Введение к работе
. Акту_альдасть_прд0л9мы. В настоящее время в мире насчитывается более 150 000 больных СПИД, а количество инфицированных (по оценкам экспертов ВОЗ) достигает 5 000 000 - 10 000 000. Каждые 8-12 месяцев число больных удваивается. В настоящее время не вызывает сомнений ведущая роль вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) в патогенезе СПИД. И хотя ВИЧ достаточно хорошо изучен (по сравнению с вирусами, вызывающими другие заболевания), это не дает оснований для оптимизма. Патогенез многочисленных иммунологических нарушений, развивающихся при инфицировании ВИЧ неясен. Имеются данные о прямом иммуносупрессивном действии Еирусного белка gp4i и др. вирусных белков (Sandstrom et al., 1986; Mann et al., 1987; Amadori et al., 1988). Многочисленными исследованиями показана аутоиммунная природа нарушений при СПИД. Аутоагрессия провоцируется свободно циркулирующими вирусными белками. ВИЧ способен к потере поверхностного белка gpl20 по мере своего созревания (Gelderblom et al., 1987), наличие высокого сродства данного белка к св4-рецептору приводит к атаке сенсибилизированными лимфоцитами и/или антителами к gpi20 в организме болышх комплекса gpi20-CD4 на поверхности здоровых Сж-положительных клеток (Klatzman, Montagner, 1986; Lyerly et al., 1987; Sodorsky et al., 1987). Инфицированные ВИЧ субъекты продуцируют сильный иммунный ответ на оболочечные и ядерные антигены вируса, однако, нейтрализующая вирус активность чрезвычайно слаба и не предотвращает развитие болезни (Weiss et al., 1985; Klatzmaran et al., 1986; Sullivan, 1989). Возможна передача ВИЧ непосредственно из клетки в клетку при наличии специфических антител в организме больного (Bloom, 1937).
Несмотря на значительные успехи медицинской науки, проблема лечения синдрома приобретенного иммунодефицита является одной из наиболее трудноразрешимых проблем современности. Традиционные подхода - попытки создания вакцины и лекарственная терапия не приносят ожидаемого успеха. Наиболее эффективный химиотерапевтический препарат - азидотимидин (АЗТ) - вызывает ряд побочных действие кровь больных, которые лечатся АЗТ, сохраняет инфекционность (Baumgarten, 1989; Collins, Unaukat, 1989). Растет число сообщений о формировании резистентности вируса иммунодефицита человека к лекарственным препаратам (Маги, 1989). Применение шгазмафереза и биоспецифической шюзмосорбции с использованием иммобилизованного протеина А приводит, наряду с удалением вирусных белков в составе циркулирующих иммунных комплексов (Balint, Hargreaves, 1987; Berman et al., 1988), к значительному уменьшению содержания всех иммуноглобулинов в крови больных и углублению иммунодефицита.
Альтернативой традиционным подходам к лечению СПИД может яеиться патогенетически обоснованное селективное удаление из организма носителя БИЧ вирусных белков и/или некоторых популяций антител, а также инфицированных ВИЧ клеток с помощью методов эфферентной медицины. Имеются в виду хирургические методы экстракорпоральной дегоксикации такие как, например, экстракорпоральная иммуносорбция, основанная на специфическом взаимодействии антиген-антитело. Преимущество данного подхода в том, что взаимодействие комплиментарных молекул осуществляется вне организма и характеризуется высокой избирательностью по отношению к извлекаемым компонентам. Существенное понижение уровня заданного протеина в жидкостях тела, а так же'
инфицированных ВИЧ клеток может бить полезно как в уточнении
патогенеза СПИД, так и в Енрабогке его комплексной терапии. Цель и задачи исследования.
Цель настоящего исследования - разработка экстракорпорального
метода связывания индивидуальных вирусных Оєлкое и антител к ним,
вирионов ВИЧ и инфицированных ВИЧ клеток с помощью специфических
сорбентов.
В соответствии с целью были сформулированы следующие
конкретные задачи исследования:
1. Создать высокоспецифичные иммуносорбенты с использованием
доступных методик и материалов.
2. Оценить гемосовместимость иммуносорбентов и выяснить
возможность проведения экстракорпоральной иммуносорбции без
предварительной сепарации плазмы.
3. Подобрать оптимальную модель на животных, позволяющую точно
оценивать результаты экстракорпоральной иммуносорбции.
Научная_новизна. Впервые разработан ггринцштаэльно ноенй подход к детоксикации организма при СІВД - селективная элиминация из кроЕИ индивидуальных вирусных белков (env) с помощью иммуносорбции. Настоящий подход полностью лишен недостатков традиционных методов лечения, связанных с введением в организм больного ксенобиотиков, и направлен на охрану внутренней среды организма.
Впервые были созданы (синтезированы) и испытаны соответствующие вида иммуносорбентов, проведена апробация метода на животных. Результаты испытаний сорбентов свидетельствуют - о высокой избирательности и высокой емкости сорбентов по отношению к извлекаемым индивидуальным белкам вируса иммунодефицита
человека.
Практическая_ценность. Разработанный метод может быть адаптирован для применения в клинике с целью удаления индивидуальных белков ВИЧ из крови больного. Анализ полученных данных позволил обосновать.возможность применения синтезированных иммуносорбентов, специфически связывающих индивидуальные белки вируса иммунодефицита человека (gpl20) в комплексном лечении больных синдромом приобретенного иммуннодефицита для снижения ангигенемии и вирусемии ( у больных с развернутой клинической картиной СПИД ).
Проведение экстракорпоральной иммуносорбции возможно как на плазме, так и на цельной крови, без предварительной сепарации плазмы.
В экспериментах на кивотных продемонстрирована безопасность метода, показана гемосовместимость иммуносорбентов.
Алробация_работы. Основные положения и выводы диссертации доложены и обсуждены на научных конференциях кафедры оперативной хирургии и топографической анатомии 2-го МОЛГММ им. Н.И.Пирогова (Москва,1986-1990); на научных семинарах лабораторий аффинной сорбции, прикладной иммунохимии, иммунопатологии НИИ ФШ МЗ РСФСР (Москва, 1987-1990). Апробация работы состоялась на совместной научно-практической конференции кафедры оперативной хирургии и топграфической анатомии 2-го МОЛГЫИ им. Н.И.Пирогова и НИИ ФХМ МЗ РСФСР (Москва, 1990).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 2 работы, получено положительное решение по заявке на изобретение.
0б5вм_и_структ^а_диссе2гацш. Диссертационная работа изложена на 112 страницах машинописного текста и состоит из веєдєшїя,
оозора литературы, описания материалов и методов, собственных
результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка
использовзнной литературы, Еключэющего 226 источников ( 5S
отечественных и (70 зарубежных ). Диссертация содержит 7 таблиц,
1 схему и рисунков.