Введение к работе
Актуальность проблемы. Актуальным вопросом современной иммунологии продолжает оставаться клеточный и молекулярный механизм распознавания чужеродных внгигенов Т-лимфоцитами. В рамках этого вопроса не первый план выходит проблема развития иммунного ответа в аллогенной системе. Понимание закономерностей атого процесса откроет новые перспективы для решения важных вопросов современной медицины и прежде всего проблемы отторжения Трансплантируемых органов и тканей. Молекулярные механизмы аллорастазнавакия гакэге, как и структура аллогенных мишеней, распознаваемых аллореактивными Т-клетками, остаются до конца не выясненными. Крайне мало изучены процессы дифференцировки алловнтиген-специфических Т-лимфоцитов, приводящие к появлению, у клеток-предшественников функций эффэкторных клеток. Немаловажным является вопрос о том. через одни и те же этапы или нет проходит дафференцировка клеток, впервые встречающихся с антигеном, и клеток памяти (КБ).
Актуальность темы исследования обусловливается также теоретической и практической значимостью изучения роли ко-рецепторов и адгезивных молекул в Т-клеточном распознавании. Данные исследования предоставляют дополнительные возможности селективной регуляции иммунных реакций отторжения трансплантата.
Цель работы. Целью диссертационной работы явилось изучение особенностей распознавания аллоантигена популяциями СГ8+ цитотоксических ї-лимфоцитов (ЦТЛ) в зависимости от различной аффинности Т-рецептора (TcR) и от участия в распознавании CD8 и LPA-1 .ко-рецепторных молекул, а также сравнение природы аллогенных эпитопов, распознаваемых супрессорным и
цитотоксическим подклассами CD8+ Т-лимофоцитов. Вторая проблема исследования заключалась в выяснении условий дифференцировкн предшественников вффэкторных первичных ЦГЛ и КП в' аллогенной системе.
Задачи исследования. 1. В аллогенной системе сравнить
условия и скорость дифференцировки предкостзенников первичных ЦТЛ U КП, являющихся предшественниками вторичных &ффекторшх ЦГЛ.
-
Изучить влияние ко-рецвпторнои МОЛв-кулы CV3 (1у2) на функшш аллоанти-ген-специфических аффекторных ЦГЛ 13 КП в зависимости от аффинитета TcR.
-
Исследовать роль 0-цепи адгезивной молекулі Ы>1-1 в процессе аллоанти-ген-специфическоя активации Т-лимфо-цитов.
'4. Выяснить возможные различия в
распознавании антигенных эпитопов
Сев'*' аллорвактившпш Т-лимфоцитами,
опосредувдими специфические супрес-
сорную и цитотоксичесую активности в
одних и тех ае условиях иммунизации.
Научная новизна. В представленной работе получены
экспериментальные . данные, свидетельствующие в пользу
существования различных условии диффвренцировки предшественников
первичных аффехторных ЦГЛ и КП. Впервые показано, что для
созревания первичных ЦГЛ из пре-ЦТЛ на заключительном этапе
антиген-завг"чшой дифференцировки синтезы РНК и белка являются необходимыми. Напротив, формирование вторичных ЮТ из КП происходит в условиях ингабирования указанных синтезов.
В оригинальной экспериментальной системе с использованием адсорбции-элщии иммунных лимфоцитов на монослоях макрофагов (Мф) выяснен вопрос о нвобходимосги CD8 молекулы при взаимодействии низкоаффинных TcR с аллоантигеном. Для б-цепи адгезивной молекулы LFA-1 выявлены ноше возмошюсти в ко-стимуляции аллогенного иммунного ответа.
Показана возможность генерации Т-клеток, опосредующих как специфическую супрессорнув, так и специфическую цитотоксическую активности при одних и тех ss условиях иммунизации. Полученные данные свидетельствуют о том, что одна и та же популяция Ср8+ Т-лимфоцитов может проявлять различные функциональные активности, а распознавание аллоантигенного эпитопа функционально различными субпопуляциями происходит сходным образом, по-видимому, в контексте собственных молекул МНС класса і.
Практическая значимость работа. Диссертационная работа вносит определенный вклад в развитие фундаментальных представления о- механизмах функционирования и дифференцировке специфических эффекторянх ЦТЛ, важных для развития, в первую очередь противоопухолего и противовирусного иммунитета.
Результаты работы, свидетельствующие о том, что ЦТЛ и специфические Т-супрессоры (СТО) могут иметь сходный характер распознавания антигена In rivo, могут быть полезны при разработке подходов иммунотераговтичэского воздействия на популяцию Т-лимфоцитов, опосредующих супрессоршй эффект. Поскольку стратегия иммунотерапии зависит как от выяснения эпитопов, распознаваемых
СТО, так в такой же мере и от решения вопроса о существовании СТО как отдельной линии дифференцировки Т-клеток.
Результаты работы внедрены в учебный процесс и используются в курсах лекций по фундаяентальной иммунологии для студентов биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова и факультета физико-химической биологии Крымского медицинского института.
Апробация работы и публикации. Результаты исследований, вошедшие в диссертационную работу, были представлены на отечественных и зарубежных конференциях и симпозиумах: на I г езде иммунологов России (Новосибирск, 1992), I съезде аллергологов и иммунологов Азербайджана (Баку, 1992), viii Международном конгрессе по иммунологии (Будапешт, Венгрия, 1992), Меадурародаом симпозиуме "Структура и функции регуляторних полипбптидовп (Москва-Ярославль, 1992), XI республиканской научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" (Челябинск,1992), III съезде гигиенистов, зпидемиологов, микробиологов и паразитологов Респ. Молдова (Кишенев, 1992), Международной конференции по механизмам киллинга (Израиль, 1993), Республиканской конференции го иммунологии (луганск, 1993).
Полученные экспериментальные данные докладывались на лабораторных и. межлабораторных конференциях, а также на совместной конференции лабораторий механизмов регуляции иммунитета, противоопухолевого иммунитета и иммунохимии опухолей НЮ! канцерогенеза ОЩ РАМН и кафедры вирусологии биологического факультета МГУ*
Материалы диссертации отражены в 17 научных публикациях.
Основний положения, выносимые на защиту. 1. Ко-рецепторная молекула CD8 оказывает существенное влияние на проявление цитолитического потенциала ЦГЛ, несущих низкоафїинше рецепторы.
2. Адгезивная молекула LFA-1 способна передавать индуктивный
ко-стимуляторныя сигнал через свою (Э-субъедгапщу.
-
Аллореактивіше CD8*" Т-лимфоциты со специфическими супреосорной и цитотоксической активностями, индуцированные в одних и тех же условиях иммунизации, способны распознавать узкую аллоантигенную детерминанту в измененном (отличном от донорского) контексте.
-
Условия и пути антиген-зависимой дифференцировки предшественников первичных ЦГЛ и КП в эффекторные- ЦГЛ различны.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 1# страницах машинописного текста. Она состоят из введения, пяти глав обзора литературы, раздела материалов и методов исследования, четырех глав собственных результатов, главы обсуадения результатов, выводов и списка используемой литературы, содержащего 154 источника. Диссертация иллюстрирована 22 рисунками и 6 таблицами''