Метод контроля и критерии оценки антигенной активности вакцины против ценуроза овец Ширко Мохамед Салех Талабани

Введение к работе

Актуальность темы. Проблема профилактики и ликвидации гель-штозов сельскохозяйственных животных, в том числе и ценуроза іребрального озац, продолжает оставаться актуальной, несмотря і многочисленные разработки способов и методов борьбы с ними. іибол99 перспективным направлэниэм в системе мер борьбы с гель-інтозами является разработка средств специфической профилакти-I.

Вопросы иммунитета при инвазиях давно привлекают внимание :еных, так как знание антигенной структуры паразитов и механиз-иммунологичэской перестройки, происходящих в организме хозя-, определяет стратегию разработки вакцин при гельминтоза* житных.

Эти вопросы изучались в разные годы учеными нашэй страны

.И.Скрябин, Р.С.Щульц, К.И.Абуладза, В.С.Ершов, Р.П.Петров,

П.Шихсбалова, Е.С.Лейкана, О.Г.Полетаева, ЭЛ.Даугалиева, А.С.

ссоно.% В.В.Филпппов, Н.Е.Косминков я др.) а за рубежом Genraeil, Heath, Еіокагй , Lloyd, vesTer _} .Tilliar.s ,Osbom ).

3 результата исследований установлен патогенез гэльмпятозоз позиций иммунологической перостро&га организма животных, осно-

Й КОТОРОЙ ЯВЯЯеТСЯ ЕЫрзбОТЗСа БЫСОКССПЭЦЕфЗЧНЫХ беЛКОВ 0ПР9Д9Л9Н-

го тнпа - иммуноглобулинов илп автзтэл.

Как показали исследования последних лет ( неаїл, sr.yth 37, K.D. Hickard et al 1982, Vester, Tustin 1982, 1987), тяганы, полученные от цестод на разных стадиях их развитая, зывае? в организме иявотных ту илп иную стапэнь защиты. Розуль-гы этих исследований привели к разработке средств спацпфэтаской

иммунопрофилактики,' основанных на использовании антигенных компонентов, где в качестве активного начала используются антигены, получаемые .из различных стадий развития или участков тела возбудителя. Однако таких вакцин в ветеринарии еще мало (В.П.Урбан, 1985)..Имеются сообщения об успешном создании и применении вакцин против цистицеркозов животных, об использовании их против диктио-каулеза в фасциолеза овец и телят (Т.А.Miller,1987, н.к.тііег , В.Х. Murray_i 1989, М.Д. Rickard 1982, Э.Х.Даугалиева, 1989). Однако создание эффективных вакцин против гальминтозов ограничено, хотя ведутся работы по выработке молекулярных субъединичных вакцин.

Важным достижением в проблеме профилактики тканевых гельмин-тозов является разработка вакцины против ценуроза овец (Н.Е.Кос-минков, 1986), основу которой составляют онкосферы М. "^lticeps и продукты их'кизнедеятеян^ости после культивирования в течение ' двух суток в среде 199 с добавлением, в нее сыворотки крови телят и последующим внесением в культуру консерванта и адъюванта. Вакцина прошла успешные испытания в хозяйствах Тверезой области, Казахстана и Северного Кавказа.

Утвержденный техническими условиями (ТУ) контроль активности вакцины при ее изготовлении предусматривает иммунизацию вос--приимчивых животных (ягнят) с последующим их заражением. Результаты проверки.учитываются через 2,5 месяца. Такой длительный срок проверки активности вакцины в связи с сезонностью применения вакцины затрудяет использование ее в хозяйствах в оптимальные сроки. Поэтому вопросы, связанные с усовершенствованием контроля активности вакцины после ее изготовления, требуют дальнейшей разработки. Разработка чувствительных иммунохимических методов индикации биопрепаратов с помощью антител позволяет подойти к про-

бйеме разработки лабораторного метода контроля активности вак-. цы против цануроэа.

Цель и задачи исследования. В связи с вышеизложенным перед нами была поставлена цель - усовершенствовать метод контроля и определить критерии оценки антигенной активности вакцины против ценуроза овец.

Для достижения поставленной цели необходимо .было решить следующие задачи:

1. Определить принципиальную, возможность оценки антигенной активности вакцины с использованием методов иммунохимического анализа.

2. Подобрать лабораторную модаль и разработать схему иммунизации для получения специфических антисывороток, пригодных для проведения контроля вакцины на присутствие специфического антигена.

3. Охарактеризовать антигенный состав вакцины.

4. Сравнить результаты исследований антигенной и иммуно-генной активности вакцины в лабораторных и производственных условиях с определением ее протективных свойств^

5. Предложить лабораторный, метод контроля и критерии оценка антигенной активности противоценурозвой вакцины.

Научная новчзна. Методами физико-химического а шшунохимячес-кого анализа изучен антигенный состав вакцины против ценуроза и

предложен метод контроля активности ее.

Показана принципиальная возможность и определены критерии оценки антигенной активности вакцины против ценуроза путем определения титра специфических антител у иммунизированных кроликов в реакции двойной диффузионной преципитации. Оптимизирована схема иммунизации кроликов при получении специфической антисыворотки к антигенному комплексу вакцины, получена иммунная сыворотка и определена ее активность и специфичность.

Практическая ценность. Разработан и предложен лабораторный метод контроля антигенной активности вакцины против ценуроза овец, позволяющий сократить сроки исследования и значительно снизить затраты на их проведение. Получение специфической антисыворотки к антигенному комплексу вакцины дает возможность осуществлять иммуно— химические исследования по совершенствованию вакцинных препаратов против ценуроза и других тениидозов.

Основные положения, выносимые на защиту:

I. Антигенный состав вакцины против ценуроза

2. Разработка оптимальных условий получения специфических антисывороток, методы и критерии оценки антигенной активности вакцины против ценуроза овец.

3. Метод контроля антигенной активности вакцины.

4. Лабораторные и производственные испытания иммуногенной и
антигенной активности вакцины против ценуроза по результатам приме
нения предложенного метода контроля.

Апробация работы. Результаты доложены;

1. На Всесоюзной конференции "Эхинококкозы и цистицеркозы" (Караганда, 1990)

2. На заседаниях кафедры инфекционных и паразитарных болезней/ с.-х. животных Московской Государственной академии прикладной биотехнологии (Москва, 1990—1993 гг.)

3. На расширенном заседании кафедр ветеринарно—санитарного факультета МГАЛБ (Москва, 1993)

Публикации. По материалам диссертации Опубликовано-3 работы, отражающие основные положения.

Обзор литературы посвящен вопросам- антигенного строения гельминтов и вопросам получения из них антигенов для иммунизации жи-зотных. Рассмотрены различные иммунохимические методы контроля за )азвитием антителообразования и специфика иммунного ответа у ги-ютных при гельытатозах.