Содержание к диссертации
Введение
1. Обзор литературы 11
1.1. Законодательные акты по пищевой безопасности и кормов 11
1.1.1. Законодательные акты ЕС .11
1.1.2. Законодательные акты Таможенного Союза 13
1.1.3. Национальные законодательные акты РФ 14
1.2. Вещества, используемые при изготовлении и хранении пищевых продуктов и кормов .15
1.3. Загрязнители (полютанты) окружающей среды в пищевых продуктах и кормах, методы их обнаружения 17
1.4. Административные меры, применяемые в Российской федерации при выявлении нарушений безопасности пищевых продуктов и кормов 32
2. Собственные исследования 35
2.1. Материалы и методы исследований 35
2.2. Юридическое обоснование проведения мониторинга безопасности продуктов животного происхождения и кормов .37
2.3. Совершенствование лабораторно-диагностической сети ветеринарных лабораторий Московской области .39
2.4. Анализ результатов проведения ветеринарно-санитарной экспертизы продуктов животного происхождения и кормов на территории Московской области (2010-2013гг.) .41
2.4.1. Результаты ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарная экспертиза мяса 42
2.4.2. Результаты ветеринарного осмотра животных и ветеринарно-санитарная экспертиза мяса и мясных продуктов на боенских и перерабатывающих предприятиях 45
2.4.3. Результаты ветеринарно-санитарная экспертиза других видов пищевых продуктов на продольственных рынках 47
2.5. Оценка риска при использовании продуктов животного происхождения и кормов 48
2.6. Организация и осуществление мониторинга безопасности в продуктов животного происхождения и кормов 50
2.6.1. Разработка методики расчета репрезентативного количества проб кормов для химических, токсикологических, микробиологических и радиологических исследований 54
2.7. Результаты мониторинговых исследований безопасности продуктов животного происхождения и кормов 58
2.7.1. Результаты лабораторных исследований говядины 60
2.7.2. Результаты лабораторных исследований баранины 62
2.7.3. Результаты лабораторных исследований свинины 65
2.7.4. Результаты лабораторных исследований мяса птицы 68
2.7.5. Результаты лабораторных исследований молока 71
2.7.6. Результаты лабораторных исследований кормов и кормовых добавок 74 2.7.7. Результаты лабораторных исследований продукции отобранной на предпритятиях Московской области 77
2.8. Применение скрининговых методов исследования безопасности пищевых продуктов 80
2.9. Сравнительное изучение традиционных методов обнаружения БГКП
(колиформ) и Е.coli в мясе птицы, используемых в Российской Федерации, и современных методов детекции колиформ и Е.coli ,
используемых в Евросоюзе и США 87
2.10. Анализ эпизоотической ситуации по сальмонеллезу в Российской Федерации 96
2.11. Контроль диоксинов и полихлорированных бифенилов в пищевых продуктах 102
2.12. Валидация метода определения остаточных количеств тетрациклина в продуктах животного происхождения 105
2.12.1. Валидация ( характеристика точности и правильности результатов) метода определения остаточных количеств антибиотиков тетрациклиновой группы в молоке методом иммуноферментного анализа с использованием набора Ridascreen- Тетрациклин производства R- Biopharm 105
2.12.2. Валидация метода определения остаточного содержания антибиотиков тетрациклиновой группы в мясе птицы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс спектрометрическим детектором 111
2.13. Методика расчета платных ветеринарных услуг, оказываемых ветеринарными лабораториями Московской области 119
3. Обсуждение результатов 129
Выводы 141
Практические предложения .143
Список литературы
- Загрязнители (полютанты) окружающей среды в пищевых продуктах и кормах, методы их обнаружения
- Совершенствование лабораторно-диагностической сети ветеринарных лабораторий Московской области
- Результаты ветеринарно-санитарная экспертиза других видов пищевых продуктов на продольственных рынках
- Методика расчета платных ветеринарных услуг, оказываемых ветеринарными лабораториями Московской области
Введение к работе
Актуальность темы. Серьезную озабоченность во всем мире вызывает безопасность пищевых продуктов для здоровья человека. По данным ВОЗ до 30% населения промышленно развитых стран ежегодно страдают болезнями пищевого происхождения. В последние годы в ряде стран регистрируют вспышки токсикоинфекций у людей, вызванные различными пищевыми продуктами.
