Введение к работе
Актуальность проблемы. Б 1988 году Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) провозгласила Глобальную Программу Ликвидации Полиомиелита к 2000 году. Основными критериям ликвидации полиомиелита считается отсутствие случаев клинического полиомиелита, связанных с диким вирусом и отсутствие случаев обнаружения диких вирусов в пробах, взятых.из окружающей среды и здорового населения. В связи с этим, одним из ключевых моментов программы стало проведение эпидемиологического мониторинга вируса полиомиелита. В нашей стране актуальность таких исследований определяется задачами здравоох-охранения и экологии. Загрязнение среды обитания человека неочищенными отходами, миграционные потоки из эпидемических регионов создают условия для развития эпидемий. Все это,делает необходимым изучение закономерностей циркуляции полио-вирусов, выявление источника и путей распространения-.инфекции, разработки быстрых и точных методов оценки и прогноза эпидемической ситуации. Традиционные методы вирусологических исследований не позволяют решать задачи эпидемиологического мониторинга в полном объеме. Наименее отработанными этапами мониторинга остаются отбор проб из объектов окружающей среды и концентрирования вирусов и знутритиповая дифференциация выделенных штаммов, а именно - определение происхождения вирусов.
Цель работы. Разработка и внедрение в систему эпидемиологического мониторинга новых методов детекции и идентификации вируса полиомиелита.
Задачи исследования. I.Разработка метода для одновременного отбора и концентрирования проб из водных объектов окру-
жадаэй среды. 2-Определение происхождения штаммов вируса полиомиелита, выделенных от населения и из окружающей среды, в полимеразной цепной реакции (ПНР).
Научная новизна. Предложен новий метод для одновременного отбора и концентрирования проб из водных объектов окружающей среды, показавший в лабораторных, полевых и натурных испытаниях большую эффективность но сравнению с традиционными методами.
Впзрвкз методом ПЦР определено происхождение полиовиру-сов, выделенных от населения и из окружающей среды при проведении эпидемиологического мониторинга.
Показана циркуляция как вакшннородственных, так и диких полиовкрусов в регионах отличающихся санитарно-эпидемиологическими условиями и находящихся на различных стадиях ликвидации полиомиелита.
Показана преобладающая циркуляции вакциннородственных полиовкрусов одного типа среди населения и в объектах окружающей среды е некоторых районах (Тульская область(1991г.), Хабаровский край (1991г.), г.Липецк (1994г.)).
Сопоставление результатов ПЦР и других методов внутри-типовой дифференциации штаммов показало, что штаммы вакцинного происхождения з ряде случаев имели измененные маркеры аттенуации, что может свидетельствовать о существовании условий для проявлеления изменчивости в процессе циркуляции.
Практическая ценность. Разработан и звдосирован з лабораторных и полевых условиях новый метод отбора проб воды с одновременным концентрированием кишэчшх вирусов. Метод внедрен в практику 25 вирусологических лабораторий. Применение ПЦР в системе эпидемиологического мониторинга показало дар-
куляции вакциннородственных и .диких вирусов полиомиелита среди населения и в окружающей среде на всех обследованных территориях. Методом ГЩР определена прїірода вирусов з ряде отдельных случаев и вспышек полиомиелита. Предложенный комплекс методов детекции и идентификации вирусов полиомиелита может быть использован в системе эпидемиологического мониторинга в рззличшх регионах.
На защиту выносятся следувдие основные положения:
I.Новый метод для одновременного отбора проб и концентрирования кишечных вирусов из объектов окружающей среды проявил свою эффективность в лабораторных, полелевых и натурных испытаниях и может быть рекомендован для использования з системе эпидемиологического мониторинга.
2.Эпидемиологический мониторинг, проводимый в регионах, ' отличающихся природными и санитарно-эпидемиологическими ус- -ловиями и находящихся на разных стадиях ликвидации полиомие-' лита (Европейской части России,Киргизии, Эстонии) показал, что при отсутствия эпидемического полиомиелита, происходит постоянная циркуляция полиовирусов среди населения и в ок- ' ружавдей среде.
3.Исследование происхождения вирусов методом ІЩР показало, что наряду с вакциннородственными, во всех обследован-взншх регионах циркулировали дикие полиовирусы, свидетель-ствувдие о неблагополучной эпидемичеческой обстановке.
4.Эпидемические вспышки паралитического% полиомиелита в Таджикистане (1991 г.), Узбекистане (1993 и 1994 гг.) связаны с дикими вирусами I и 3 типов.
5.Исследование штаммов разными методами внутритиповой дифференциации и сопоставление полученных характеристик в
ряде случаев позволяет выявить изменения вакцинных штаммоЕ в процессе циркуляции среда населения и в окружающей среде. Изученные дикие вирусы полиомиелита обладают устойчивым комплексом характеристик.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на Всесоюзной конференции "Энтеровирусы, Общетеоретические и медицинские аспекты"(Киев, 1991), 2 съезде гигиенистов, паразитологов к инфекционистов (Бишкек, 1991), научной конференции памяти М.П.Чумакова (Москва, 1994).
Апробация работы состоялась на заседании межлаборатор-ного Ученого Совета по проблемам общей вирусологии Института полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН 20 июня 1995 года.
Публикация результатов исследований. Материалы исследований отражены в публикациях.
Обьеы и структура работы. Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста (без списка литературы), иллюстрирована 16 рисунками и 16 таблицами. Работа состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания материалов и методов (I глава), раздела собственных исследований (3 главы), обсуждения полученных результатов и выводов. Библиографический указатель содержит 52 отечественных и 134 иностранных литературных источников.