Введение к работе
Актуальность проблемы. Черепно-мозговая травма продолжает оставаться в центре внимания исследователей в нашей стране и за рубежом. В настоящее время пациенты с черепно-мозговой травмой составляют 50,9-61,3% всех больных нейрохирургических отделений. В современной литературе обоснована активная хирургическая тактика в отношении очагов ушиба-размозжения головного мозга.- При использовании традиционной хирургической тактики уровень летальности при данной патологии остается высоким и составляет по данным литературы от 20,4 до 32,9%. Неполноценное восстановление функций центральной нервной системы приводит к инвалидизации 70,1% больных.
В последнее время началась интенсивная разработка и активное внедрение в клиническую практику нового метода реконструктивной нейрохирургии - трансплантация эмбриональной нервной ткани. Возможность приживления, роста и дифференцировки трансплантированного неокортекса доказали многие экспериментальные исследования как у нас в стране, так и за рубежом. Пересаженные нейроны способны реиннервировать ближайшие участки мозга. Нейроны трансплантатов обнаруживают спонтанную активность, высвобождают присущие им медиаторы, трофические и ростовые факторы. Взаимодействие клеток трансплантата и реципиента делают возможным создание новых и реконструкцию повреждённых внутримозговых систем. Практически все проведенные исследования, связанные с трансплантацией эмбриональной нервной ткани, основаны на электрофизиологических исследованиях мозга реципиента до и после трансплантации. Не изученной остается динамика процесса приживления трансплантата на гистоморфоло-гическом уровне. Мы не встретили в литературе морфологических доказательств формирования взаимодействий между клетками трансплантата и реципиента. Отсутствуют гистологические исследования, посвященные изуче-
нию судьбы пересаженных при трансплантации стволовых клеток нервно ткани. Практически не освещены в литературе возможности трансплантаци криоконсервированых эмбриональных нервных тканей.
Актуальность проблемы поиска новых эффективных методов лечени тяжелых черепно-мозговых травм, многообещающие возможности ней ротрансплантации эмбриональных тканей, множество нерешенных вопросо и отсутствие четких морфологических доказательств эффективности пред ложенной методики побудило нас заняться данным исследованием. ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Целью настоящей работы является экспериментальное обоснован^ эффективности применения эмбриональной нервной ткани в лечении тяже лой черепно-мозговой травмы.
Для достижения поставленной цели поставлены следующие за дачи:
-
Разработать методику воспроизведения экспериментальной мо дели тяжелой черепно-мозговой травмы. Экспериментально раз работать оптимальный способ и технику пересадки эмбриональ ной нервной ткани в зону повреждения головного мозга при тя желой черепно-мозговой травме
-
Изучить характер и динамику гистоморфологических изменениі в зоне повреждения головного мозга при тяжелой черепно мозговой травме у лабораторных животных.
-
Оценить динамику гистоморфологических изменений в очаг< травматической деструкции головного мозга после транспланта ции эмбриональной нервной ткани в эксперименте.
-
Обосновать возможность применения трансплантации криокон-сервированной эмбриональной нервной ткани при тяжелой черепно-мозговой травме.
-
Обосновать преимущества применения трансплантации эмбриональной нервной ткани в очаг размозжения головного мозга при тяжелой черепно-мозговой травме.
Для решения поставленных задач применена разработанная нами методика воспроизведения тяжелой черепно-мозговой тр&мвы, наносимой ударом стандартной силы при помощи специального устройства. Для проведения экспериментов выбраны крысы линии "Вистар" средней массой 230 г (108 животных в основной и 80 - в контрольной группах). Опыты на животных осуществлялись согласно "Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных". (Приказ МЗ СССР № 755 от 12.08.77г.) Нами усовершенствована и применена для работы с лабораторными животными методика трансплантации эмбриональной нервной ткани в очаг травматической деструкции головного мозга. В ходе экспериментов проведена трансплантация как полученной непосредственно перед опытом, так и криокон-сервированной эмбриональной нервной ткани. Дополнена и усовершенствована методика глубокого замораживания фрагментов эмбриональной нервной ткани. Оценка результатов произведена при помощи гистологического исследования препаратов головного мозга из зоны травматической деструкции и трансплантации, окрашенных гематоксилин - эозином (всего приготовлено 1900 препаратов).
Впервые на основании гистоморфологических исследований доказана возможность применения трансплантации эмбриональных нервных клеток в качестве способа лечения тяжёлой черепно-мозговой травмы.
Предложены усовершенствованные методики экспериментального воспроизведения тяжелой черепно-мозговой травмы, забора, криоконсерви-рования, и трансплантации эмбриональной нервной ткани, создания банка эмбриональных клеток головного мозга.
Предложенные усовершенствованные методики экспериментального воспроизведения тяжелой черепно-мозговой травмы, забора, криоконсерви-рования, хранения и трансплантации эмбриональной нервной ткани, повышающие точность проводимых опытов, могут быть использованы для дальнейших исследований в области нейротрансплантации.
Разработанный в эксперименте способ лечения тяжелой черепно-мозговой травмы будет предложен для клинической апробации. При данном способе будет обеспечиваться хорошее приживление трансплантата, высокая функциональная активность пересаженных клеток, их высокая регенераци-онная способность.