Существует также проблема незаконного роста применения химических веществ, антибиотиков, гормональных препаратов при выращивании животных, а также использование продуктов современной биотехнологии с недостаточно изученными свойствами, что сопряжено с рисками для жизни и здоровья населения.
Вступление Российской Федерации во Всемирную торговую организацию
(2011г.), расширение экспортно-импортных операций определяют
необходимость повышения уровня контроля за состоянием здоровья
животных, безопасностью продуктов животного происхождения и кормов,
соблюдением требований основных положений общепризнанных
международных договоров и соглашений.
Степень разработанности проблемы. Одна из важнейших проблем -создание современной, научно-обоснованной системы ветеринарного надзора при переработке и производстве продукции животного происхождения и кормов, а также контроля безопасности готовых пищевых продуктов.
Результаты исследований, проводимые в настоящее время
государственными ветеринарными лабораториями, указывают на
значительный уровень загрязненности отечественной и импортной
животноводческой продукции различными биологическими агентами, химическими соединениями, что приводит к снижению качества и безопасности продуктов питания.
В ряде зарубежных стран для быстрого выращивания животных добавляют в корма антибиотики (флавомицин, бацитрацин и др.), остаточные количества которых не всегда контролируются, а их МДУ разноречивы в разных странах.
В связи с этим, возникла необходимость постоянного выполнения на федеральном и субъектовом уровнях «Программы государственного мониторинга остатков запрещённых и вредных веществ в организме животных, продуктов животного происхождения и кормах», в т.ч. и на территории Московской области. Мониторинг безопасности пищевых продуктов животного происхождения и кормов в Московской области до 2009 г. вообще не осуществлялся.
Цель и задачи исследований. Цель нашей работы - разработка и
осуществление на территории Московской области государственного
лабораторного мониторинга безопасности продуктов животного
происхождения и кормов в системе ветеринарного надзора.
В задачу наших исследований входило:
1. Изучить состояние государственного лабораторного контроля по безопасности продуктов животного происхождения и кормов на территории Московской области за последние 3 года.
2. Разработать научно-обоснованное планирование мониторинга остатков
запрещенных и вредных веществ в продуктах животного происхождения и
в кормах на территории Московской области с учетом анализа угрозы рисков.
-
Осуществить мониторинговые исследования по выявлению на территории Московской области опасных и запрещенных веществ в продуктах животного происхождения и в кормах за 2010- 2013 гг.
-
Осуществить сравнительный анализ результатов исследования мяса животных и молока классическими методами и экспресс-методами с помощью автоматических анализаторов ТЕМРО и Vidas по выявлению сальмонелл, листерий, стафилококков и БГКП.
5. Провести сравнительное изучение методов обнаружения бактерий
группы кишечных палочек ( колиформ ) и E.coli в мясе птице , используемых в
Российской Федерации, и современных методов детекции колиформ и E.coli ,
используемых в Евросоюзе и США.
6. Провести валидацию методов определения остаточного содержания
антибиотиков тетрациклинового ряда с использованием набора ИФА
Ridascreen-тетрациклин производства R-Biofharm и с помощью
высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим
детектором (ВЭЖХ / МС) в молоке и мясе птицы.
7. Провести анализ эпизоотической ситуации по сальмонеллезу и подбор
антимикробных препаратов для эффективного лечения больных животных с
учетом выявленных антибиотикорезистентных штаммов сальмонелл на
территории Московской области.
8. Разработать методику расчета отбора репрезентативного количества проб
кормов в рамках реализации плана мониторинговых исследований.
9. Разработать стоимость платных ветеринарных услуг, оказываемых
организациями государственной ветеринарной службы Московской области :
- перечень платных ветеринарных и лабораторно-диагностических услуг по ветеринарно-санитарной экспертизе ;
- прейскурант и калькуляция цен на платные ветеринарные услуги .
Научная новизна. Впервые разработан и внедрен в практику
лабораторной работы научно-обоснованный мониторинг остатков
запрещенных и вредных веществ в продуктах животного происхождения и
в кормах на территории Московской области по всем показателям
безопасности. В перечень контролируемых показателей безопасности на
основании анализа рисков внесены патогены, представляющие
потенциальную опасность для здоровья человека и животных, наиболее часто
применяемые в ветеринарной практике и животноводстве лекарственные
средства, в растениеводстве пестициды и другие ксенобиотики,
накапливающиеся в кормах, организме животных и продуктах.
