Введение к работе
Актуальность проблемы.
С момента открытия противовирусных свойств амантадина и ремантадина усилия исследователей направлены на изучение механизма действия этих препаратов. На основании многочисленных данных сформировалось представление о том, что их активность проявляется на ранних стадиях Еирусной репродукции (Бубович В.И. и др., 1987; Козелецкая К.Н. И др., 1982; Bukrinskaya A.G. et al., 1982; Hay A.J. et al., 1985).
Одним из факторов, определяющих характер действия производных адамантана, является используемая концентрация. Рядом исследователей показано, что в малых количествах эти вещества селективно ингибируют размножение вирусов гриппа А, затрагивая М-белок, в больших - действуют по типу лизосомотрошшх веществ, подавляя репродукцию многих оболочэчных вирусов (Бубович В.И. и др., 1987). В промежуточном диапазоне нетоксических концентраций отмечается снижение антивирусного действия этих препаратов (Вотяков В.И. И соавт. 1931, 1982, 1984; Soiioltissek С. et al. 1979). При этом причина такой необычной дозовой зависимости признается неизвестной (Hay A.J. et al. 1986).
До настоящей работы этот факт практически не изучался. Вместе с тем его углубленное исследование имеет существенное значение. Новые синтетические соединения ряда адамантана, как и карбоциклические структуры в целом, остаются перспективным источником ингибиторов возбудителей целого ряда вирусных инфекций (Вотяков В.И., Галегов Г.А., 1983; Индулен М.К. и др., 1986; Бореко Е.И". и др., 1989). В связи с этим изучение особенностей их антивирусного действия необходимо для правильного понимания роли ингибиторов этого класса в подавлении вирусопосредовэншх процессов на различных уроЕпях организации биологических струн-
тур. Не меньшее значение такое исследование имеет для разработки новых противовирусных средств на основе производных кэрбоцикли-ческого ряда.
Цель и задачи исследования.
Цель работы заключалась в выявлении закономерностей антивирусного действия ремантадина и других карбоциклических соединений в диапазоне нетоксических концентраций, превышающих максимально аффективную.
Основные задачи работы состояли в следующем: I).определить границы диапазона концентрацій! ремантадина, в пределах которого выявляется снижение антивирусного действия с увеличением используемых доз; 2) выявить распространенность этого явления в эксперт,» нтах с различными штаммами вирусов гриппа, парамиксовирусом, различными клеточными культурами и противовирусными веществам! различных химических классов; 3) исследовать возможность проявления снижения эффективности ремантадина на куриных эмбрионах.і лабораторных животных; 4) изучить функциональные особенности ви руса гриппа, репродуцировавшегося в присутствии ремантадина : концентрациях, превышающих максимально эффективную; 5) выявит структурные особенности данного вируса.
Научная новизна.
Показано, что особенностью антивирусного действия реманта дина является снижение эффективности в нетоксичных концентрації ях, .превышающих максимально ингибирующую. Впервые установлене что подобная зависимость аффекта от дозы характерна также д; ряда известных и оригинальных веществ карбоциклического строєні с противовирусными свойствами и не проявляется в экспериментах ингибиторами других химических групп (серу-, германийсодержаиц органические соединения, производные акридина, нуклеозиды и др:
гае гетероциклические вещества). Снижение антивирусного действия ремантадина в упомянутых концентрациях установлено в различных лабораторних тест-системах с вирусами гриппа А, В и впервые - с PC-вирусом. Также впервые этот эффект зарегистрирован в экспериментах на куриных эмбрионах и лабораторных животных.
Учитывая, что исследуемая особенность антивирусного действия характерна для соединений определенного строения и воспроизводится в различных тест-системах, известные и полученные нами факты обобщены как феномен парадоксального снижения антивирусного действия веществ карбоциклического строения.
Выделен вариант вируса, репродуцирующийся в присутствии нетоксичных концентраций ремантадина, превышающих максимально ин-гибирующую. Разработан способ его получения и впервые установлены структурно-функциональные отличия от исходного FFV.
Практическая значимость работы.
Полученные научные данные дополняют сложившиеся в химиотерапии вирусных инфекций представления о характере действия известных противовирусных препаратов. Возможность проявления описанного в работе феномена следует учитывать при разработке и поиске новых противовирусных препаратов карбоциклического ряда. Это нашло отражение в методических рекомендациях "Первичное изучение антивирусных свойств синтетических и природных соединений" (Минск, 1986) и используется в повседневной практической работе лаборатории доклинического изучения специфической активности ин-гиб. торов вирусов БелНИИЭМ.
Основные положения, выносимые на защиту. I) Феномен парадоксального снижения антивирусного действия карбоциклических веществ с противовирусными свойствами и его проявление в различных лабораторных тестах с представителями се-
- b -
майств орто- и парамиксовирусов. 2) Структурно-функциональные отличия вируса, репродуціфущегося в присутствии нетоксических концентраций ремантадина, превышающие максимально действующую, от исходного FPV.
Апробация работы.
Материалы по теме диссертации доложены на Всесоюзных конференциях, приуроченных к заседаниям проблемных комиссий "Химиотерапия и химиопрофилактика вирусных инфекций; особо опасные и медленные (вирусные) инфекции" (Минск, 1988), "Грипп и гриппопо-добные заболевания, их профилактика и лечение" (Ленинград, 1989), а также на Всесоюзной конференции "Перспективы развития химии каркасных соединений и их применение в народном хозяйстве" (Куйбышев, 1989), Всесоюзном симпозиуме "НоЕые подходы к химиотерапии вирусных инфекций" (Рига, 1939), IX Всесоюзном симпозиуме по целенаправленному изысканию лекарственных вєщєсте (Рига, 1991).
Публикации.
По материалам диссертации опубликовано 8 работ, получены 1 авторское свидетельство СССР на изобретение, изданы 1 союзные методические рекомендации.
Объем и структура работы.
Диссертация изложена на 140 с. машинописного текста, иллюстрирована 13 рисунками и 17 таблицами. Работа состоит из введения, обзора литературы, 4-х глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 21 з источников.