Введение к работе
Актуальность проблемы. Механизмы повреждения структур почечного клубочка при гломерулонефритах и невоспалительных гломерулопатиях существенно различаются (Olson J.L. et al., 1988; Salant D.J., 1987). Тем не менее многие экспериментальные модели и морфологические формы хронического гломерулонефрита человека сопровождаются инфильтрацией почечного клубочка мононуклеарными лейкоцитами (МЛ) (Nahas El A.M., 1988). Использование моделей экспериментальных гломерулопатий с последующим получением культуры клеток почечного клубочка является одним из наиболее информативных методов исследования, позволяющим определить роль медиаторов, продуцируемых МЛ. Установлено, что ИЛ-1 и ФНОа, продуцируемые моноцитами, инициируют пролиферацию мезангиальных клеток (МК) в экспериментальных моделях гломерулонефрита (Diamond J.R. et al., 1991; Hoedemaeker P.I. et al., 1989). Использование различных приемов удаления МЛ (субтотальное облучение, антимоноцитарная сыворотка, метилпреднизолон) показали их ведущую роль не только в механизмах повреждения, но и клеточной репарации (Kovacs E.F., 1991). Моноциты являются источниками различных протеаз и основного фиброгенного фактора - ТФРр, регулирующего продукцию компонентов внеклеточного матрикса. Таким образом МЛ индуцируют накопление внеклеточного матрикса и способствуют его утилизации.
Однако, роль МЛ в каждом конкретном случае недостаточно определена, поскольку они способны продуцировать широкий спектр медиаторов, оказывающих как стимулирующее, так и супрессорное действие на различные клеточные процессы, в том числе на продукцию внеклеточного матрикса. Усиление синтеза компонентов экстрацеллюлярного матрикса и/или уменьшение их утилизации приводит к накоплению внеклеточного матрикса в почечном клубочке и, как следствие к гломерулосклерозу - исходу большинства заболеваний почечного клубочка (Sporn М.В.,1997).
Цель исследования. Изучить роль мононуклеарных лейкоцитов в развитии гломерулосклероза на экспериментальных моделях гломерулопатий с иммунными и неиммунными механизмами повреждения и сопоставить экспериментальные данные с морфологически близкими формами хронического гломерулонефрита человека.
Задачи исследования :
1.Воспроизвести модель ускоренного нефротоксического нефрита и охарактеризовать медиаторы мононуклеарных лейкоцитов, регулирующие продукцию внеклеточного матрикса.
2.Охарактеризовать структуру внеклеточного матрикса в острой и хронической стадиях нефротоксического нефрита; выявить компоненты, усиливающие риск развития склероза.
3.Воспроизвести модель пуромицин-аминонуклеоэидного нефроза и изучить медиаторы мононуклеарных лейкоцитов, регулирующие продукцию внеклеточного матрикса.
Д.Дать оценку структуры внеклеточного матрикса в острой и хронической стадиях пуромицин-аминонуклеоэидного нефроза; выявить компоненты, ведущие к развитию гломерулосклероза.
Б.Сопоставить экспериментальные данные с морфологически близкими формами хронического гломерулонефрита человека.
Научная новизна - впервые продемонстрирована роль мононуклеарных лейкоцитов в регуляции накопления и деградации внеклеточного матрикса в экспериментальных гломерулопатиях, отражающих иммунные и неиммунные механизмы повреждения структур почечного клубочка; - подтверждено, что механизм повреждения определяет степень инфильтрации почечного клубочка, локализацию мононуклеарных лейкоцитов и спектр продуцируемых ими цитокинов; -впервые показано, что для нормальной регуляции метаболизма внеклеточного матрикса необходимо присутствие мононуклеарных лейкоцитов в зоне репарации. Отсутствие мононуклеарных лейкоцитов в зоне повреждения или их избыток могут вызывать извращенный синтез компонентов внеклеточного матрикса - появление интерстициальных коллагенов в мезангиальном матриксе, что усиливает риск развития склероза; - впервые отмечено, что при хрониэации процесса, независимо от механизма первичного повреждения, в почечном клубочке появляются общие морфологические признаки склероза. Однако, скорость накопления внеклеточного матрикса и появление извращенного синтеза коллагена зависят от соотношения мононуклеарных лейкоцитов и мезангиальных клеток в почечном клубочке.
Практическая ценность. Экспериментальные данные и результаты морфологического исследования клинических биоптатов демонстрируют высокую
вероятность развития склероза у больных с выраженной инфильтрацией мезангия мононуклеарными лейкоцитами; - полученные данные свидетельствуют, что используемые методы лечения хронического гломерулонефрита являются часто неадекватными процессу, протекающему в почке. При выборе терапии больных хроническим гломерулонефритом следует учитывать данные исследования почечного биоптата; - экспериментальные данные о влиянии метилпреднизолона на мононуклеарные лейкоциты и регуляцию ими продукции внеклеточного матрикса могут служить показаниями для его использования при лечении хронического гломерулонефрита.
Реализация практических рекомендаций. Результаты исследований используются при лечении больных хроническим гломерулонефритом в клинике терапии и профзаболеваний ММА им.И.М.Сеченова и ряде нефрологических отделений г.Москвы, а также при чтении лекций на кафедре патологической анатомии ММА им.И.М.Сеченова
Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы. Апробация диссертации проведена на совместном заседании кафедры патологической анатомии 1 л/ф и лаборатории клеточной и молекулярной патологии ММА им. И.М.Сеченова 19 июня 1997 г.
Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов исследования и их обсуждения, заключения и выводов. Текст изложен на 96 стр. машинописного текста, иллюстрирован 5 таблицами и 36 рисунками, в том числе микрофотографиями и электроннограммами. Библиографический указатель включает 199 источников, из них 13 отечественных. Положения, выносимые на защиту.