Впервые разработана научно-обоснованная методика расчета
репрезентативного количества проб кормов, требуемых для реализации плана мониторинговых исследований.
Изучены этиологическая структура, распространение сальмонеллезов у животных и антибиотикорезистентность выделенных культуры сальмонелл от животных и из пищевых продуктов.
Проведена валидация методов определения остаточных количеств
тетрациклина в молоке с использованием набора ИФА Ridascreen
производства R-Biopharm и мясе птицы с использованием
высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором (ВЭЖХ/МС).
Разработана стоимость платных ветеринарных услуг при проведении исследований в ветеринарных лабораториях.
Практическая значимость работы. В соавторстве разработаны,
утверждены и изданы:
- «План мониторинга запрещенных веществ, остаточных количеств
ветеринарных препаратов и других химических соединений в живых
животных, продукции животного происхождения и кормах на 2014 г. и
последующие годы» (утв. Главным управлением ветеринарии Московской
обл., 2014 г. ) ;
- «Периодичность контроля за содержанием вредных веществ и их
остатков в продовольственном сырье и пищевых продуктах при их
производстве и экспорте» (утв. Главным управлением ветеринарии
Московской обл., 2014 г. ) ;
- «Перечень платных ветеринарных услуг, лабораторно-диагностических
услуг по ветеринарно-санитарной экспертизе, оказываемых организациями и
учреждениями ветеринарной службы» (утв. Управлением ветеринарии
Курганской области, 07 марта 2013г. и Управлением ветеринарии Московской
области, 18 мая 2014 г.) ;
- «Прейскурант и калькуляция цен на платные ветеринарные услуги,
оказываемые районными станциями по борьбе с болезнями животных» (утв.
Управлением ветеринарии Курганской области, 07 марта 2013г. и
Управлением ветеринарии Московской области, 18 мая 2014 г.) ;
- «Методика расчета репрезентативного количества проб кормов для
химических (остатков запрещенных и вредных веществ), микробиологических
и радиологических исследований, ежегодно проводимых в рамках плана
государственного ветеринарного лабораторного мониторинга остатков
запрещенных и вредных веществ в кормах на территории Московской
области» (утв. директором ФГБУ ЦНМВЛ, 2014 г.).
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы отражены в итоговых кафедральных научных отчетах ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.ИСкрябина за 2010 – 2014 гг.
Материалы работы также доложены на:
- Научно-методической комиссии ФГБУ ЦНМВЛ ( 2013- 2014 гг.);
- Международном семинаре по безопасности кормов «Контроль
безопасности кормовых продуктов в ветеринарных лабораториях»
( г. Ставрополь, 27-28 ноября 2012 г.) ;
- Международной научной конференции «Научное и кадровое
обеспечение инновационного развития агропромышленного комплекса»
(г. Казань , 2013 г.) ;
- Международной научно-практической конференции «Актуальные
проблемы ветеринарной медицины, ветеринарно-санитарного контроля и
биологической безопасности сельскохозяйственной продукции» ( г. Москва ,
06 февраля 2014 г.) ;
- Международной научно-практической конференции «Научные
основы производства и обеспечения качества биологических препаратов для
АПК», посвященной 45-летию ВНИИТИБП ( г. Щелково, 23-24 ноября
2014 г.) ;
- Международной учебно-методической и научно-практической
конференции, посвященной 95-летию кафедры паразитологии и ветеринарно-
санитарной экспертизы (г. Москва, 22-24 октября 2015 г.).
Личный вклад соискателя. Основной объем исследований проведен автором самостоятельно. Участие соавторов в разработке и создании утвержденных нормативных документов осуществлялось на паритетной основе. При выполнении отдельных этапов работы оказывали практическую, научно-методическую и консультативную помощь сотрудники ФГБУ ЦНМВЛ: О.Н. Виткова, Т.И. Козыренко, О.Е. Иванова, Л.П. Сатюкова; сотрудник ГНУ ВНИИ организации производства, труда и управления в сельском хозяйстве, д.э.н., проф. М.С. Ромашин.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту :
1. Результаты мониторинговых исследований по выявлению на
территории Московской области опасных и запрещенных веществ в
продуктах животного происхождения и кормах за 2010- 2013 гг.
