Введение к работе
Актуальность проблемы.
Несмотря на длительный период успешного проведения профилактических мероприятий по предупреждению таких опасных детских инфекций как паротит и корь, остаются актуальными многие вопросы, касающиеся особенностей патогенеза экспериментальных паротитного и коревого вакцинального процессов, а также совершенствования контроля безопасности живых паротитной и коревой ва:<цин.
Известно, что ведущим методом контроля безопасности этих препаратов является оценка степени их остаточной нейровирулентности в тесте на обезьянах. Однако, ни в требованиях ВОЗ, ни в действующей отечественной научно-технической доментации и национальных требованиях других стран, не содержится патоморфологических критериев и методических принципов оценки нейровирулентности как паротитной, так и коревой вакцин [WHO Techl. Rep. Ser.,1987, No.760, Annex 7; 1988, No.771, Annex 5; US Code of Federal Regulations. Title 21, Part 630, Subpart F, D.1994].
Дискутабельной остаётся трактовка морфологических изменений, развивающихся в ЦНС обезьян после интрацеребральной инокуляции этими вакцинами. Обсуждается вопрос о возможности проникновения вакцинных вирусов паротита и кори в нейроны и способности их вызывать те или иные формы поражения нервных клеток. Нуждаются в уточнении особенности локализации изменений в ЦНС, распространения вакцинных вирусов в экстраневральных органах и возможность поражения последних.
До настоящего момента исследователи, ведя дискуссии о характере паротитного и коревого патологического процесса в ЦНС обезьян, ограничивались лишь качественными характеристиками и оценками "больше" или "меньше" и не предпринимали попыток количественной оценки нейровирулентности вакцинных штаммов вирусов паротита и кори. В связи с этим при производственном контроле нейровирулентности всегда стояла проблема установления "допустимых пределов"
изменений в ЦНС обезьян, а оценка безопасности этих препаратов была в значительной мере субъективной.
До сих пор, исследователи при изучении патологического процесса в ЦНС, вызванного интрацеребральным введением различных штаї мов вирусов паротита и кори, совсем не уделяли внимания изучению роли тяжести и топографии травматического повреждения головного мозга.
Невыясненным остается изучавшийся некоторыми авторами вопрос о возможности использования в качестве модели для изучения неї ровирулентных свойств вируса паротита различных животных, в частности мини-свиней, и замены ими ныне существующей и очень дорогостоящей модели на обезьянах.
Все вышесказанное явилось основанием для проведения настоящих исследований по изучению особенностей экспериментальных парі титного и коревого вакцинального процессов и разработки обьективної и достоверного метода количественной оценки степени остаточной нейровирулентности вакцинных штаммов вирусов паротита и кори.
Цель и задачи исследования.
Основной целью настоящих исследований явилось экспериментальное изучение паротитного и коревого вакцинальных процессов и использование полученных данных для совершенствования метода оценки нейровирулентности вакцинных штаммов вирусов паротита и кори.
Задачи исследования состояли в следующем:
-
Изучить морфологические изменения в ЦНС и экстраневраль-ных органах обезьян и установить корреляцию этих изменений с локализацией и активностью накопления вирусного антигена (ВАГ) при инт-рацеребральном и внутримышечном введении вакцинных штаммов вирусов паротита и кори.
-
Установить значение топографии и тяжести инокуляционной травмы головного мозга в патогенезе патологического процесса, разви-
вающегося в ЦНС обезьян при инокуляции вакцинными штаммами вирусов паротита и кори.
-
Разработать на основе количественного подхода объективный метод оценки степени остаточной неировирулентности вакцинных штаммов вирусов паротита и кори с целью установления пределов допустимых изменений в ЦНС обезьян при контроле безопасности живых паротитнои и коревой вакцин.
-
На основе объективного количественного подхода провести сравнительную оценку нейровирупентных свойств различных вакцинных штаммов вируса паротита.
