Введение к работе
Актуальность темы. Химиотерапия и химиопрофилактика вирусных инфекцн.. - одна из ведущих проблем современной медицины, что обусловлено шіроїшіл распространением заболевании вирусное этиологии и весыла ограниченным количеством эффективных лекарственных средств (В.И.Вотяков, Г.А.Галегов, 1983; Ф.И.Ершов, 1983; Ф.И.Ершов и соавт., 1986; Galasso, 1984).
Особенности жизнедеятельности вирусов, как внутриклеточных паразитов на молекулярно-генетнческом уровне, диктуют необходимость дальнейшего поиска веществ, обладающих антивирусной активностью. Основными направлениями такого поиска являются скрининг антивирусной активности среда большого количества веществ в отношении определенного спектра вирусов, давшії такие эффекгивше прогивогришюзние средства, как производные адамангана (Davies ct al., 1934), а тагаке - создание химио-препаратов, направленно действующих на определенный этап вирусной репродукции (видарабин, адикловир и др.).
Одним из актуальных налравлениіі экспериментальной химиотерапии вирусных инфекций является применение комбинации хи-миопрепаратов, имеющих различную химическую структуру и различный механизм антивирусного действия. В этом направлении существенные результаты были получены на моделях экспериментальной гриппозной и герпетической инфекций (Г.А.Галегов и соавт., 1980; О.Т.Андреева и соавт., 1982; Ф.И.Ершов и соавт., 1984).
E'-іесте с тем, проблемы антивирусной химиотерапии еще далеки от разрешения. Ограничен перечень препаратов, используемых в медицинской практике, а против ряда возбудителей (Коксаки-, ЕСЯО-Еирусы и др.) их вообще нет. Серьезным пре-
ііяїстеш.і является достаточно 6uctijoc формирование вариантов вируса, резистентних і: де.'.ств:;ю селективних хкмпопрспаратог, что стаЕит под угрозу их использование в будущем.
Существенно расшряот еозмошости поиска антивирусных средств сфориулкрованкая В...і.їідаіюв;.и.і (1904) концепт "по— традиционно? путе.; терашш впруспих ниґ-еіаии, основным іюло-кслием которой является воздействие не только пи вирус, и о п па клетку, лоракениуы вирусом. При этом нельзя не учитывать воздействие иееледуешх воцеотв на лымукпую сноте;.іу, в той чпсле - систему интерферона, являющуюся универсальным пммупо-нодулятором п медиаторо;,; і.іноі'пх иммунных реакцій в организме (А.Г.Букркнская, 1984; Ф.Л.Дршов, В.м.Кцанов, 1985; Ф.ІІ.іір-шов и соешт. , 1990).
Настоящая работа выполнена е райках проблем:: ГЮІТ СССР "Здоровье населения Сибири" (p 14,6-3.4 к G.3.C) к является фрагмент о:.; договора Новосибирского медицинского института с ;,В РСФСР -І 30/243/7 (; гос. регистрации 0189.C077IG0).
Цель работа - экспериментальное обоснование возмошюстн применения нестероиднііх противовоспалительных средстЕ ii дру-гих продетавптсле.1 различных классов хы.1;;чеи:;;х соединили в хпмпотерашл; впрусних шадеісціи.
В соответствіш с поставленное целью определены задачи исследования:
-
Провести массовик скрипиш вновь сіштезированішх химических соедцненн.. различных классов в культурах клеток для обнаружения противовирусное активности.
-
Изучить возгонное антивирусное действие нсстеропдннх дротявовосяаллгелыих средств в культуре клеток.
-
Оценить сочетанное действие нест ерокдашх иротнвовос-
паші тельных средств и веществ, обладающих антивиру сію.і активностью, в культуре клеток.
-
исследовать иммуноподулирующую и интерферошшдуцирую-сус активность нестеропдшх противовоспалительных средств.
-
Выяснить еозмогіюсть лечебного и профилактического действия псотероидішх проті'ївоЕоспалительніїх средств, отоорап-іг.::: в результате скрининга, на динамику экспериментального инфекционного процесса, обусловленного вирусами гриппа Л, герпеса простого I типа, Коксаки ВЗ.
о. изучить ингпопрумцее действие нестеропдных протквовос-лалптелышх средств в кскопнацнп с известным хш.іиопрепаратом,-ре;.:антадшюі.і, на развитие и исход экспериментальной гриппозной инфекции.
7. изучить ингпбируюцее децствпе несгероидпых протпвовос-падптелышх средств в комбинациях с пзбєсті-шми химпопрепарата-;.;п, - ацпкловпроп и поли ;: : поли ц, на развитие и исход экспериментального герпетического онцесіалита.
Научная новизна. Впервые установлена способность подав
лять репродукции РЕХ-содернацпх (Коксакс ЛІЗ і: В4, ECHO II,
везикулярного стоматита) п ДКХ-содеркацих (простого герпеса
ї типа) вирусов у еноеь синтезированных представителей следую
щих классов химических соединении: производные шенилсерина,
атуорена, пиразола, триазина, пиидазола, ашноашониеЕых со-
лєіі и др. '
Впервые показана способность 4-йодантипирина подавлять е культуре клеток репродукцию энтеровирусоЕ (Коксаки А и В, ECHO), рабдовирусов (везикулярного стоматита), герпесвирусов (вирус простого герпеса I типа).
Впервые установлено ишуностимулирующее действие 4-йод-
антипирина, а также - его интерферонстимулирующий эффект.