2. Результаты экспериментальных исследований :
- результаты исследования мяса животных и молока классическими
методами и экспресс-методами с помощью автоматических анализаторов
ТЕМРО и Vidas по выявлению сальмонелл , листерий , стафилококков и
БГКП ;
сравнительное изучение методов обнаружения бактерий группы кишечной палочки (колиформ) и E.coli в мясе птице, используемых в Российской Федерации и современных методов детекции, колиформ и E.coli, используемых в Евросоюзе и США ;
изучение антибиотикорезистентности сальмонелл, выделенных от животных на территории Московской области ;
- валидация методов определения остаточного содержания антибиотиков
тетрациклинового ряда с использованием набора ИФА Ridascreen-
тетрациклин производства R-Biofharm и с помощью высокоэффективной
жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором (ВЭЖХ /
МС) в молоке и мясе птицы.
-
Методика расчета отбора репрезентативного количества проб кормов в рамках реализации плана мониторинговых исследований.
-
Стоимость платных ветеринарных услуг, оказываемых организациями государственной ветеринарной службы Московской области :
- перечень платных ветеринарных и лабораторно-диагностических услуг по ветеринарно-санитарной экспертизе ;
- прейскурант и калькуляция цен на платные ветеринарные услуги .
Публикация результатов исследований. По результатам выполненных исследований опубликовано 10 работ, из них 3 в журналах, определенных ВАК Минобрнауки РФ.
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 13 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложений. Работа изложена на 167 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 71 таблицами , 5 фотографиями, 1 рисунком, 3 схемами. Список цитированной литературы включает 203 источника, из которых 103 зарубежных авторов.
Загрязнители (полютанты) окружающей среды в пищевых продуктах и кормах, методы их обнаружения
Триглицериды. Контроль триглицеридов необходим для подтверждения фальсификации за счет подмены молочных продуктов другими жирами. Выявление таких жиров обеспечивается с помощью высокоэффективной жидкостной и газовой хроматографии (164, 165).
Оксид углерода или монооксид углерода (СО). Оксид углерода или монооксид углерода (СО) используется в ряде стран для создания модифицированной газовой атмосферы в упаковке, т.е. в качестве компонента упаковочного газа для сырой рыбы или мясных продуктов. Упаковочная смесь в этом случае содержит азот, углекислый газ и незначительную примесь СО (до 1%). Добавление СО приводит к переходу присутствующего в мышечной ткани белкового пигмента миоглобина в карбоксимиоглобин – ярко красный стабильный пигмент, улучшающий внешний вид мяса , мясного фарша и рыбы.
В то же время ярко красная окраска, характерная для свежего продукта, может маскировать действительный срок хранения продукта и признаки его порчи. С 2002 г. в ЕС запрещено использование СО в составе газовых смесей, применяемых при упаковке свежих мясных и рыбных продуктов. Также запрещено использование технологии копчения «очищенным дымом», рассматриваемый как косвенный путь обработки продукта СО. Аналогичные запреты на применение СО действуют в Канаде и Сингапуре и Китае. В Японии разрешено лишь ограниченное применение при условии, что начальная концентрация оксида углерода в рыбе не будет превышать 0,5 мг/кг. В США обработка и хранение в инертной газовой атмосфере, содержащей СО, отнесена в 2002г. и 2004г. к списку GRAS( общепризнано как безопасная). Однако применение СО ограничено целым рядом условий: необходимостью обязательного предупреждения на этикетке о применении СО в качестве фиксатора цвета, ограничением срока хранения не менее 28 дней. Целесообразно также запретить на территории Таможенного союза использование СО, который по показателям безопасности может быть вреден для здоровья и запретить ввоз в Российскую Федерацию мясной и рыбной продукции, обработанной СО. Вероятнее всего может подвергаться такой обработке тунец, который в последние годы получил широкое распространение и на рынке в России. Для сохранения красного цвета, в течение длительного периода времени, для того, чтобы рыба выглядела свежей, переработчики обрабатывают тунец СО. Обработанный тунец, как правило, имеет цвет красного арбуза, в то время как естественный цвет тунца схож с цветом бургундского вина. Окрашенный в красный цвет тунец может скрывать признаки разложения, в том числе значительный уровень гистаминов. С февраля 2001г. лаборатория San-DO (США) обнаружила в завезенном и обработанном СО тунце уровень гистаминов до 2060 ррm , что превышает 500 ррm – уровень установленный для тунца ( 164, 165).