-
Изучить возможность использования мини-свиней а качестве биологической модели, альтернативной обезьянам, для оценки неировирулентности вакцинных штаммов вируса паротита.
Научная новизна исследований.
-
В результате проведенных исследований получены дополнительные данные по характеристике биологических свойств вакцинных штаммов вирусов паротита и кори.
-
Выявлены особенности патогенеза экспериментального инфекционного процесса в ЦНС и экстраневральных органах обезьян, вызванного вакцинными штаммами вирусов паротита и кори.
-
С помощью метода количественной оценки морфологических параметров паротитного патологического процесса в ЦНС обезьян впервые проведено дифференцирование различных штаммов вируса паротита по степени их неировирулентности.
-
Впервые показано влияние инокуляционного травматического повреждения целостности желудочковой системы (ЖС) мозга обезьяй на развитие паротитного и коревого вакцинального процессов в ЦНС.
Полученные данные послужили основанием для усовершенствования контроля неировирулентности живых паротитнои и коревой вакцин.
4 Практическая значимость работы.
-
На основе проведенных исследований усовершенствованы морфологические критерии оценки нейровирулентности вакцинных штаммов вирусов кори и паротита в интрацеребральном тесте на обезьянах.
-
Впервые разработан и применен количественный метод оценки морфологических параметров паротитного и коревого вакцинального процессов в ЦНС обезьян для объективной сравнительной характеристики нейровирулентных свойств различных штаммов и установления пределов допустимых изменений при контроле остаточной нейровирулентности живых паротиной и коревой вакцин.
-
Усовершенствована методика интрацеребральной инокуляции обезьян в тесте нейровирулентности живых паротитной и коревой вакцин с целью уменьшения вероятности травматизации стенок желудочков мозга и снижения интенсивности травматического повреждения..
-
Разработаны и утверждены методические рекомендации "Оценка нейровирулентности живых паротитной и коревой вакцин" использование которых в процессе производства будет способствовать совершенствованию контроля безопасности этих препаратов.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
1. Нейровирулентные свойства вакцинных штаммов вируса паро
тита при интрацеребральной инокуляции обезьянам обусловлены их
высокой тропностью к элементам ЖС мозга и проявляются в развитии
характерной патоморфологическои триады: хориоплексита, эпендимита
и перивентрикулярного энцефалита.
-
Нарушение целостности стенок желудочков при инокуляцион-ной травме мозга, является неблагоприятным фактором, способствующим распространению вирусов паротита и кори по ЖС и усугубляющим развитие специфического патологического процесса в ЦНС.
-
Впервые разработанный метод количественной оценки параметров патологического процесса, развивающегося в ЦНС обезьян после
введения вакцинных штаммов вирусов паротита и кори, позволил получить объективные показатели остаточной нейровирулентности, установить пределы допустимых морфологических изменений в ЦНС обезьян и стандартизировать оценку безопасности живых паротитнои и коревой вакцин при производственном контроле.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научной конференции "Актуальные проблемы диагностики и профилактики кори, эпидемического паротита и краснухи" (Москва, 1992); конференции молодых ученых ЦНИИЭ "Актуальные вопросы эпидемиологии и инфекционных болезней""(Москва, 1992); юбилейной научно-практической конференции, посвященной 70-летию Института им. Пастера "Актуальные проблемы инфекционной патологии" (Санкт-Петербург, 1993); межлабораторной конференции ГИСК им. Л.А.Тарасевича (Москва, 1992); заседании Ученого совета ГИСК им. Л.А.Тарасевича (Москва, 1994). В завершенном виде диссертационная работа обсуждалась на заседании Ученого совета ГИСК им. Л.А.Тарасевича (Москва, 1995).
Публикация материалов исследования.
По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ.
Объем и структура работы. Диссертация объемом 211 страниц машинописного текста (без списка литературы) состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и приложений. Работа иллюстрирована 60 таблицами и 80 рисунками. Библиография включает 113 работ отечественных и 192 работ зарубежных авторов.