно перенесенного стресса, является в раннем остром периоде (2 сут) изменение концентрации фосфвтвдип-серина и фОСфатидилглицерина по сравнения с некрозом миокарда. Выявлено, что к концу недельного периода данного опыта в ВММХ отмечается резкое накопление такого предельного фосфолипида как фосфатидмлхолин. Одновременно с этим в сарколемме выявляются преимущественно -.ч яэ нарув!«9ния, которые характерны для изолированного воздействия поранэ-сенного стресса и некроза миокарда, а не их ком5пняро»ан-ного влияния.
Показано, что э левом желудочке сердца при перенесенном стрессе и некрозе миокарда преимуаастэенны.ч местом накопления лизофссфопипидов является BUMS, а на сарколемм», хотя процесс увеличения лизофосфолипидо» й най гкрвїгн к концу эксперимента. Предварительно перенесенный стресс, г случая последующего развития накроэа киокярда, не меняет сложиэиийся уровень содержания лиэофосфолипидоз.
Отмечено, что при развитии некроза миокарда посла предварительно парвнвеенного стресса s остром периода в ВММХ сердца отмечается актиэецыя Мда*"-зазисииой аэидчуст-вительной АТФ-азы и цитокромоксидаэы (ЦХО), а в сарколемма енкнавтея лйтизность Ыа, К—АТ-аз»ы по сравнения с никрозом миокарда.
_ 4 -
ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ заклинается вт том*; что" выявленные закономерности изменения обмена жирны1х кислот, фос-" фолипидов, совместно с динамиков обеспесчвмйо'сти орКа.ИИ'зм'** Мд = *, под влиянием самого некроза' и в" случае' его ра'эвит'и'я после перенесенного стресса, яв'ляится вгажн"цгм' условием* нарушения функций ВММУ и сарколемм'ы". При этом" устан-авлйвает-ся первоочередность нарушения 8ММХ.
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ. В результате проведенных исследований разработано представление об этапнос'ти патогенетической коррекции при перенесів'нном стресса", некрозе миокарда, а также при некрозе мМок'арда, воспроизведенном после перенесенного стресса - мероприятий, преимущественно направленных на стабилизации сначала структуры и функции внутренней мембраны митохондрий, а затем - сарколеммы "не-ишемиэированного" отдела левого желудочка сердца. Тем самым обоснованы более эффективные подходы в молекулярной фармакологии постстрессорных и некротических расс^іойств в сердечной мышце, связанных с энергетическим обменом и ио-нотранспортными процессами.
ВНЕДРЕНИЕ. Результаты диссертационное о исследования внедрены в курс лекций и практических занятий по биохимии в медицинских институтах г.г. Запорожья, Рязани, Челябинска, Уфы, Иваново; Запорожском институте усовершенствования врачей.
По материалам экспериментальных исследований Оформлены методические рекомендации "Диагностика стрессорного влияния на организм"
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации докладывались на V Украинском биохимическом съезде, г. Ивано-Франковск, 1937; на итоговой научно-практической ВОИР медучереждений Запорожской области, 1987; на конференции молодых ученых Запорожского мединститута 198S; на заседаниях Запорожского отделения ВБО АН СССР, г.Запорожье, 1987, 1988, 1989 гг.
ПУБЛИКАЦИИ. Па материалам диссертации опубликовано 8
печатных раЬот.
СТРЦКТ^РА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ, РаЬота изложена на 205 страницах машинописного текста и состоит из 6 глав, заключения, выводов, 21 таблицы,20 рисунков, указателя литературы, включающего 109 отечественных и 143 зарубежных источников,