Оксипролин. Оксипролин - аминокислота, присутствующая (главным образом) в белках соединительных тканей. Соединительные ткани являются дешевым сырьем, употребление которого снижает качество колбас. Большинство законодательных требований развитых стран ограничивает содержание этого вещества в колбасе.
Красители. Запрещено искусственное окрашивание мясных продуктов. Красный или розовый цвета, свидетельствующие о свежести, могут быть получены за счет нитратсодержащих добавок, наличие которых определяется, как описано выше.
Определение видовой принадлежности. Нормативы определяют допустимые к использованию виды мяса животных (говядина, свинина, баранина и другие виды мяса). Другие источники белка (соевый белок или искусственные белки) должны быть указаны на этикетках или не должны употребляться при изготовлении продуктов. Анализ: традиционным методом является иммуноанализ с использованием диффузии в геле и соответствующих антител. Требующиеся реактивы стоят очень дорого.
Жир, жирные кислоты. Пропорция жира в колбасах — важный параметр, определяющий качество. Имеются индивидуальные ограничения для каждого вида колбасы. Вообще говоря, жир является одним из наиболее важных компонентов, ответственных за запах. Однако, высокие количества жира снижают качество. Информация о триглицеридном составе может дать представление о точном количестве жира и, дополнительно, может давать сведения о добавках постороннего жира. Добавление постороннего жира в мясные продукты дозволено, но об этом должно иметься сообщение на этикетке. Триглицеридный состав может определяться с помощью газовой хроматографии (как описано в подразделе 3-l.2), или можно проводить разделение в высокоэффективном жидкостном хроматографе (за 30 минут; использованием детектора с диодной матрицей). Преимуществом такого подхода является возможность многокомпонентного анализа -(триглицериды, перекиси, стерины и жирорастворимые витамины) ( 70).
Органические кислоты. Соли органических кислот (цитрат и лактат) используются при производстве продуктов из мяса для увеличения объема мясного белка за счет добавки воды. Этот эффект действует не столь долго, как при добавке фосфатов (и такой подход, в отличие от случая пользования фосфатами, не запрещен). Существуют отдельные методы обнаружения каждого из веществ. Содержание молочной кислоты может указать на не правильное хранения продукта и, что продукт не является свежим (за счет метаболического превращения микроорганизмами вырабатывается молочная кислота). Традиционный анализ методом тонкослойной хроматографии на пластинках с целлюлозой занимает несколько часов;. для обнаружения требуются очень токсичные реактивы. Высокоэффективная жидкостная хроматография дает возможность выявлять все вещества за 25 минут в малых концентрациях (используется ионообменная колонка) ( 49).
Совершенствование лабораторно-диагностической сети ветеринарных лабораторий Московской области
В 2010-2013гг. мониторинговым исследованиям подвергнуты следующие виды пищевых продуктов и кормов: мясо от всех видов животных и птицы, мясные продукты, молоко и молочные продукты, другие пищевые продукты, корма. При формировании плана мониторинга безопасности отечественных продуктов животного происхождения и кормов использовали отчетные данные за предыдущий год по выявленным несоответствиям по каждому виду продуктов и каждому показателю безопасности, а также исходные данные по поголовью продуктивных животных, количеству ферм продуктивных животных по видам, количеству пасек, рыборазводных и рыбодобывающих прудов. Учитывали также объемы ввоза импортной продукции на территорию г.Москвы и Московской области и продукции , произведенной в странах-членах Таможенного союза.
Поголовье убойных животных на территории Московской области для расчета плана мониторинга безопасности отечественных продуктов животного происхождения на 2010 - 2013 гг. КРС(тыс.гол) Свиньи (тыс.гол) Овцы, козы (тыс. гол) Птица (тыс. шт.)