Впервые на экспериментальных моделях гриппозно:!, герпетической и Коксаки ВЗ-вирусной инфекщпі получены данные о зарином действии 4-йодантипирина и доказана высокая эффективность его применения в комбинации с известными противовирусными препаратами, - ремантадином и ацикловиром.
Практическая значимость работы. По результатам проведенных исследовании'получено 18 авторских свидетельств на изобретения, где показана противовирусная активность у ряда вновь синтезированных химических соединений. Сведения о противовирусных, иммушмодулирующих и интерферониндуцирующих свойствах 4-ііодантипирина включены в материалы, представленные в Фармакологический Комитет МЗ РФ для разрешения клинических испытаний 4-йодантипирина в качестве средства профилактики и лечения гриппа, миокардитов энтеровирусноп этиологии, клещевого энцефалита на клинических базах томского медицинского института и Института фармакологии Томского научного центра РАМН.
Результаты проведенных исследований включены в лекционный курс и практические занятия по вирусологии на кафедре микробиологии Новосибирского медицинского института, а такхе в лекционный курс по нестероидным противовоспалительным средствам на кафедре фармакологии томского медицинского института.
Основные положения, выносимые на защиту:
I. Вновь синтезированные химические соединения - представители различных классов (производные фенилеерипа, флуоре-на, пиразола, триазина, имвдазола, ашноаммонневые соли и др.) способны подавлять в культуре клеток репродукцию вирусов Коксаки АІЗ и В4, ECHO II, везикулярного стоматита, простого герпеса I типа.
-
Нестероидные противовоспалительные средства (производные пиразолона и салицилаты) при предварительной обработке шли культур клеток способны проявлять антивирусную активность с наибольшей эффективностью у 4-йодантипирина.
-
4-йодантшшрин и ацетилсалициловая кислота оказывают защитное действие при экспериментальной гриппозной инфекции, которое усиливается при комбинации этих препаратов с реманта-
даном с достижением синергидного эффекта.
-
4-йодантипирин способен предотвращать развитие герпетического энцефалита мышей. Комбинация 4-йодантипирина с ацик-ловиром при данной экспериментальной инфекции усиливает защитный эффект с аддитивным характером взаимодействия.
-
При Коксаки ВЗ-вирусной инфекции новорожденных мышей профилактическое введение 4-йодантипирина оказывает достоверный защитный эффект.
-
4-йодантипирин обладает иммуностимулирующим и интерфероне тимулирующим действием, что может лежать в основе его антивирусной активности.
-
По итогам проведенных исследований 4-йодантипирин может быть рекомендован для клинических испытаний в качестве антивирусного средства.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на:
- пленарных заседаниях Всесоюзной проблемной комиссии "Химиотерапия и химиопрофилактика вирусных инфекций; особоопас-ные и медленные вирусные инфекции" и объединенной научной -сессии Белорусского НИИ эпидемиологии и микробиологии и Белорусского научного медицинского общества микробиологов, эпидемиологов и паразитологов в г. Минске в 1983 и 1985 гг.;
конференциях молодых ученых Инсгитуга микробиологии им. А. Кирхенштейна АН Латвии в 1984 я 1987 гг.;
УП Мечниковской конференции "Современные проблемы вирусологии, микробиологии и иммунологии" в г. Одессе в 1984 г.;
УП и к конференциях "Факторы гуморального и клеточного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" в г. Челябинске в 1984 и 1988 гг.;
итоговой научной сессии, посвященной 50-летию Новосибирского медицинского института в 1985 г.;
пленарных заседаниях Новосибирского отделения Всероссийского общества микробиологов, эпидемиологов и паразитологов,
г. Новосибирск, 1986 и 1988 гг.;
симпозиуме 'Новые подходы к химиотерапии вирусных инфекций" в г. Риге в 1989 г.;
всесоюзной конференции "Энтеровирусы. Общетеоретические и медицинские аспекты" в г. Киеве, 1991 г.;
всесоюной конференции по химиотерапии инфекционных заболеваний в г. Москве, Г99Г г.
По теме диссертации опубликовано 23 научные статьи.
Объем и структура работы. Диссертация написана в монографическом стиле и состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов и приложений. Материал изложен на 294 страницах машинописного текста, включающего 55 таблиц и 23 рисунка. Биб--"лиографический указатель включает 357 наименований отечественных и зарубежных авторов.
Экспериментальные исследования по программе данной работы выполнены в вирусологической лаборатории кафедры микробиологии с вирусологией и иммунологией Новосибирского медицинского института (зав.кафедрой - профессор В.Е.Яворовская) и в ла-
боратории химиотерапии вирусных инфекций Института вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН (зав. лабораторией - профессор Г.А.Галегов). Большую помощь и поддержку при выполнении данной работы оказали заслуженный деятель науки РСФСР, профессор А.ССаратяков и профессор Т.Л.Прищеп (Томский медицинский институт). Ряд экспериментов и обсуждение полученных результатов проводились совместно со старшим научным сотрудником Института вирусологии км. Д.И.Ивановского РАШ, кандидатом биологических наук н.Ф.Правдиной, старшим научным сотрудником Института клинической иммунологии СО РАМН, кандидатом медицинских наук И.А.Орловской, старшим научным сотрудником Института органической химии АН Республики Армения, кандидатом химических наук А.Х.Гюльназаряном, ассистентами кафедры микробиологии Новосибирского медицинского института, кандидатами медицинских наук Е.С.Воробьевым и Л.Н.Гриценко, за что автор выра-нает всем им искреннюю признательность и благодарность.