Говядина (т) Свинина (т) Мясо птиц, (т) Молоко (т) Молочная продукция (т) Корма (т) 7523,099 8699,481 2248,051 9885,623 5182,888 665 Нами также были учтены сведения о пестицидах, используемых в сельском хозяйстве на территории Московской области. На базе Московской областной ветеринарной лаборатории и в ФГБУ ЦНМВЛ в рамках плана мониторинга были проведены исследования продукции и кормов на наличие пестицидов. Расчет плана мониторинга продуктов животного происхождения и кормов по микробиологическим критериям проводили по Руководству Комиссии Кодекс Алиментариус САС/GL 71-2009. При этом учитывали превалентность несоответствий, выявленных по результатам исследований в предыдущем году по каждому виду продукта: Количество положительных результатов, полученных за прошедший год по результатам мониторинга безопасности пищевых продуктов (по каждому виду продукта) по: листериям; сальмонеллам; КМАФАнМ; БГКП; соматическим клеткам (молоко); клостридиям; стафилококкам; вибрио парагемалитикус (продукция аквакультуры); плесеням и дрожжам (готовые молочные продукты).
Используя разработанную в ФГБУ ЦНМВЛ Методику расчета репрезентативного количества проб биоматериала, и имея исходные данные для проведения расчетов по каждому виду продуктов и каждому показателю безопасности, нами разработан План мониторинга запрещенных веществ, остаточных количеств ветеринарных препаратов и других химических соединений в живых животных и, продуктах животного происхождения и кормах на территории Московской области (см. Приложение).
Разработка методики расчета репрезентативного количества проб кормов для химических, токсикологических, микробиологических и радиологических исследований
При анализе зарубежных нормативных документов нам не удалось обнаружить действующую методику расчета объема проб кормов для проведения мониторинга их безопасности. В Российской Федерации такая методика также отсутствовала. В связи с этим при разработке Методики нами определены научно-обоснованные критерии (по каждому субъекту Российской Федерации): - количество животных на территории субъекта Российской Федерации; - виды кормов, используемых для кормления продуктивных животных на территории субъекта Российской Федерации ; - объем производимых в субъекте Российской Федерации кормов; - перечень пестицидов, применяемых в субъекте Российской Федерации; - случаи выявления некачественных и опасных в ветеринарно санитарном отношении кормов (анализ годовых отчетов, предусмотренных требованием приказа Минсельхоза России от 2 апреля 2008г. №189); - результаты анализа различных рисков (отчеты по лабораторному контролю безопасности кормов и кормовых добавок за предыдущий год). При составлении плана мониторинга учитываются угрозы рисков по результатам выявленных нарушений при инспекторских проверках по конкретным предприятиям в субъектах РФ, производящим корма (обнаружения при лабораторных исследованиях микроорганизмов в недопустимых количествах, пестицидов, лекарственных препаратов или других ксенобиотиков). Нами определен перечень показателей безопасности, по которым контролируются корма при мониторинге остатков запрещенных и вредных веществ. Расчет количества проб, требуемых для проведения мониторинга безопасности по химическим показателям, следует проводить по каждому виду корма следующим образом.
Результаты ветеринарно-санитарная экспертиза других видов пищевых продуктов на продольственных рынках
Официально узаконенные в Российской Федерации методы обнаружения бактерий группы кишечной палочки предусматривают использование традиционных методов бактериологии. Их недостатком является продолжительность исследования, а также значительные материальные затраты. В связи с изложенным, в задачи наших исследований входило сравнить используемые в ветлабораториях методы с современными методами детекции бактерий группы кишечной палочки (колиформ) и E.coli в мясе птиц и основанными на применении хромогенных питательных сред. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: 1. Сравнить гостированные методы, позволяющие выявить и определить количество бактерий группы кишечной палочки и E.coli в мясе и мясных продуктах, официально зарегистрированные в РФ, с методом определения колиформных бактерий и E.coli с применением хромогенных индикаторных сред производства компании Merck (Германия).
Изучить родовой и видовой состав представителей семейства Enterobacteriaceae, выявляемых с использованием отечественных гостированных методов и метода с применением хромогенных индикаторных сред из охлажденных и замороженных ножек птицы. Схема постановки эксперимента. Исходя из поставленных задач, была разработана схема постановки эксперимента. Схема -1 - Постановка эксперимента Анализ данных литературы Изучение гостированных методов выявления и определения кол-ва бактерий группы кишечных палочек и E.coli, принятых в РФ и методов выявления и определения колиформ и E.coli с помощью хромогенных питательных сред.
Микробиологические исследования изучаемых объектов согласно: ГОСТ 7702.2-93«Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia)» ГОСТ Р 50454-92 (ИСО 3811-79) «Мясо и мясопродукты. Обнаружение и учет предполагаемых колиформных бактерий и E.coli (арбитражный ГОСТ Р 52816-2007 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных Методика определения колиформных бактерий и E.coli с использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных сред производства Merck (Германия) Определяемые показатели: Наличие в смывах с продукта БГКП и E.coli. Количество в смывах с продукта БГКП и E.coli.
Определение родового и видового состава колиформ и их процентное соотношение к E.coli в каждой пробе.
Объект исследований. Объектом исследования являлись ножки птицы в охлаждённом (10 образцов) и замороженном (10 образцов) состоянии, приобретённые на продуктовом рынке в Юго-Восточном административном округе г. Москва в районе Марьино, в павильоне «Петелинская птицефабрика» и в торговом комплексе Ашан, производитель Калужская птицефабрика. Определение количества бактерий группы кишечной палочки
Для выделения и поддержания культур бактерий готовили и использовали питательные среды: питательный бульон, питательный агар, дифференциально-диагностическая среда Эндо, среда Кесслер, селективная среда лактозный бульон с желчью и бриллиантовым зеленым, триптоновая вода, физиологический раствор,Chromo cult Coli form Agar.
Пробы мяса птицы, отобранные по ГОСТу 26668-85, исследовали на наличие колиформных бактерий и E. coli с использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных сред производства Merck (Германия), М.: «Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России», 2004г., издание официальное.
При использовании Chromo cult, Coli form Agar колиформные бактерии рассматривали как микроорганизмы, характеризующиеся наличием фермента В-галактозидазы; E.coli- как колиформные бактерии, характеризующиеся наличием фермента В-глюкуронидазы, и фермента триптофаназы.
Схема 2- Определение количества колиформных бактерий и E.coli с использованием хромогенных индикаторных сред
Тест на индол с реактивом Ковача на Chromocult Coliform Agar Для подтверждения E.coli на среде Chromo cult, Coli form Agar наносили каплю реактива Ковача непосредственно на характерно окрашенные колонии (индольный тест). Изменение цвета реагента до розово-красного в течение нескольких секунд рассматривали как подтверждение наличия E.coli. Для подсчета количества колиформных бактерий пользовались счетчиком колоний, на котором подсчитывали количество характерно окрашенных колоний. Дифференциация грамотрицательных бактерий на хромогенных средах Chromo cult ,Coliform Agar представлена в таблице 45.
Методика расчета платных ветеринарных услуг, оказываемых ветеринарными лабораториями Московской области
Гр. 4. Расчет затрат по статье «оплата труда» осуществляли по нормам времени на одну ветеринарную услугу, исследование, которые отражают полную трудоемкость представленной услуги и стоимость одного человека-часа, исходя из должностного оклада исполнителя соответствующей категории, на основе типовых норм времени на ветеринарные услуги в районных ветеринарных станциях и лабораториях, утверждаемых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.
Для определения затрат по данной статье следует учитывать следующую информацию: норматив затрат на оплату труда и начисления на выплаты по оплате труда включает в себя норматив затрат на оплату труда и начисления, определяемые в соответствии с Постановлением Правительства Российской Федерации N 583; нормативно-справочную информацию, разработанную ветеринарными станциями регламентирующую технологию и правила проведения ветеринарных работ и реализации услуги; среднегодовое количество рабочих дней в месяце, продолжительность рабочего времени;
Гр. 5. Затраты по статье «амортизационные отчисления» рассчитывали с учетом годового объема представленных ветеринарных услуг и норм оснащения ветеринарных имуществ ветеринарных станций и лабораторий.
Сумму амортизационных отчислений определяли по первоначальной стоимости производственных фондов (оборудование, приборы и т.д.) и норм амортизационных отчислений.
Амортизационные отчисления распределяли между отдельными видами представляемых услуг по подразделениям пропорционально годовым затратам на оплату труда (ветеринарного врача, лаборанта и ветеринарного санитара) по соответствующим исследованиям.
Платные ветеринарные услуги в государственных ветеринарных учреждениях разрешены распоряжением Совета Министров Российской Федерации от 30 октября 1991г., в котором представлено право Министерству сельского хозяйства Российской Федерации по согласованию с Министерством финансов РФ утверждать перечень платных и бесплатных ветеринарных услуг, оказываемых государственными ветеринарными учреждениями и организациями Минсельхоза России.
Начальником Главного управления ветеринарии Московской области, в 2014г. утвержден перечень платных и бесплатных ветеринарных услуг для районных, городских станций по борьбе с болезнями животных и ветеринарных лабораторий.
При расчете стоимости платных ветеринарных услуг учитываются затраты на ветеринарные мероприятия, которые складываются из стоимости трудовых и материальных ресурсов, используемых на проведение организационных, ветеринарно-санитарных, лабораторных, лечебно-профилактических, диагностических и других услуг (85, 97, 99).
Формирование затрат на ветеринарные услуги, включающих в себестоимость выполненных работ и оказанных услуг осуществляли по следующим экономическим элементам затрат: – материальные затраты, к ним относили стоимость использованных диагностических тест систем, стандартов химреактивов, расходных материалов, инструментов, оборудования, топлива, электроэнергии, топливно-смазочных материалов, стоимость транспортных услуг, тары, упаковок и т.д.; – затраты на оплату труда, к ним относили основную, дополнительную заработную плата ветеринарных работников, других рабочих и служащих ветеринарного учреждения, а также подсобных рабочих, привлекаемых к осуществлению ветеринарных мероприятий; натуральная оплата труда; 126 надбавки и доплаты к должностным окладам; оплата очередных и дополнительных отпусков; выплаты по районным коэффициентам, надбавки за стаж работы и др.; – начисление на заработную плату; – накладные расходы. Для расчета стоимости услуг использовали нормативы затрат труда (трудоемкость), требуемых для выполнения каждой услуги, работы, оказываемых работниками ветеринарных учреждений и служб в час (42, 49, 51, 55, 59, 64).
Разработка методики определения размера платы за оказание услуги по ветеринарно-санитарной экспертизе и лабораторным исследованиям предоставляемой Московской областной ветеринарной лабораторией
Проведение ветеринарно-санитарной экспертизы и лабораторных исследований (далее – услуга) предусмотрено Законом Российской Федерации от 14 мая 1993г. № 4979-1, ФЗ- 243 2015г. «О ветеринарии государственных услуг».
Указанные услуги являются необходимыми и обязательными для выдачи заключения о соответствии требованиям действующих ветеринарных и санитарных правил и норм.
Целью методики является обеспечение обоснованности платы за услугу. Плата за оказание услуги определяется с учетом проведения необходимых исследований в зависимости от вида объекта услуги и требований к его безопасности в соответствии с действующей нормативной базой. Расчет оплаты за проведение лабораторных исследований при осуществлении ветеринарно-санитарной экспертизы. 1. Плата за оказание услуги по проведению ветеринарно-санитарной экспертизы (S) определяется по формуле: S = Зпл + Зрм + Зам + Зон, где: 127 Зпл - затраты на оплату труда работников, занятых оказанием услуги; Зрм -затраты на расходные материалы, использованные на оказание услуги; Зам -затраты на амортизацию оборудования, используемого при оказании услуги; Зон -затраты на общехозяйственные нужды. 2. При расчете затрат на оплату труда и начислений на выплаты по оплате труда учитываются затраты на оплату труда работников, непосредственно участвующих в выполнении работ. Затраты на оплату труда (Зпл) работников, занятых оказанием услуги, определяются как сумма прямых расходов на заработную плату, компенсационных платежей и выплат стимулирующего характера, а также начислений на выплаты по оплате труда с учетом потребности в количестве персонала, принимающего непосредственное участие в оказании услуги, его квалификации и времени (час.), затраченного на проведение исследований.
Затраты на оплату труда за 1 час работы специалистов рассчитывается путем деления среднемесячной заработной платы на норму рабочего времени, определяемую как произведение числа рабочих дней в году на продолжительность рабочего дня (при 40-часовой рабочей недели), деленное на 12.